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大鼠GAP-43基因的克隆及其在COS-7细胞的表达

胡建国 王凤超 钟政荣 陆佩华

引用本文:
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大鼠GAP-43基因的克隆及其在COS-7细胞的表达

    作者简介: 胡建国(1972-),男,博士,助理研究员.
  • 基金项目:

    安徽省教育厅自然科学基金重点项目(2006KJ098A)

    国家重点基础研究发展计划(973)项目(2003CB515302)

    安徽省高校青年教师科研资助计划项目(2006jql176)

  • 中图分类号: Q343.1;R446.63

Cloning of rat GAP-43 gene and its expression in COS-7 cells

  • CLC number: Q343.1;R446.63

  • 摘要: 目的: 克隆大鼠GAP-43基因,构建其真核表达载体,并观察其在哺乳动物细胞COS-7中的表达。方法: 采用RT-PCR方法,以大鼠少突胶质前体细胞RNA为模板,扩增GAP-43基因,定向克隆到pEGFP-N3载体中。以LipofectamineTM 2000试剂转染pEGFP-N3-GAP-43表达载体至COS-7细胞中进行瞬时真核表达。以免疫荧光方法鉴定GAP-43的表达。结果: 从大鼠少突胶质前体细胞中克隆到序列正确的GAP-43全长编码序列。所构建的GAP-43质粒在COS-7细胞中获得高效表达。结论: 大鼠GAP-43基因的克隆、真核表达载体的构建及在COS-7中的表达获得成功,为进一步研究其功能,尤其是探讨其在少突胶质细胞发育中的作用奠定了基础。
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出版历程
  • 收稿日期:  2006-11-02

大鼠GAP-43基因的克隆及其在COS-7细胞的表达

    作者简介: 胡建国(1972-),男,博士,助理研究员.
  • 1. 蚌埠 医学院 第一附属 医院 检 验科, 安徽 蚌 埠 233004;
  • 2. 上海第二医科大学 神经生物学实验室, 上海 200025
基金项目:  安徽省教育厅自然科学基金重点项目(2006KJ098A)国家重点基础研究发展计划(973)项目(2003CB515302)安徽省高校青年教师科研资助计划项目(2006jql176)

摘要: 目的: 克隆大鼠GAP-43基因,构建其真核表达载体,并观察其在哺乳动物细胞COS-7中的表达。方法: 采用RT-PCR方法,以大鼠少突胶质前体细胞RNA为模板,扩增GAP-43基因,定向克隆到pEGFP-N3载体中。以LipofectamineTM 2000试剂转染pEGFP-N3-GAP-43表达载体至COS-7细胞中进行瞬时真核表达。以免疫荧光方法鉴定GAP-43的表达。结果: 从大鼠少突胶质前体细胞中克隆到序列正确的GAP-43全长编码序列。所构建的GAP-43质粒在COS-7细胞中获得高效表达。结论: 大鼠GAP-43基因的克隆、真核表达载体的构建及在COS-7中的表达获得成功,为进一步研究其功能,尤其是探讨其在少突胶质细胞发育中的作用奠定了基础。

English Abstract

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