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潜伏膜蛋白1基因真核表达载体的构建 及其在鼻咽癌细胞中的表达

刘晓佳 谭宁 田晶 曾思恩

引用本文:
Citation:

潜伏膜蛋白1基因真核表达载体的构建 及其在鼻咽癌细胞中的表达

    作者简介: 刘晓佳(1987-),女,硕士研究生.
    通讯作者: 曾思恩, zse@glmc.edu.cn
  • 基金项目:

    国家自然科学基金资助项目(81160256)

    广西壮族自治区研究生创新计划(YCSW2012107)

Construction of eukaryotic expression vector containing latent membrane protein 1 and its expression in human nasopharyngeal carcinoma cells

    Corresponding author: ZENG Sien, zse@glmc.edu.cn
  • Fund Project: Project supported by the National Natural Science Fund (81160256) the Guangxi Zhuang Autonomous Region Graduate Innovation Program (YCSW2012107)

  • 摘要: 目的:构建真核细胞中表达潜伏膜蛋白1(LMP1)基因的增强荧光表达载体,观察其在鼻咽癌细胞中的表达。方法:从鼻咽癌C15细胞中获取编码LMP1的cDNA片段,经双酶切亚克隆到pEGFP-C1质粒载体,构建pEGFP-C1-LMP1真核表达载体。重组质粒经双酶切和测序鉴定,利用脂质体介导的方法将pEGFP-C1-LMP1体外瞬时转染鼻咽癌CNE2细胞,激光共聚焦显微镜观察LMP1的表达及其细胞内定位。结果:重组载体经SalⅠ和BglⅡ双酶切后,行琼脂糖凝胶电泳,可见1条与理论预测值一致的目的条带。DNA序列鉴定证实插入片段与GenBank提供的序列一致。将pEGFP-C1-LMP1瞬时转染鼻咽癌细胞株CNE2后,LMP1基因表达产物定位于细胞膜和细胞质中。结论:成功构建LMP1真核表达载体,并可在鼻咽癌CNE2细胞株中表达。
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出版历程
  • 收稿日期:  2014-02-11
  • 刊出日期:  2014-05-15

潜伏膜蛋白1基因真核表达载体的构建 及其在鼻咽癌细胞中的表达

    通讯作者: 曾思恩, zse@glmc.edu.cn
    作者简介: 刘晓佳(1987-),女,硕士研究生.
  • 1. 1. 病理学教研室;
  • 2.  2. 科学实验中心;
  • 3.  3. 生理学教研室,广西 桂林 541004
基金项目:  国家自然科学基金资助项目(81160256)广西壮族自治区研究生创新计划(YCSW2012107)

摘要: 目的:构建真核细胞中表达潜伏膜蛋白1(LMP1)基因的增强荧光表达载体,观察其在鼻咽癌细胞中的表达。方法:从鼻咽癌C15细胞中获取编码LMP1的cDNA片段,经双酶切亚克隆到pEGFP-C1质粒载体,构建pEGFP-C1-LMP1真核表达载体。重组质粒经双酶切和测序鉴定,利用脂质体介导的方法将pEGFP-C1-LMP1体外瞬时转染鼻咽癌CNE2细胞,激光共聚焦显微镜观察LMP1的表达及其细胞内定位。结果:重组载体经SalⅠ和BglⅡ双酶切后,行琼脂糖凝胶电泳,可见1条与理论预测值一致的目的条带。DNA序列鉴定证实插入片段与GenBank提供的序列一致。将pEGFP-C1-LMP1瞬时转染鼻咽癌细胞株CNE2后,LMP1基因表达产物定位于细胞膜和细胞质中。结论:成功构建LMP1真核表达载体,并可在鼻咽癌CNE2细胞株中表达。

English Abstract

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