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实时RT-PCR定量检测NGF mRNA表达水平方法的建立

杨克红 祝晓光 蒋志文 刘浩 吴华璞

引用本文:
Citation:

实时RT-PCR定量检测NGF mRNA表达水平方法的建立

    作者简介: 杨克红(1976-),女,讲师。
    通讯作者: 吴华璞, bbmcwu413@sohu.com
  • 基金项目:

    安徽高等学校省级自然科学研究资助项目(KJ2009B214Z)

    蚌埠医学院科研资助项目(BY0820)

Establishment of fluorescent quantitative real time RT-PCR method for detection of the expression of nerve growth factor mRNA

    Corresponding author: WU Hua-pu, bbmcwu413@sohu.com
  • 摘要: 目的:建立一种用SYBR GreenⅠ实时定量逆转录(SYBR GreenⅠQ-RT-PCR)检测大鼠脑组织中神经生长因子(NGF)mRNA基因表达的方法。方法:以Trizol一步法提取大鼠脑组织总RNA,以Oligo(dt)18为引物逆转录产生cDNA,利用SYBRGreenⅠ荧光染料法实时检测NGF mRNA的表达水平。通过熔解曲线分析NGF mRNA检测的特异性,以管家基因-actin为内参照对NGF进行定量分析。结果:建立的大鼠NGF mRNA SYBR GreenⅠ实时检测方法具有良好的特异性和敏感性。结论:成功建立实时RT-PCR检测NGF mRNA基因表达的方法。
  • [1] Mitchell JJ,Paiva M,Walker DW,et al.BDNF and NGF afford in vitro neuroprotection against ethanol combined with acute eschemia and chronic hypoglycemia[J].Dev Neurosci,1999,21(1):68 -75.
    [2] Koda M,Murakami M,Ino H,et al.Brain-derived neurotrophic factor suppresses delayed apoptosis of oligodendrocytes after spinal cord injury in rats[J].Neurotrauma,2002,19(6):777-785.
    [3] Garrido R.Nicotine up-regulates expression of neurotrophic factors and attenuates apoptosis of spinal cord neurons [J].Neurochemistry,2003,47(3):349-355.
    [4] Rebecca A,Kirkland,Geraldine M,et al.Rapid activation of antioxidant defenses by nerve growth factor suppresses reactive oxygen species during neuronal apoptosis evidence for a role in cytochromic redistribution[J].Neuroscience,2007,27(42):11315-11326.
    [5] Cheng B,Mattson MP.NGF and BFGF protect rat and human central neurons against hypoglycemia damage by stabilizing calcium homeostasis[J].Neuron,1991,7(6):1031-1041.
    [6] Shinohama S,Ogawa N,Tamara Y,et al.Protective effect of nerve growth factor against glutamate-induced neurotoxicity in cultured cortical neurons[J].Brain Res,1993,632(1/2):296-302.
    [7] Hou AH.Clinical application and experimental study of pseudoginseng [J].Inf Tradit Chin Med,1999,16(6):21-24.
    [8] 徐淑云,卞如濂,陈修.药理实验方法学[M].3 版.北京:人民 卫生出版社,2001:1065-1066.
    [9] Stults JR,Snoeyenbos-West O,Methe B,et al.Application of the 5 fluorogenic exonuclease assay(Taqman) for quantitative ribosomal DNA and rDNA analysis in sediments [J].Appl Environ Microbiol,2001,67(6):2781-2789.
  • [1] 丁海周建生胡汝麒 . 大鼠坐骨神经去细胞基膜管异体移植的比较研究. 蚌埠医学院学报, 2005, 30(6): 479-482.
    [2] 路晓淼张凯高廷益刘亮杨东昆 . 神经生长因子对大鼠骨髓基质细胞增殖和向成骨分化的影响. 蚌埠医学院学报, 2012, 36(12): 1412-1414.
    [3] 施青青吴蔚孙幸方悦之朱淼顾健倪军 . 定量检测WT-1基因在急性白血病病人中的表达及临床意义. 蚌埠医学院学报, 2020, 45(1): 14-17. doi: 10.13898/j.cnki.issn.1000-2200.2020.01.004
    [4] 李家林李良勇王玉 . 外源性转化生长因子1对大鼠癫痫持续状态后血脑屏障通透性的影响. 蚌埠医学院学报, 2012, 36(7): 748-753.
    [5] 王静郝丽陈卫东 . 普罗布考对糖尿病肾病大鼠肾组织转化生长因子-1及血红素加氧酶-1表达的影响. 蚌埠医学院学报, 2013, 37(10): 1229-1234.
    [6] 范艳萍石建华项平胡小磊苗艳君黄詠齐 . 糖皮质激素对肥胖大鼠和普通大鼠下丘脑神经肽Y mRNA的影响. 蚌埠医学院学报, 2009, 34(5): 369-371.
    [7] 齐琦张玉心赵保明胡建国吕合作陈晓蓉 . Olig1转录因子在大鼠脊髓发育过程中的表达. 蚌埠医学院学报, 2012, 36(4): 373-375.
    [8] 李徽徽汪华学柴继侠于影叶红伟高琴陈晓蓉 . 脓毒症大鼠肾脏结构和功能的改变及核因子-B的表达. 蚌埠医学院学报, 2013, 37(5): 524-527.
    [9] 闫波孟德娣袁丽萍楼研韩静 . 脂肪炎症因子在肾病综合征大鼠肾组织的变化及意义. 蚌埠医学院学报, 2011, 36(7): 680-683.
    [10] 马良龙刘瑞林刘牧林 . 急性胰腺炎大鼠胰腺组织核因子-κB动态变化. 蚌埠医学院学报, 2005, 30(2): 107-109.
    [11] 孙美群陈前芬汪洪涛 . 新生大鼠大脑皮层神经元原代培养与鉴定. 蚌埠医学院学报, 2008, 33(1): 19-21.
    [12] 周礼华徐淑秀江城梅 . 新生大鼠小脑颗粒神经元原代培养与鉴定. 蚌埠医学院学报, 2011, 36(2): 121-123.
    [13] 陈传好韩卉陈昌杰 . 大鼠失神经支配表情肌NT-3基因转染的实验研究. 蚌埠医学院学报, 2004, 29(2): 104-105.
    [14] 吴薇张嘉刘牧林程兴望 . 大黄素、生长抑素对急性胰腺炎大鼠肠黏膜细胞的保护机制. 蚌埠医学院学报, 2006, 31(2): 124-126.
    [15] 陈玉芳苏建华唐金荣肖杭 . 盐酸丁咯地尔对SD大鼠坐骨神经损害后神经元的保护作用. 蚌埠医学院学报, 2006, 31(6): 582-583.
    [16] 李辉康品方徐庆梅戎李孙硕张冰高琴高大胜王洪巨 . 厄贝沙坦对糖尿病大鼠心肌损伤中MAPKs信号通路及相关因子的影响. 蚌埠医学院学报, 2020, 45(11): 1453-1457. doi: 10.13898/j.cnki.issn.1000-2200.2020.11.001
    [17] 蒋锋胡萍萍沈丽萍吴晓红杨平 . 细胞外基质支架对大鼠嗅鞘细胞神经营养素表达的影响. 蚌埠医学院学报, 2010, 35(11): 1087-1090.
    [18] 张璇张卓然段淑荣蒋莱范志新 . 强制性运动康复训练对脑梗死大鼠神经功能及巢蛋白表达的影响. 蚌埠医学院学报, 2015, 40(5): 575-577,581. doi: 10.13898/j.cnki.issn.1000-2200.2015.05.005
    [19] 路黎娟徐梅佳董焱 . 重组人粒细胞集落刺激因子对缺血缺氧性脑损伤新生大鼠凋亡诱导因子表达的影响. 蚌埠医学院学报, 2016, 41(12): 1545-1549. doi: 10.13898/j.cnki.issn.1000-2200.2016.12.002
    [20] 邱艳赵凌杰商玮赵智明蔡辉 . 佐剂性关节炎大鼠骨密度及血清骨保护素和核因子-κB受体激活因子配体的变化. 蚌埠医学院学报, 2014, 39(9): 1153-1155.
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出版历程
  • 收稿日期:  2011-04-07
  • 刊出日期:  2012-01-15

实时RT-PCR定量检测NGF mRNA表达水平方法的建立

    通讯作者: 吴华璞, bbmcwu413@sohu.com
    作者简介: 杨克红(1976-),女,讲师。
  • 1. 蚌埠医学院药理学教研室, 安徽省生化制药工程中心, 安徽蚌埠233030
基金项目:  安徽高等学校省级自然科学研究资助项目(KJ2009B214Z)蚌埠医学院科研资助项目(BY0820)

摘要: 目的:建立一种用SYBR GreenⅠ实时定量逆转录(SYBR GreenⅠQ-RT-PCR)检测大鼠脑组织中神经生长因子(NGF)mRNA基因表达的方法。方法:以Trizol一步法提取大鼠脑组织总RNA,以Oligo(dt)18为引物逆转录产生cDNA,利用SYBRGreenⅠ荧光染料法实时检测NGF mRNA的表达水平。通过熔解曲线分析NGF mRNA检测的特异性,以管家基因-actin为内参照对NGF进行定量分析。结果:建立的大鼠NGF mRNA SYBR GreenⅠ实时检测方法具有良好的特异性和敏感性。结论:成功建立实时RT-PCR检测NGF mRNA基因表达的方法。

English Abstract

参考文献 (9)

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