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结核分枝杆菌H37Ra株CFP10基因的克隆与序列分析

薛玉芹 王英 陈勇 李江艳 李倩 唐洁 夏惠 王雪梅 方强

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结核分枝杆菌H37Ra株CFP10基因的克隆与序列分析

    作者简介: 薛玉芹(1985- ),女,硕士研究生.
    通讯作者: 方强, fq333@sohu.com
  • 基金项目:

    国家自然科学基金资助项目(30600518/C030112)

Cloning and sequence analysis of the culture filter protein 10 gene from Mycobacterium tuberculosis H37Ra

    Corresponding author: FANG Qiang, fq333@sohu.com
  • 摘要: 目的:克隆结核分枝杆菌减毒株H37Ra培养滤液蛋白10(CFP10)基因,并对其进行序列分析。方法:自结核菌H37Ra株抽提基因组DNA为模板,以已知结核菌H37Ra株CFP10基因设计引物。通过聚合酶链反应(PCR)技术扩增出结核分枝杆菌H37Ra株CFP10基因,将其克隆至pTG19-T载体后,经PCR和双酶切鉴定后进行DNA序列测定,并以BLAST在线软件进行序列比对分析。结果:PCR产物电泳显示扩增片段约为300 bp,测序获得的片段开放编码框由303 bp组成,与H37Rv株CFP10基因同源性为100%,推导出编码氨基酸序列同源性为100%。结论:成功克隆结核分枝杆菌H37Ra株CFP10基因,其基因序列与H37Rv株CFP10基因序列无差异。
  • [1] Global Tuberculosis Control. WHO Report(2012) [R]. Geneva:WHO,2012.
    [2] Arlehamn CS,Sidney J,Henderson R,et al. Dissecting mechanisms of immunodominance to the common tuberculosis antigens ESAT-6,CFP10,Rv2031c ( hspX),Rv2654c ( TB7. 7),and Rv1038c(EsxJ)[J]. J Imumunol,2012,188(10):5020-5031.
    [3] Mohamud R,Azlan M,Yero D,et al. Immunogenicity of recombinant Mycobacterium bovis bacille Calmette-Gurin clones expressing T and B cell epitopes of Mycobacterium tuberculosis antigens[J]. BMC Imumunol,2013,14(1):S5.
    [4] Yang H,Chen H,Liu Z,et al. A novel B-cell epitope identified within Mycobacterium tuberculosis CFP10/ESAT-6 protein[J].PLos One,2013,8(1):e52848.
    [5] Okkels LM,Muller EC,Schmid M,et al. CFP10 discriminates between nonacetylated and acetylated ESAT-6 of Mycobacterium tuberculosis by differential interaction[J]. Proteomics,2004,4(10):2954-2960.
    [6] Kalra M,Grover A,Mehta N,et al. Supplementtation with RD antigens enhances the protective efficacy of BCG in tuberculosis mice[J]. Clin Immunol,2007,125(2):173-183.
    [7] Champion PA,Stanley SA,Champion MM,et al. C-terminal signal sequence promotes virul-ence factor secretion in Mycobacterium tuberculosis[J]. Science,2006,313(5793):1632-1636.
    [8] Aagaard C,Govaerts M,Meikle V,et al. Detection of bovine tuberculosis in herds with different disease prevalence and influence of paratuberculosis infection on PPDB and ESAT-6/CFP10 specificity[J]. Prev Vet Med,2010,96(3/4):161-169.
    [9] Ganguly N,Giang PH,Gupta C,et al. Mycobacterium tuberculosis sectretory proteins CFP-10,ESAT-6 and the CFP10: ESAT6 complex inhibit lipopolysaccharide induced NF-B transactivation by down regulation of reactive oxidative species(ROS) production[J]. Immunol Cell Biol,2008,86(1):98-106.
  • [1] 王英薛玉芹王雪梅陈勇李江艳李倩唐洁夏惠方强 . 结核分枝杆菌H37Ra菌株ESAT6基因的克隆及序列分析. 蚌埠医学院学报, 2014, 39(10): 1324-1326.
    [2] 马志刚钱中清 . 结核分枝杆菌H37Ra株fbpC基因的克隆与表达. 蚌埠医学院学报, 2014, 38(2): 145-147.
    [3] 王朝兰汤冬生王业梅姚勇汪学龙 . 猪囊尾蚴GP50编码基因的克隆和序列分析. 蚌埠医学院学报, 2012, 36(3): 256-259.
    [4] 张发苏梁锁包训迪王瑞 . 痰液分离结核分枝杆菌202株耐药性分析. 蚌埠医学院学报, 2012, 36(7): 852-853.
    [5] 王伟王海梅郑晶郑照军刘双成钟政荣 . 安徽省蚌埠市麻疹野毒株核蛋白基因检测及序列分析. 蚌埠医学院学报, 2013, 37(5): 604-607.
    [6] 彭美玉李柏青 . 结核分枝杆菌蛋白抗原T细胞表位的研究进展. 蚌埠医学院学报, 2011, 36(4): 421-426.
    [7] 谢明章边文燕杨清玲陈昌杰 . 多重PCR法检测结核分枝杆菌耐药基因研究. 蚌埠医学院学报, 2011, 36(11): 1173-1176.
    [8] 曹元应房功思孟德娣汪学龙 . 结核分枝杆菌PPE68基因真核表达载体的构建、表达和鉴定. 蚌埠医学院学报, 2014, 38(3): 288-290,294.
    [9] 陈丽周浩何宏天管政 . 人HNA-3a基因的克隆及其在HEK-293细胞的表达. 蚌埠医学院学报, 2019, 44(1): 6-8,13. doi: 10.13898/j.cnki.issn.1000-2200.2019.01.002
    [10] 陈昌杰章尧 . Nogo-66蛋白氨基酸肽的克隆及在原核细胞的表达. 蚌埠医学院学报, 2005, 30(5): 380-382.
    [11] 马丽娜 . 结核分枝杆菌疫苗研究进展. 蚌埠医学院学报, 2005, 30(2): 184-185.
    [12] 金齐力孙悝吕小艳韦莉 . 结核分枝杆菌感染对小鼠树突状细胞功能的影响. 蚌埠医学院学报, 2015, 40(9): 1145-1147,1151. doi: 10.13898/j.cnki.issn.1000-2200.2015.09.001
    [13] 陈妍汶杨勇陈俊莉罗军庄利东 . 分子生物学方法在结核分枝杆菌及其耐药性检测中的价值. 蚌埠医学院学报, 2020, 45(3): 388-391. doi: 10.13898/j.cnki.issn.1000-2200.2020.03.028
    [14] 金齐力韦莉李柏青 . 结核分枝杆菌感染对THP-1细胞CD14表达的影响. 蚌埠医学院学报, 2012, 36(2): 131-133.
    [15] 叶松王晓秋 . 耐药肺结核患者痰标本中结核分枝杆菌L型四种检测方法比较. 蚌埠医学院学报, 2004, 29(2): 118-120.
    [16] 郭术俊赵保明吕合作胡建国 . 用于双分子荧光互补技术的Olig1/Id2基因真核表达载体的构建和鉴定. 蚌埠医学院学报, 2010, 35(10): 973-975.
    [17] 张爱霞江京娣吕静竹汪洪涛宋传旺姚春艳钱中清 . 减毒结核分枝杆菌H37Ra感染小鼠模型的实验研究. 蚌埠医学院学报, 2016, 41(2): 141-144. doi: 10.13898/j.cnki.issn.1000-2200.2016.02.001
    [18] 徐志庆夏惠李柏青 . 不同刺激剂对健康人和结核患者外周血T细胞产生γ干扰素和肿瘤坏死因子-α的影响. 蚌埠医学院学报, 2016, 41(3): 288-291. doi: 10.13898/j.cnki.issn.1000-2200.2016.03.003
    [19] 韦莉金齐力刘勇夏佩莹 . 结核分枝杆菌19 kDa脂蛋白诱导THP-1细胞凋亡的研究. 蚌埠医学院学报, 2008, 33(3): 263-265.
    [20] 陈传好陈昌杰赵莉 . 人神经营养素-3全长基因克隆及序列分析. 蚌埠医学院学报, 2005, 30(1): 9-11.
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出版历程
  • 收稿日期:  2013-03-01
  • 刊出日期:  2013-11-15

结核分枝杆菌H37Ra株CFP10基因的克隆与序列分析

    通讯作者: 方强, fq333@sohu.com
    作者简介: 薛玉芹(1985- ),女,硕士研究生.
  • 1. 1. 蚌埠医学院病原生物学教研室, 安徽省感染与免疫重点实验室;
  • 2.  2. 蚌埠医学院免疫学教研室, 安徽 蚌埠 233030
基金项目:  国家自然科学基金资助项目(30600518/C030112)

摘要: 目的:克隆结核分枝杆菌减毒株H37Ra培养滤液蛋白10(CFP10)基因,并对其进行序列分析。方法:自结核菌H37Ra株抽提基因组DNA为模板,以已知结核菌H37Ra株CFP10基因设计引物。通过聚合酶链反应(PCR)技术扩增出结核分枝杆菌H37Ra株CFP10基因,将其克隆至pTG19-T载体后,经PCR和双酶切鉴定后进行DNA序列测定,并以BLAST在线软件进行序列比对分析。结果:PCR产物电泳显示扩增片段约为300 bp,测序获得的片段开放编码框由303 bp组成,与H37Rv株CFP10基因同源性为100%,推导出编码氨基酸序列同源性为100%。结论:成功克隆结核分枝杆菌H37Ra株CFP10基因,其基因序列与H37Rv株CFP10基因序列无差异。

English Abstract

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