• 中国科技论文统计源期刊
  • 中国科技核心期刊
  • 中国高校优秀期刊
  • 安徽省优秀科技期刊

留言板

尊敬的读者、作者、审稿人, 关于本刊的投稿、审稿、编辑和出版的任何问题, 您可以本页添加留言。我们将尽快给您答复。谢谢您的支持!

姓名
邮箱
手机号码
标题
留言内容
验证码

双重实时荧光PCR快速检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌方法的建立

倪勇 孙余婕

引用本文:
Citation:

双重实时荧光PCR快速检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌方法的建立

    作者简介: 倪勇(1971-),男,主管检验师.
  • 中图分类号: R378.11

Research on rapid detection of methicillin resistant Staphylococcus aureus by duplex realtime-PCR

  • CLC number: R378.11

  • 摘要: 目的:建立一种能快速检测金黄色葡萄球菌,同时能快速鉴别是否具有耐甲氧西林基因的双重实时荧光PCR方法。方法:以金黄色葡萄球菌特异NUC基因的保守区为靶区域设计特异引物和TaqMan荧光探针,同时针对耐甲氧西林特异MecA基因设计另一对引物和探针;2条探针的5'端标记不同荧光报告基团(FAM和HEX),3'端标记荧光淬灭基团,建立双重实时荧光PCR方法,检测样本中的金黄色葡萄球菌以及鉴别其是否具有耐甲氧西林基因,并对双重实时荧光PCR方法的的特异性和灵敏度进行评价。结果:双重荧光PCR方法可对金黄色葡萄球菌及耐甲氧西林基因分别进行特异扩增,两者均为阳性时可判为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌;金黄色葡萄球菌特异基因特异扩增阳性而耐甲氧西林基因特异扩增阴性可判为甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌;对同种属的表皮葡萄球菌、粪链球菌、藤黄微球菌等病原体均无扩增;双重实时荧光PCR方法的灵敏度最低可检测至100个菌体。结论:建立的实时荧光PCR检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的方法不仅能实现对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌社区感染和临床感染的监控,同时也可为临床上耐甲氧西林葡萄球菌感染患者的用药提供必要的依据。
  • [1] 黄峰秦淑国边其侠许元元 . PCR检测耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌耐药基因. 蚌埠医学院学报, 2011, 36(10): 1110-1112.
    [2] 蔡朝阳马筱玲纪冰赵燕 . 金黄色葡萄球菌毒素基因的检测及临床应用. 蚌埠医学院学报, 2008, 33(1): 9-12.
    [3] 茆海丰秦岭杨晋赵勇营丽娟 . 头孢西丁和拉氧头孢纸片扩散法检测耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌的方法比较. 蚌埠医学院学报, 2010, 35(5): 513-516.
    [4] 崔琢王淑民 . 实时荧光定量PCR检测乙型肝炎病毒DNA的临床应用价值. 蚌埠医学院学报, 2004, 29(1): 67-68.
    [5] 管俊昌夏佩莹唐素兰 . 金黄色葡萄球菌L型产B型肠毒素及其基因的研究. 蚌埠医学院学报, 2004, 29(4): 283-285.
    [6] 胡小冬崔洁唐素兰管俊昌 . 金黄色葡萄球菌L型对宫颈癌细胞生长的影响. 蚌埠医学院学报, 2017, 42(11): 1436-1438. doi: 10.13898/j.cnki.issn.1000-2200.2017.11.002
    [7] 刘婷婷李凤云 . 金黄色葡萄球菌致病物质与细胞凋亡关系的研究进展. 蚌埠医学院学报, 2009, 34(5): 460-461.
    [8] 张涛马筱玲戴媛媛鲁怀伟陈多炎 . 万古霉素耐药金黄色葡萄球菌耐药机制探讨. 蚌埠医学院学报, 2011, 36(7): 690-692.
    [9] 唐洁申林李柏青赵皓余晾郑洪波 . SYBR Green实时定量PCR检测急性髓系白血病患者BAALC基因表达. 蚌埠医学院学报, 2010, 35(7): 656-659.
    [10] 宁仁德张先龙 . 金黄色葡萄球菌体外感染侵入人成骨细胞的实验研究. 蚌埠医学院学报, 2010, 35(7): 652-655.
    [11] 赵燕马筱玲蔡朝阳 . 不同感染部位分离的金黄色葡萄球菌一般特征和耐药性分析. 蚌埠医学院学报, 2008, 33(4): 474-477.
    [12] 杨克红祝晓光蒋志文刘浩吴华璞 . 实时RT-PCR定量检测NGF mRNA表达水平方法的建立. 蚌埠医学院学报, 2012, 36(1): 5-7.
    [13] 郝维敏刘杰杨晓春 . 标本因素对荧光定量PCR检测HBV DNA的影响. 蚌埠医学院学报, 2011, 36(3): 295-297.
    [14] 李倩珺徐韫健林豪森 . 荧光定量PCR检测Kif2a在男性精液中的表达. 蚌埠医学院学报, 2018, 43(5): 639-641,644. doi: 10.13898/j.cnki.issn.1000-2200.2018.05.023
    [15] 陈继梅施志农田芸 . 荧光定量PCR检测HBV-DNA与血清HBV标志物关系探讨. 蚌埠医学院学报, 2009, 34(2): 158-159.
    [16] 李秀义高冬梅潘继文蔡瑜温和 . 荧光定量PCR检测乙型肝炎病毒DNA的临床价值. 蚌埠医学院学报, 2014, 38(6): 804-806.
    [17] 孙垚汪洪涛陈立徐志庆宋传旺李柏青 . 荧光定量RT-PCR技术检测健康人外周血γδT细胞细胞受体分子Vδ1~8亚群分布. 蚌埠医学院学报, 2015, 40(9): 1148-1151. doi: 10.13898/j.cnki.issn.1000-2200.2015.09.002
    [18] 谢明章边文燕杨清玲陈昌杰 . 多重PCR法检测结核分枝杆菌耐药基因研究. 蚌埠医学院学报, 2011, 36(11): 1173-1176.
    [19] 李静耿志军郑晶王涛应冲涛郭普 . 胶体金免疫层析法快速检测CRE碳青霉烯酶的效果评价. 蚌埠医学院学报, 2021, 46(8): 1089-1092. doi: 10.13898/j.cnki.issn.1000-2200.2021.08.026
    [20] 邬役心沈玉兰 . 三级护理质量控制网络管理模式在床旁快速检测中的应用. 蚌埠医学院学报, 2016, 41(3): 406-407. doi: 10.13898/j.cnki.issn.1000-2200.2016.03.042
  • 加载中
计量
  • 文章访问数:  1580
  • HTML全文浏览量:  107
  • PDF下载量:  21
  • 被引次数: 0
出版历程
  • 收稿日期:  2011-06-03

双重实时荧光PCR快速检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌方法的建立

    作者简介: 倪勇(1971-),男,主管检验师.
  • 1. 安徽省芜湖市中医院检验科, 241000;
  • 2. 安徽省临床检验中心PCR实验室, 安徽合肥 233001

摘要: 目的:建立一种能快速检测金黄色葡萄球菌,同时能快速鉴别是否具有耐甲氧西林基因的双重实时荧光PCR方法。方法:以金黄色葡萄球菌特异NUC基因的保守区为靶区域设计特异引物和TaqMan荧光探针,同时针对耐甲氧西林特异MecA基因设计另一对引物和探针;2条探针的5'端标记不同荧光报告基团(FAM和HEX),3'端标记荧光淬灭基团,建立双重实时荧光PCR方法,检测样本中的金黄色葡萄球菌以及鉴别其是否具有耐甲氧西林基因,并对双重实时荧光PCR方法的的特异性和灵敏度进行评价。结果:双重荧光PCR方法可对金黄色葡萄球菌及耐甲氧西林基因分别进行特异扩增,两者均为阳性时可判为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌;金黄色葡萄球菌特异基因特异扩增阳性而耐甲氧西林基因特异扩增阴性可判为甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌;对同种属的表皮葡萄球菌、粪链球菌、藤黄微球菌等病原体均无扩增;双重实时荧光PCR方法的灵敏度最低可检测至100个菌体。结论:建立的实时荧光PCR检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的方法不仅能实现对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌社区感染和临床感染的监控,同时也可为临床上耐甲氧西林葡萄球菌感染患者的用药提供必要的依据。

English Abstract

目录

    /

    返回文章
    返回