结核分枝杆菌H37Ra株fbpC基因的克隆与表达

马志刚; 钱中清

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结核分枝杆菌H37Ra株fbpC基因的克隆与表达

马志刚 , 钱中清

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结核分枝杆菌H37Ra株fbpC基因的克隆与表达

1.
蚌埠医学院免疫学教研室, 感染与免疫安徽省重点实验室, 安徽蚌埠 233030

作者简介: 马志刚(1979- ),男，讲师.

基金项目:
安徽省自然科学基金资助项目(11040606M206)

蚌埠医学院科研基金资助课题(BY0825)

摘要: 目的：探讨克隆结核杆菌H37Ra菌株抗原fbpC基因及在大肠埃希菌BL21(DE3)中的表达。方法：通过聚合酶链反应扩增人结核杆菌弱毒性菌株H37Ra的编码基因fbpC,并定向克隆到原核表达载体pET-28a,通过酶切、聚合酶链反应和测序鉴定重组质粒,转化大肠埃希菌BL21(DE3)中,由异丙基硫代半乳糖苷诱导表达,十二烷基磺酸纳-聚丙烯酰胺和Western blot鉴定表达的重组蛋白。结果:成功构建了pET28a-fbpC重组质粒;在大肠埃希菌中表达了相对分子量约33 000的重组蛋白。结论：重组质粒pET28a-fbpC成功构建和表达,为fbpc反应原性、免疫诊断价值的研究提供参考。
- 结核分枝杆菌 /
- 克隆 /
- 表达 /
- 诱导

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结核分枝杆菌H37Ra株fbpC基因的克隆与表达

作者简介: 马志刚(1979- ),男，讲师.

1. 蚌埠医学院免疫学教研室, 感染与免疫安徽省重点实验室, 安徽蚌埠 233030

收稿日期: 2012-08-22
网络出版日期: 2014-02-15

基金项目: 安徽省自然科学基金资助项目(11040606M206)蚌埠医学院科研基金资助课题(BY0825)

关键词:

结核分枝杆菌 /
克隆 /
表达 /
诱导

摘要: 目的：探讨克隆结核杆菌H37Ra菌株抗原fbpC基因及在大肠埃希菌BL21(DE3)中的表达。方法：通过聚合酶链反应扩增人结核杆菌弱毒性菌株H37Ra的编码基因fbpC,并定向克隆到原核表达载体pET-28a,通过酶切、聚合酶链反应和测序鉴定重组质粒,转化大肠埃希菌BL21(DE3)中,由异丙基硫代半乳糖苷诱导表达,十二烷基磺酸纳-聚丙烯酰胺和Western blot鉴定表达的重组蛋白。结果:成功构建了pET28a-fbpC重组质粒;在大肠埃希菌中表达了相对分子量约33 000的重组蛋白。结论：重组质粒pET28a-fbpC成功构建和表达,为fbpc反应原性、免疫诊断价值的研究提供参考。

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