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日本血吸虫重组蛋白SjGST的表达纯化及单克隆抗体的制备和特性鉴定

刘文 游牧 饶圣宏 徐振山 宋礼华

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日本血吸虫重组蛋白SjGST的表达纯化及单克隆抗体的制备和特性鉴定

    作者简介: 刘文(1985-),女,硕士研究生.
  • 基金项目:

    国家高技术研究发展计划(863计划)资助项目(2004AA2Z3570)

  • 中图分类号: R383.24

Purification of recombinant Schistosoma japonicum protein SjGST and preparation and characterization of the monoclonal antibody

  • CLC number: R383.24

  • 摘要: 目的:获取高纯度的日本血吸虫重组GST蛋白(rSjGST),并制备单克隆抗体。方法:纯化rSjGST后,以其作为抗原,免疫Balb/c雌鼠,并用杂交瘤技术制备抗rSjGST的单克隆抗体,以ELISA方法测定抗体的效价,以蛋白质免疫印迹法测定抗体的特异性。结果:纯化出大量的高纯度rSjGST,并且筛选出能够稳定分泌抗rSjGST单抗的杂交瘤细胞株3C12。用试剂盒检测出单抗的亚型为IgG1。结论:依靠大肠埃希菌表达系统,高效表达出rSjGST,成功制备单克隆抗体,为血吸虫病免疫诊断提供了研究基础。
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出版历程
  • 收稿日期:  2010-08-11

日本血吸虫重组蛋白SjGST的表达纯化及单克隆抗体的制备和特性鉴定

    作者简介: 刘文(1985-),女,硕士研究生.
  • 1. 安徽医科大学生物化学与分子生物学教研室, 安徽合肥 230032;
  • 2. 安徽大学生命科学院, 安徽合肥 230039;
  • 3. 安科生物工程集团股份有限公司, 安徽合肥 230088
基金项目:  国家高技术研究发展计划(863计划)资助项目(2004AA2Z3570)

摘要: 目的:获取高纯度的日本血吸虫重组GST蛋白(rSjGST),并制备单克隆抗体。方法:纯化rSjGST后,以其作为抗原,免疫Balb/c雌鼠,并用杂交瘤技术制备抗rSjGST的单克隆抗体,以ELISA方法测定抗体的效价,以蛋白质免疫印迹法测定抗体的特异性。结果:纯化出大量的高纯度rSjGST,并且筛选出能够稳定分泌抗rSjGST单抗的杂交瘤细胞株3C12。用试剂盒检测出单抗的亚型为IgG1。结论:依靠大肠埃希菌表达系统,高效表达出rSjGST,成功制备单克隆抗体,为血吸虫病免疫诊断提供了研究基础。

English Abstract

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