IL-18真核表达载体的构建及其在HO-8910细胞株的表达

吴晓莉; 张林杰; 许健

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IL-18真核表达载体的构建及其在HO-8910细胞株的表达

吴晓莉 , 张林杰 , 许健

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Citation:

IL-18真核表达载体的构建及其在HO-8910细胞株的表达

1. 安徽医科大学免疫学教研室, 安徽合肥 230032;
2. 浙江中医药大学生命科学学院, 浙江杭州 310053

作者简介: 吴晓莉(1975-),女,讲师.

基金项目:
浙江省科技攻关计划项目重点科研社会发展项目(2006C23024)
中图分类号: R737.31;R392.12

Constructing of interleukin-18 eukaryotic expression vector and expression of interleukin-18 in HO-8910 cell line

1. Department of Immunology, Anhui Medical University, Hefei Anhui 230032;
2. Life Scince College, Zhejiang Chinese Medical University, Hangzhou Zhengjiang 310053, China
CLC number: R737.31;R392.12

摘要: 目的:通过构建人白细胞介素18(IL-18)真核表达载体,观察其在HO-8910细胞株的表达情况。方法:应用分子克隆技术将IL-18基因插入pCI真核表达载体,应用脂质体介导法转染人卵巢癌HO-8910细胞株。转染分3组,空白组:人卵巢癌HO-8910细胞株+脂质体;对照组:卵巢癌HO-8910细胞株+pCI;实验组:卵巢癌HO-8910细胞株+pCI-hIL-18。以RT-PCR方法分别检测3组的IL-18表达情况。结果:成功构建pCI-hIL-18真核表达载体并转染HO-8910细胞株,RT-PCR、ELISA显示转染pCI-hIL-18重组质粒组在转染的细胞内获得表达。结论:IL-18基因能够转染到HO-8910细胞株中并获得表达。
- 卵巢肿瘤 /
- 白细胞介素-18 /
- 基因,免疫应答 /
- HO-8910细胞株 /
- 质粒
Abstract: Objective: To constrct the eukaryotic expression vector of interleukin-18(IL-18) and study its expression in HO-8910 cell line.Methods: Interleukin-18 gene was inserted into the eukaryotic expression vector pCI with molecular cloning technique,transferred to HO-8910 cell line with Lipotectamine.Three transferred groups were studied:HO-8910+Lipotectamine,HO-8910+pCI and HO-8910 + pCI-hIL-18.The expression of IL-18 gene was comfirmed by RT-PCR technique.Results: The eukaryotic expression vector of IL-18(pCI-hIL-18) was successfully constructed and transferred to HO-8910 cells and expressed in mRNA and protein level of the HO-8910 cell line,but not expressed in the other two groups.Conclusions: The IL-18 gene could be expressed in the HO-8910 cell line.
- ovarian neoplasms /
- interleukin-18 /
- genes,immune response /
- HO-8910 cell line /
- plasmids

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IL-18真核表达载体的构建及其在HO-8910细胞株的表达

作者简介: 吴晓莉(1975-),女,讲师.

1. 安徽医科大学免疫学教研室, 安徽合肥 230032;
2. 浙江中医药大学生命科学学院, 浙江杭州 310053

收稿日期: 2007-10-12

基金项目: 浙江省科技攻关计划项目重点科研社会发展项目(2006C23024)

关键词:

摘要: 目的:通过构建人白细胞介素18(IL-18)真核表达载体,观察其在HO-8910细胞株的表达情况。方法:应用分子克隆技术将IL-18基因插入pCI真核表达载体,应用脂质体介导法转染人卵巢癌HO-8910细胞株。转染分3组,空白组:人卵巢癌HO-8910细胞株+脂质体;对照组:卵巢癌HO-8910细胞株+pCI;实验组:卵巢癌HO-8910细胞株+pCI-hIL-18。以RT-PCR方法分别检测3组的IL-18表达情况。结果:成功构建pCI-hIL-18真核表达载体并转染HO-8910细胞株,RT-PCR、ELISA显示转染pCI-hIL-18重组质粒组在转染的细胞内获得表达。结论:IL-18基因能够转染到HO-8910细胞株中并获得表达。