转染人核糖核酸酶抑制因子对乳腺癌细胞增殖的抑制作用

唐晓燕; 夏俊; 张克昌; 陈俊霞; 崔秀云

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转染人核糖核酸酶抑制因子对乳腺癌细胞增殖的抑制作用

唐晓燕 , 夏俊 , 张克昌 , 陈俊霞 , 崔秀云

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转染人核糖核酸酶抑制因子对乳腺癌细胞增殖的抑制作用

1. 蚌埠医学院临床检验诊断学实验中心, 安徽蚌埠 233030;
2. 蚌埠医学院生物化学与分子生物学教研室, 安徽蚌埠 233030;
3. 重庆医科大学生物学教研室, 重庆 400016;
4. 大连医科大学生物化学与分子生物学教研室, 辽宁大连 116027

作者简介: 唐晓燕(1978-),女,硕士研究生.

基金项目:
重庆科技厅资助课题(CSTC,2006BB528)

安徽省教育厅自然科学研究资助项目(2006kj394B)
中图分类号: Q554.5

Inhibitory effect of transfection of human ribonuclease inhibitor on the proliferation in breast cancer cells

1. Research Center of Clinical Laboratory Science, Bengbu Medical College, Bengbu Anhui 233030;
2. Department of Biochemistry and Molecular Biology, Bengbu Medical College, Bengbu Anhui 233030;
3. Department of Biology, Chongqing Medical University, Chongqing 400016;
4. Department of Biochemistry and Molecular Biology, Dalian Medical University, Dalian Liaoning 116027, China
CLC number: Q554.5

摘要: 目的:利用脂质体转染技术上调乳腺癌MDA-MB-231细胞中核糖核酸酶抑制因子(ribonuclease inhibitor,RI)水平,探讨RI对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖及细胞周期的影响。方法:采用脂质体转染法,将RI基因转入乳腺癌MDA-MB-231细胞,经G418筛选后获得稳定高表达RI的亚克隆细胞系MDA-MB-231/pLNCX-RI。RT-PCR、Western-blot等方法鉴定RI在转染细胞中的表达;四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞生长情况,流式细胞术检测细胞周期变化。结果:成功构建了稳定高表达RI的亚克隆细胞系MDA-MB-231/pLNCX-RI;MTT结果显示,转染的RI基因能抑制细胞恶性增殖(P<0.01);细胞周期分析显示转染的RI基因使细胞停留在G₀/G₁期,S期细胞明显减少(P<0.01)。结论:RI能抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231的恶性增殖。
- 核糖核酸酶抑制因子 /
- 乳腺癌细胞MDA-MB-231 /
- 细胞增殖 /
- 细胞周期
Abstract: Objective: To study the effect of liposome targeting ribonuclease inhibitor(RI) on the proliferation and cell cycle of breast cancer cell line MDA-MB-231.Methods: By the induction of liposome,pLNCX-RI and eukarytic expression vectors pLNCX were transfected into breast cell line MDA-MB-231.Then the subclone cell lines MDA-MB-231-231/pLNCX-RI which high expressed RI stably were obtained by persistent G418 selection.Western-blot and RT-PCR were used to detect RI expression level in transfected cell line;Cell prolifetation was analyzed by MTT assay;Cell cycle was analyzed by flow cytometry.Results: The subclone cell line MDA-MB-231-231/pLNCX-RI which high expressed RI stably was successfully selected.MTT showed the cell proliferation was inhibited(P<0.01).Cells stopped at G₀/G₁ phase and cell number in S phase was sharply decreased by the induction of liposome(P<0.01).Conclusions: The malignant proliferation of breast cancer cells is inhibited by RI.
- ribonuclease inhibitor /
- breast cancer MDA-MB-231 cells /
- cell multiplication /
- cell cycle

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转染人核糖核酸酶抑制因子对乳腺癌细胞增殖的抑制作用

作者简介: 唐晓燕(1978-),女,硕士研究生.

1. 蚌埠医学院临床检验诊断学实验中心, 安徽蚌埠 233030;
2. 蚌埠医学院生物化学与分子生物学教研室, 安徽蚌埠 233030;
3. 重庆医科大学生物学教研室, 重庆 400016;
4. 大连医科大学生物化学与分子生物学教研室, 辽宁大连 116027

收稿日期: 2008-09-02

基金项目: 重庆科技厅资助课题(CSTC,2006BB528)安徽省教育厅自然科学研究资助项目(2006kj394B)

关键词:

摘要: 目的:利用脂质体转染技术上调乳腺癌MDA-MB-231细胞中核糖核酸酶抑制因子(ribonuclease inhibitor,RI)水平,探讨RI对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖及细胞周期的影响。方法:采用脂质体转染法,将RI基因转入乳腺癌MDA-MB-231细胞,经G418筛选后获得稳定高表达RI的亚克隆细胞系MDA-MB-231/pLNCX-RI。RT-PCR、Western-blot等方法鉴定RI在转染细胞中的表达;四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞生长情况,流式细胞术检测细胞周期变化。结果:成功构建了稳定高表达RI的亚克隆细胞系MDA-MB-231/pLNCX-RI;MTT结果显示,转染的RI基因能抑制细胞恶性增殖(P<0.01);细胞周期分析显示转染的RI基因使细胞停留在G₀/G₁期,S期细胞明显减少(P<0.01)。结论:RI能抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231的恶性增殖。