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抗结核杆菌耐热抗原单克隆抗体杂交瘤细胞的建立及其特性的初步鉴定

彭美玉 李柏青

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抗结核杆菌耐热抗原单克隆抗体杂交瘤细胞的建立及其特性的初步鉴定

    作者简介: 彭美玉(1982-),女,硕士研究生,助教,讲师.
  • 基金项目:

    国家科技重大专项基金资助(2008ZX10003-011)

  • 中图分类号: R378.911;R392.11

Primary characterization of hybridoma cells secreting monoclonal antibody against Mycobacterium tuberculosis heat-resistant antigen

  • CLC number: R378.911;R392.11

  • 摘要: 目的:建立针对结核杆菌耐热抗原(Mtb-HAg)的单克隆杂交瘤细胞株,并对其产生的单克隆抗体的特异性和生物学活性作初步鉴定。方法:BALB/C小鼠用Mtb-HAg免疫3次后,取脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0以10:1比例在50% PEG作用下细胞融合,随后在HAT培养液中进行选择性培养,常规有限稀释法筛选克隆和亚克隆化;用间接ELISA法测定单抗效价和特异性鉴定。结果:在细胞融合2次,筛选杂交瘤细胞3次和亚克隆化后,获得了3株杂交瘤细胞株,ⅠC12、ⅡE4、ⅡG8,效价分别为1:32 000、1:16 000、1:16 000。其中ⅠC12杂交瘤株分泌的抗体仅与Mtb-HAg的蛋白峰Ⅰ有阳性反应,但ⅠC12单抗对Mtb-HAg激活人γδT细胞的活性没有明显影响。ⅡE4和ⅡG8杂交瘤株分泌的抗体与Mtb-HAg蛋白峰Ⅰ、峰Ⅱ、峰Ⅲ均无反应。结论:应用杂交瘤技术获得了三株能稳定分泌高滴度抗Mtb-HAg的单克隆抗体细胞株,其中ⅠC12对蛋白峰I有特异性。
  • [1] 夏惠方强孙新王明丽 . 抗猪囊尾蚴KD26抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株建立和特性鉴定. 蚌埠医学院学报, 2004, 29(2): 99-101.
    [2] 盛玲玲夏惠孙悝陈勇李柏青 . 不同结核杆菌抗原刺激外周血T细胞亚群产生干扰素的比较. 蚌埠医学院学报, 2014, 38(4): 426-428,432.
    [3] 彭美玉李柏青 . 结核分枝杆菌蛋白抗原T细胞表位的研究进展. 蚌埠医学院学报, 2011, 36(4): 421-426.
    [4] 马飞郭术俊李柏青 . 基因扫描技术检测人TCR δ2链CDR3多态性的方法. 蚌埠医学院学报, 2010, 35(5): 433-436.
    [5] 孙丽芳陈余清赵成岭李伟李殿明 . 生存素基因联合细胞角蛋白19片段抗原及癌胚抗原检测对肺癌引起胸腔积液的诊断意义. 蚌埠医学院学报, 2010, 35(10): 993-995.
    [6] 钱中清吕静竹戴军邓学端 . 含药血清作用巨噬细胞感染模型对抗结核药物活性的评价. 蚌埠医学院学报, 2006, 31(1): 12-14.
    [7] 金齐力姜丽娜姚春艳闵宏林李柏青 . 流式细胞术检测单核巨噬细胞吞噬荧光素标记结核分枝杆菌的方法学探讨. 蚌埠医学院学报, 2008, 33(5): 505-508.
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    [9] 郭政新王兆华刘欣李娜常先友 . 蚌埠地区结核杆菌耐药情况分析与对策. 蚌埠医学院学报, 2013, 37(4): 469-470.
    [10] 武文娟沈继龙李柏青 . MtbAg体外激活扩增的人γδT细胞表面L-选择素的动态变化. 蚌埠医学院学报, 2005, 30(3): 192-194.
    [11] 郭凯陈兴智 . 弓形虫主要抗原的研究进展. 蚌埠医学院学报, 2012, 36(4): 486-490.
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    [13] 丁艳盛玲玲邱晓静徐丹李柏青 . 结核杆菌耐热抗原和磷酸类抗原对人外周血T细胞活化和增殖的比较. 蚌埠医学院学报, 2012, 36(7): 745-747.
    [14] 宋传旺葛晓松李柏青 . 结核杆菌抗原对中性粒细胞自发性凋亡的抑制作用. 蚌埠医学院学报, 2007, 32(2): 127-129.
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    [19] 张发苏梁锁包训迪王瑞 . 痰液分离结核分枝杆菌202株耐药性分析. 蚌埠医学院学报, 2012, 36(7): 852-853.
    [20] 王英薛玉芹王雪梅陈勇李江艳李倩唐洁夏惠方强 . 结核分枝杆菌H37Ra菌株ESAT6基因的克隆及序列分析. 蚌埠医学院学报, 2014, 39(10): 1324-1326.
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出版历程
  • 收稿日期:  2010-08-10

抗结核杆菌耐热抗原单克隆抗体杂交瘤细胞的建立及其特性的初步鉴定

    作者简介: 彭美玉(1982-),女,硕士研究生,助教,讲师.
  • 1. 山东万杰医学院医学检验学教研室, 山东淄博 255213;
  • 2. 蚌埠医学院免疫学教研室, 安徽省感染与免疫重点实验室, 安徽蚌埠 233030
基金项目:  国家科技重大专项基金资助(2008ZX10003-011)

摘要: 目的:建立针对结核杆菌耐热抗原(Mtb-HAg)的单克隆杂交瘤细胞株,并对其产生的单克隆抗体的特异性和生物学活性作初步鉴定。方法:BALB/C小鼠用Mtb-HAg免疫3次后,取脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0以10:1比例在50% PEG作用下细胞融合,随后在HAT培养液中进行选择性培养,常规有限稀释法筛选克隆和亚克隆化;用间接ELISA法测定单抗效价和特异性鉴定。结果:在细胞融合2次,筛选杂交瘤细胞3次和亚克隆化后,获得了3株杂交瘤细胞株,ⅠC12、ⅡE4、ⅡG8,效价分别为1:32 000、1:16 000、1:16 000。其中ⅠC12杂交瘤株分泌的抗体仅与Mtb-HAg的蛋白峰Ⅰ有阳性反应,但ⅠC12单抗对Mtb-HAg激活人γδT细胞的活性没有明显影响。ⅡE4和ⅡG8杂交瘤株分泌的抗体与Mtb-HAg蛋白峰Ⅰ、峰Ⅱ、峰Ⅲ均无反应。结论:应用杂交瘤技术获得了三株能稳定分泌高滴度抗Mtb-HAg的单克隆抗体细胞株,其中ⅠC12对蛋白峰I有特异性。

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