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荧光示踪法在检测神经元细胞间缝隙连接功能中的应用

于丽 童旭辉 纪洁 李利 樊宗兵 董淑英

引用本文:
Citation:

荧光示踪法在检测神经元细胞间缝隙连接功能中的应用

    作者简介: 于丽(1990-),女,硕士研究生.
    通讯作者: 董淑英, 教授.bbmcdsy@126.com
  • 基金项目:

    安徽省自然科学基金资助项目(1408085MH176)

    国家自然科学基金资助项目(81402930)

  • 中图分类号: R322.85

Applications of fluorescent tracer method in the detection of neuronal gap junctions

    Corresponding author: DONG Shu-ying, 教授.bbmcdsy@126.com
  • CLC number: R322.85

  • 摘要: 目的:建立细胞荧光示踪法定量检测神经元细胞间缝隙连接功能。方法:原代培养神经元细胞,免疫荧光法鉴定神经元细胞的纯度。2种不同分子量的荧光染料Calcein和Dil与神经元细胞共同孵育30 min制成供体神经元细胞,与受体神经元细胞共同孵育2.5 h后,在倒置荧光显微镜下观察供体神经元细胞周围的受体神经元细胞数目。结果:原代培养的神经元细胞纯度达90%,可用于检测神经元细胞缝隙连接功能的实验。所建立的方法可以清晰观察到供体神经元细胞周围受体神经元细胞,并可以计数。结论:本实验所建立的荧光示踪法能够定量检测神经元细胞间缝隙连接功能。
  • [1] Abrams CK,Scherer SS.Gap junctions in inherited human disorders of the central nervous system[J].Biochim Biophys Acta,2012,1818(8):2030-2047.
    [2] Vinken M,Vanhaecke T,Papeleu P,et al.Connexins and their channels in cell growth and cell death[J].Cell Signal,2006,18(5):592-600.
    [3] 闫华,只达石,刘锐.荧光显微镜划痕标记染料示踪技术的改进[J].中国现代神经疾病杂志,2006,6(2):123.
    [4] Söhl G,Maxeiner S,Willecke K.Expression and functions neuronal gap junctions[J].Nat Rev Neurosci,2005,6(3):191-200.
    [5] 俞韩啸,虞燕琴.缝隙连接与脑功能研究进展[J].浙江大学学报:医学版,2012,41(6):696-702.
    [6] Park WM,Wang Y,Park S,et al.Interplay of chemical neurotransmitters regulates developmental increase in electrical synapses[J].J Neurosci,2011,31(16):5909-5920.
    [7] Belousov AB.The regulation and role of neuronal gap junctions during neuronal injury[J].Channels(Austin),2012,6(5):390-392.
    [8] Wang Y,Song JH,Denisova JV,et al.Neuronal gap junction coupling is regulated by glutamate and plays critical role in cell death during neuronal injury[J].J Neurosci,2012,32(2):713-725.
    [9] Garrett FG,Durham PL.Differential expression of connexins in trigeminal ganglion neurons and satellite glial cells in response to chronic or acute joint inflammation[J].Neuron Glia Biol,2008,4(4):295-306.
    [10] Wang YF,Song JH,Belousov JV,et al.Neuronal gap junction coupling is regulated by glutamate and plays critical role in cell death during neuronal injury[J].J Neurosci,2012,32(2):713-725.
    [11] 姚伯昕.缝隙连接与癫痫[J].海南医学,2009,20(6):132-135.
    [12] 曾玉杰,冯义柏,于世龙,等.缺血再灌注后心肌细胞缝隙连接通讯改变与其凋亡及坏死的关系[J].中国组织工程研究与临床康复,2007,11(16):3074-3077.
  • [1] 范高福童旭辉董淑英蒋国君陶亮 . 鞣花酸对转染并稳定表达Cx32的HeLa细胞缝隙连接功能的影响. 蚌埠医学院学报, 2014, 38(5): 564-567.
    [2] 范高福童旭辉陶亮 . 缝隙连接:一个潜在的肿瘤治疗新靶点. 蚌埠医学院学报, 2012, 36(2): 234-237.
    [3] 蒋国君童旭辉祝晓光 . 缝隙连接作为乳腺癌治疗新靶点的研究进展. 蚌埠医学院学报, 2013, 37(3): 368-371.
    [4] 赵晶晶杨振坤孙洁王伟董文艳陈静瑜 . AMPK激动剂AICAR抑制糖氧剥夺损伤后星形胶质细胞的炎性反应及对神经元损伤的保护作用. 蚌埠医学院学报, 2018, 43(4): 450-453. doi: 10.13898/j.cnki.issn.1000-2200.2018.04.008
    [5] 孙美群陈前芬汪洪涛 . 新生大鼠大脑皮层神经元原代培养与鉴定. 蚌埠医学院学报, 2008, 33(1): 19-21.
    [6] 周礼华徐淑秀江城梅 . 新生大鼠小脑颗粒神经元原代培养与鉴定. 蚌埠医学院学报, 2011, 36(2): 121-123.
    [7] 齐晓艳张波余美玲陶亮张翠玲 . 三七皂苷R1通过细胞缝隙连接对顺铂细胞毒性作用的影响. 蚌埠医学院学报, 2012, 36(2): 134-137.
    [8] 陈玉芳苏建华唐金荣肖杭 . 盐酸丁咯地尔对SD大鼠坐骨神经损害后神经元的保护作用. 蚌埠医学院学报, 2006, 31(6): 582-583.
    [9] 孙彦君 . 奥拉西坦联合醒脑静治疗脑外伤的效果及对神经元损伤的影响. 蚌埠医学院学报, 2022, 47(6): 764-768. doi: 10.13898/j.cnki.issn.1000-2200.2022.06.015
    [10] 周艺李珍王烈成祝延方芳黄大可 . 白藜芦醇对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的神经保护作用. 蚌埠医学院学报, 2011, 36(9): 921-924,930.
    [11] 陈银玲童旭辉唐媛媛齐佳佳杜家如董淑英 . P2X7受体拮抗剂BBG抗大鼠星形胶质细胞缺氧/复氧损伤的作用. 蚌埠医学院学报, 2017, 42(6): 701-705. doi: 10.13898/j.cnki.issn.1000-2200.2017.06.001
    [12] 韦道祥陈俊抛杨卫红 . 腹腔注射卡因酸对大鼠海马细胞凋亡的影响. 蚌埠医学院学报, 2004, 29(1): 9-11.
    [13] 朱成王淮 . 神经元特异性烯醇化酶检测对颅脑损伤诊断分型及判断预后的临床意义. 蚌埠医学院学报, 2014, 38(1): 50-52.
    [14] 齐晓艳张翠玲 . 缝隙连接细胞间通讯对顺铂疗效的影响研究进展. 蚌埠医学院学报, 2012, 36(3): 370-372.
    [15] 黄家琴杨杰 . 血清前白蛋白和神经元特异性烯醇化酶检测在新生儿缺氧缺血性脑病诊断中的临床意义. 蚌埠医学院学报, 2019, 44(2): 219-221. doi: 10.13898/j.cnki.issn.1000-2200.2019.02.024
    [16] 刘秀平祝延 . 电压门控钠通道与神经元动作电位编码研究进展. 蚌埠医学院学报, 2009, 34(3): 275-277.
    [17] 刘圆圆刘娟杨燕张金莲巩幼洁欧玉荣 . 缝隙连接蛋白26和核转录因子κB在三阴性乳腺癌原发灶及淋巴结转移灶中的表达及临床意义. 蚌埠医学院学报, 2019, 44(11): 1453-1457. doi: 10.13898/j.cnki.issn.1000-2200.2019.11.005
    [18] 聂荔LI Xiang慕丽娟王浩 . 抑制MAPK通路对大鼠癫痫持续状态引起海马神经元损伤的保护作用. 蚌埠医学院学报, 2018, 43(11): 1405-1407,1410. doi: 10.13898/j.cnki.issn.1000-2200.2018.11.002
    [19] 江城梅赵文红赵红申玲王丹妮 . 三羟异黄酮对丙烯酰胺致小脑神经元凋亡的影响. 蚌埠医学院学报, 2009, 34(1): 1-4.
    [20] 谢军张侠李红林 . 不同血液标本及存放时间对神经元特异性烯醇化酶测定的影响. 蚌埠医学院学报, 2013, 37(12): 1654-1655.
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出版历程
  • 收稿日期:  2014-11-10

荧光示踪法在检测神经元细胞间缝隙连接功能中的应用

    通讯作者: 董淑英, 教授.bbmcdsy@126.com
    作者简介: 于丽(1990-),女,硕士研究生.
  • 蚌埠医学院 药学系药理学教研室, 安徽 蚌埠 233030
基金项目:  安徽省自然科学基金资助项目(1408085MH176)国家自然科学基金资助项目(81402930)

摘要: 目的:建立细胞荧光示踪法定量检测神经元细胞间缝隙连接功能。方法:原代培养神经元细胞,免疫荧光法鉴定神经元细胞的纯度。2种不同分子量的荧光染料Calcein和Dil与神经元细胞共同孵育30 min制成供体神经元细胞,与受体神经元细胞共同孵育2.5 h后,在倒置荧光显微镜下观察供体神经元细胞周围的受体神经元细胞数目。结果:原代培养的神经元细胞纯度达90%,可用于检测神经元细胞缝隙连接功能的实验。所建立的方法可以清晰观察到供体神经元细胞周围受体神经元细胞,并可以计数。结论:本实验所建立的荧光示踪法能够定量检测神经元细胞间缝隙连接功能。

English Abstract

参考文献 (12)

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