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干血滤纸片试剂盒和水煮法提取间日疟原虫DNA用于PCR检测的比较

胡明洁 吴守伟 刘辉 张静 方强 沈继龙

引用本文:
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干血滤纸片试剂盒和水煮法提取间日疟原虫DNA用于PCR检测的比较

    作者简介: 胡明洁(1972-),女,讲师.
  • 基金项目:

    蚌埠医学院科研基金资助项目(BY0815)

    教育部科学技术研究重点资助项目(211079)

  • 中图分类号: R382.31

A comparative study of dried blood spot genomic DNA isolation kit and boiling method in DNA extraction and PCR detection of Plasmodium vivax

  • CLC number: R382.31

  • 摘要: 目的: 比较水煮法和干血滤纸片基因组DNA分离试剂盒提取间日疟原虫DNA用于PCR检测及克隆研究的差异。方法: 采集间日疟患者末梢血制备干血滤纸片,分别用水煮法和QIAamp DNA mini kit试剂盒提取间日疟原虫基因组DNA 10份。PCR扩增LDH基因,并克隆质粒pGEM-PvLDH。分析比较2种提取方法的差异。结果: 水煮法和试剂盒法提取的间日疟原虫gDNA,均扩增出LDH基因特异条带,但试剂盒提取的gDNA目的条带亮于水煮法。结论: 水煮法操作简便、快速、经济,在等量血源条件下,所得DNA量较少、纯度较低;试剂盒提取可获得较高的得率,在定量检测和复合扩增时受到的影响因素较少,成功率较高。
  • [1] 高迎陶志勇夏惠陈勇王雪梅方强 . 间日疟原虫醛缩酶的克隆、表达与初步鉴定. 蚌埠医学院学报, 2013, 37(7): 777-780.
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    [3] 李光友陈勇夏惠方强刘丹买月琴贺文欣 . 间日疟原虫MSP1-19基因的克隆与表达. 蚌埠医学院学报, 2011, 36(9): 935-937.
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    [8] 茆海丰秦岭杨晋赵勇营丽娟 . 头孢西丁和拉氧头孢纸片扩散法检测耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌的方法比较. 蚌埠医学院学报, 2010, 35(5): 513-516.
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    [17] 汤洁程庆兵付恩桃刘修树范高福方丽波 . 正交试验比较金银花中绿原酸、异绿原酸A的提取工艺. 蚌埠医学院学报, 2019, 44(1): 93-96. doi: 10.13898/j.cnki.issn.1000-2200.2019.01.026
    [18] 刘臣彪陈昌杰章尧章菊杨清玲王惠 . 葡萄籽提取物抑制乳腺癌细胞生长的实验研究. 蚌埠医学院学报, 2009, 34(4): 277-280.
    [19] 王婉章欢冷玉林刘云申跃武蔡晓明 . 不同温度处理后大蒜水提取液的抑菌效果研究. 蚌埠医学院学报, 2019, 44(4): 434-436, 441. doi: 10.13898/j.cnki.issn.1000-2200.2019.04.004
    [20] 马慧李博涵朱美林李红梅戴轶群陈刚胜吴成柱 . 碱提酸沉法提取银杏外种皮中银杏酸的工艺研究. 蚌埠医学院学报, 2019, 44(9): 1264-1267. doi: 10.13898/j.cnki.issn.1000-2200.2019.09.034
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出版历程
  • 收稿日期:  2011-04-27

干血滤纸片试剂盒和水煮法提取间日疟原虫DNA用于PCR检测的比较

    作者简介: 胡明洁(1972-),女,讲师.
  • 1. 安徽医科大学病原生物学教研室, 安徽合肥 230031;
  • 2. 蚌埠医学院生物科学系, 安徽蚌埠 233030;
  • 3. 蚌埠医学院病原生物学教研室, 安徽蚌埠 233030
基金项目:  蚌埠医学院科研基金资助项目(BY0815)教育部科学技术研究重点资助项目(211079)

摘要: 目的: 比较水煮法和干血滤纸片基因组DNA分离试剂盒提取间日疟原虫DNA用于PCR检测及克隆研究的差异。方法: 采集间日疟患者末梢血制备干血滤纸片,分别用水煮法和QIAamp DNA mini kit试剂盒提取间日疟原虫基因组DNA 10份。PCR扩增LDH基因,并克隆质粒pGEM-PvLDH。分析比较2种提取方法的差异。结果: 水煮法和试剂盒法提取的间日疟原虫gDNA,均扩增出LDH基因特异条带,但试剂盒提取的gDNA目的条带亮于水煮法。结论: 水煮法操作简便、快速、经济,在等量血源条件下,所得DNA量较少、纯度较低;试剂盒提取可获得较高的得率,在定量检测和复合扩增时受到的影响因素较少,成功率较高。

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