人外周血白介素-22产生细胞在不同淋巴细胞亚群中的比例

梁华; 梁友宝; 李柏青

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人外周血白介素-22产生细胞在不同淋巴细胞亚群中的比例

梁华 , 梁友宝 , 李柏青

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人外周血白介素-22产生细胞在不同淋巴细胞亚群中的比例

蚌埠医学院免疫学教研室, 安徽省感染与免疫重点实验室, 安徽蚌埠 233030

作者简介: 梁华(1975-),男,硕士研究生.

基金项目:
国家科技重大专项基金资助项目(2008ZX10003-011)
中图分类号: R446.113

Distribulion of interleukin-22 producing cells in lymphocyte subpopulations from peripheral blood

Department of Immunology, Bengbu Medical College, Anhui Key Laboratory of Infection and Immunity, Bengbu Anhui 233030, China
CLC number: R446.113

摘要: 目的:采用流式细胞术(flow cytom etry,FCM)检测人外周血不同淋巴细胞亚群中白介素-22(IL-22)产生细胞的比例。方法:健康人外周全血用肝素抗凝管采集后与相同体积RPM I 1640培养液混匀,加入佛波酯和离子霉素,于37℃、5% CO₂静置培养2 h,再加入莫能霉素后继续培养4 h收集细胞。用荧光素标记单抗进行细胞表面抗原和胞内细胞因子染色,用FCM检测表达IL-22、IL-17的细胞在不同淋巴细胞亚群中的比例。结果:IL-22产生细胞在CD3⁺T细胞、CD4⁺T细胞、CD8⁺T细胞、自然杀伤(NK)细胞和B细胞的表达比例分别为1.83%、2.12%、0.67%、1.96%和1.09%,CD4⁺T细胞中的比例明显高于CD8⁺T细胞中的比例(P<0.01)。另外,在CD3⁺T细胞、CD4⁺T细胞和CD8⁺T细胞中,均检测到共表达IL-22和IL-17的细胞,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:用FCM检测IL-22产生细胞在CD4⁺T细胞、CD8⁺T细胞、NK细胞和B细胞均有表达,在CD4⁺T细胞的比例明显高于CD8⁺T细胞。
- 流式细胞术 /
- 白细胞介素-22 /
- 白细胞介素-17 /
- 淋巴细胞
Abstract: Objective: To establish a method for detection of interleukin-22 producing cells in lymphocyte subpopulations from peripheral blood by flow cytometry.Methods: Peripheral blood samples were mixed with same volume of RPMI 1640 medium and stimulated with PMA and ionomycin for 6 hours in the presence of monensin at last 4 hours at 37℃,5% CO₂.The stimulated cells were stained for surface molecules or intracellular cytokines with fluorochrome-conjugated mAbs.The proportions of IL-22 producing cells and IL-17 producing cells among different lymphocyte subsets were detected by flow cytometry.Results: The proportions of IL-22 producing cells among CD3⁺T cells,CD4⁺T cells,CD8⁺T cells,NK cells and B lymphocytes were 1.83%,2.12%,0.67%,1.96% and 1.09%,respectively.The amount of IL-22 producing cells among CD4⁺T cells was significantly higher than that among CD8⁺T cells(P<0.01).In addition,IL-22 and IL-17 co-expressing cells were also detected in CD3⁺T cells,CD4⁺T cells,and CD8⁺T cells.Conclusions: By using flow cytometry technique,the IL-22 producing cells exist among all CD4⁺T cells,CD8⁺T cells,NK cells and B lymphocytes.The proportion of IL-22 producing cells in CD4⁺T cells is higher than that in CD8⁺T cells.
- flow cytometry /
- interleukin-22 /
- interleukine-17 /
- lymphocyte

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人外周血白介素-22产生细胞在不同淋巴细胞亚群中的比例

作者简介: 梁华(1975-),男,硕士研究生.

蚌埠医学院免疫学教研室, 安徽省感染与免疫重点实验室, 安徽蚌埠 233030

收稿日期: 2011-04-18

基金项目: 国家科技重大专项基金资助项目(2008ZX10003-011)

关键词:

摘要: 目的:采用流式细胞术(flow cytom etry,FCM)检测人外周血不同淋巴细胞亚群中白介素-22(IL-22)产生细胞的比例。方法:健康人外周全血用肝素抗凝管采集后与相同体积RPM I 1640培养液混匀,加入佛波酯和离子霉素,于37℃、5% CO₂静置培养2 h,再加入莫能霉素后继续培养4 h收集细胞。用荧光素标记单抗进行细胞表面抗原和胞内细胞因子染色,用FCM检测表达IL-22、IL-17的细胞在不同淋巴细胞亚群中的比例。结果:IL-22产生细胞在CD3⁺T细胞、CD4⁺T细胞、CD8⁺T细胞、自然杀伤(NK)细胞和B细胞的表达比例分别为1.83%、2.12%、0.67%、1.96%和1.09%,CD4⁺T细胞中的比例明显高于CD8⁺T细胞中的比例(P<0.01)。另外,在CD3⁺T细胞、CD4⁺T细胞和CD8⁺T细胞中,均检测到共表达IL-22和IL-17的细胞,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:用FCM检测IL-22产生细胞在CD4⁺T细胞、CD8⁺T细胞、NK细胞和B细胞均有表达,在CD4⁺T细胞的比例明显高于CD8⁺T细胞。