• 中国科技论文统计源期刊
  • 中国科技核心期刊
  • 中国高校优秀期刊
  • 安徽省优秀科技期刊

留言板

尊敬的读者、作者、审稿人, 关于本刊的投稿、审稿、编辑和出版的任何问题, 您可以本页添加留言。我们将尽快给您答复。谢谢您的支持!

姓名
邮箱
手机号码
标题
留言内容
验证码

Nogo-66蛋白氨基酸肽的克隆及在原核细胞的表达

陈昌杰 章尧

引用本文:
Citation:

Nogo-66蛋白氨基酸肽的克隆及在原核细胞的表达

    作者简介: 陈昌杰(1968-),男,安徽灵璧县人,博士,副教授.
  • 基金项目:

    安徽省教育厅自然科学研究资助项目(2001kj169)

  • 中图分类号: Q593.2;R394.3

Cloning and expression of nogo-66 protein in prokaryotic cells

  • CLC number: Q593.2;R394.3

  • 摘要: 目的: 克隆编码Nogo-66氨基酸多肽基因,构建原核重组表达载体,并诱导其在大肠埃希菌BL21(DE3)中表达。方法: 逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法扩增出编码Nogo蛋白环外-66氨基酸多肽基因,将其克隆于T载体PMD18-T,酶切鉴定后再亚克隆于原核表达载体pET-42a(+),酶切及测序证实序列正确后,转化大肠埃希菌BL21(DE3),经异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导表达融合蛋白-Nogo-66。结果: 克隆了编码Nogo蛋白环外-66氨基酸多肽基因,构建了融合蛋白的重组表达质粒,融合蛋白的表达随着时间延长增加。结论: 获得了编码Nogo蛋白环外-66氨基酸多肽基因及其原核表达产物,对研究Nogo蛋白的生物学功能及其mAb的制备奠定基础。
  • [1] 陈丽周浩何宏天管政 . 人HNA-3a基因的克隆及其在HEK-293细胞的表达. 蚌埠医学院学报, 2019, 44(1): 6-8,13. doi: 10.13898/j.cnki.issn.1000-2200.2019.01.002
    [2] 王朝兰汤冬生王业梅姚勇汪学龙 . 猪囊尾蚴GP50编码基因的克隆和序列分析. 蚌埠医学院学报, 2012, 36(3): 256-259.
    [3] 马志刚钱中清 . 结核分枝杆菌H37Ra株fbpC基因的克隆与表达. 蚌埠医学院学报, 2014, 38(2): 145-147.
    [4] 薛玉芹王英陈勇李江艳李倩唐洁夏惠王雪梅方强 . 结核分枝杆菌H37Ra株CFP10基因的克隆与序列分析. 蚌埠医学院学报, 2013, 37(11): 1385-1388.
    [5] 王英薛玉芹王雪梅陈勇李江艳李倩唐洁夏惠方强 . 结核分枝杆菌H37Ra菌株ESAT6基因的克隆及序列分析. 蚌埠医学院学报, 2014, 39(10): 1324-1326.
    [6] 郭术俊赵保明吕合作胡建国 . 用于双分子荧光互补技术的Olig1/Id2基因真核表达载体的构建和鉴定. 蚌埠医学院学报, 2010, 35(10): 973-975.
    [7] 程铁军 . 下调Yes相关蛋白对胃癌细胞克隆形成能力和能量代谢的影响. 蚌埠医学院学报, 2019, 44(3): 297-301. doi: 10.13898/j.cnki.issn.1000-2200.2019.03.005
    [8] 胡建国王凤超钟政荣陆佩华 . 大鼠GAP-43基因的克隆及其在COS-7细胞的表达. 蚌埠医学院学报, 2007, 32(3): 253-255.
    [9] 刘文游牧饶圣宏徐振山宋礼华 . 日本血吸虫重组蛋白SjGST的表达纯化及单克隆抗体的制备和特性鉴定. 蚌埠医学院学报, 2010, 35(12): 1197-1199.
    [10] 房兵孙淼李友建武晓茜耿家珍邵先安 . 人-防御素-3与人表皮生长因子融合蛋白的克隆及原核表达. 蚌埠医学院学报, 2012, 36(5): 500-504.
    [11] 张玉心马涛陈治文夏俊 . 肿瘤坏死因子-α转换酶基因金属蛋白酶区的克隆及表达. 蚌埠医学院学报, 2006, 31(1): 4-6.
    [12] 骆江坤方强齐文娟王雪梅 . 人白细胞介素23 p19亚基基因的克隆和序列分析. 蚌埠医学院学报, 2010, 35(6): 545-547.
    [13] 袁远英方强孙新王雪梅李柏青夏惠 . 猪白细胞介素12 p35、p40亚基基因的克隆和序列分析. 蚌埠医学院学报, 2008, 33(6): 644-647.
    [14] 彭美玉李柏青 . 抗结核杆菌耐热抗原单克隆抗体杂交瘤细胞的建立及其特性的初步鉴定. 蚌埠医学院学报, 2010, 35(10): 976-978.
    [15] 夏惠方强孙新王明丽 . 抗猪囊尾蚴KD26抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株建立和特性鉴定. 蚌埠医学院学报, 2004, 29(2): 99-101.
    [16] 高迎陶志勇夏惠陈勇王雪梅方强 . 间日疟原虫醛缩酶的克隆、表达与初步鉴定. 蚌埠医学院学报, 2013, 37(7): 777-780.
    [17] 江金群张玉心徐成岭胡建国马杰石莹 . Hes1基因启动子的克隆及活性研究. 蚌埠医学院学报, 2013, 37(9): 1073-1076.
    [18] 李光友陈勇夏惠方强刘丹买月琴贺文欣 . 间日疟原虫MSP1-19基因的克隆与表达. 蚌埠医学院学报, 2011, 36(9): 935-937.
    [19] 陈传好陈昌杰赵莉 . 人神经营养素-3全长基因克隆及序列分析. 蚌埠医学院学报, 2005, 30(1): 9-11.
    [20] 李卫鹏郑佐娅王红王从珠杭勤赵卫国 . B型钠尿肽基因的克隆和原核表达载体构建及纯化. 蚌埠医学院学报, 2007, 32(1): 14-17.
  • 加载中
计量
  • 文章访问数:  1128
  • HTML全文浏览量:  100
  • PDF下载量:  1
  • 被引次数: 0
出版历程
  • 收稿日期:  2005-03-16

Nogo-66蛋白氨基酸肽的克隆及在原核细胞的表达

    作者简介: 陈昌杰(1968-),男,安徽灵璧县人,博士,副教授.
  • 蚌埠医学院生物化学与分子生物学教研室, 安徽蚌埠 233003
基金项目:  安徽省教育厅自然科学研究资助项目(2001kj169)

摘要: 目的: 克隆编码Nogo-66氨基酸多肽基因,构建原核重组表达载体,并诱导其在大肠埃希菌BL21(DE3)中表达。方法: 逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法扩增出编码Nogo蛋白环外-66氨基酸多肽基因,将其克隆于T载体PMD18-T,酶切鉴定后再亚克隆于原核表达载体pET-42a(+),酶切及测序证实序列正确后,转化大肠埃希菌BL21(DE3),经异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导表达融合蛋白-Nogo-66。结果: 克隆了编码Nogo蛋白环外-66氨基酸多肽基因,构建了融合蛋白的重组表达质粒,融合蛋白的表达随着时间延长增加。结论: 获得了编码Nogo蛋白环外-66氨基酸多肽基因及其原核表达产物,对研究Nogo蛋白的生物学功能及其mAb的制备奠定基础。

English Abstract

目录

    /

    返回文章
    返回