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直肠癌是临床常见恶性肿瘤之一,手术配合放疗、化疗等辅助手段的综合治疗方式是目前公认的直肠癌治疗原则,尤其直肠癌术前给予新辅助放化疗已成为共识,对提高病人远期生存率具有积极意义[1]。肿瘤的生长、浸润、转移及复发均与肿瘤细胞的增殖及血管形成密切相关,大量临床研究[2]证实新辅助放化疗可调节肿瘤微血管密度(microvessel density,MVD)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)表达,是改善胃癌、乳腺癌及宫颈癌病人预后的可能机制之一。但新辅助放化疗对直肠癌病人MVD、PCNA及VEGF的表达及其预后的影响鲜见报道。本研究通过免疫组织化学技术,检测新辅助放化疗前后直肠癌病人标本中MVD、PCNA及VEGF表达变化,并探讨其与临床预后的关系,旨在为直肠癌新辅助放化疗的临床应用提供参考。现作报道。
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选择2010-2012年我院收治的直肠癌并接受新辅助放化疗病人96例为观察组,入组病人均经结肠镜检查及活检组织病理检查确诊为直肠癌;选择同期仅行手术切除的直肠癌病人86例为对照组;2组病人性别、年龄、病理分期、UICC临床分期和手术方式等差异均无统计学意义(P>0.05)(见表 1),具有可比性。
分组 n 男 女 年龄/岁 病理分型 UICC临床分期 手术方式 黏液腺癌 低分化癌 ⅡB Ⅲ 直肠前切除 腹会阴联合切除 观察组 96 54 42 42.3±9.3 18 78 46 50 78 18 对照组 86 46 40 42.9±10.4 14 72 38 48 64 22 合计 182 100 82 — 32 150 84 98 142 40 χ2 — 0.14 0.41* 0.19 0.25 1.23 P — >0.05 >0.05 >0.05 >0.05 >0.05 *示t值 表 1 2组病人一般资料比较(x ±s)
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对照组仅行直肠癌根治性手术。观察组病人采用术前新辅助放化疗:术前采用6 MV X线直线加速器进行常规分割放疗每次1.8 Gy,每周5次,总剂量45~50 Gy;于放疗同步卡培他滨(上海罗氏制药有限公司),825 mg/m2,每天2次,每周第1~5天口服化疗,放疗结束停止。新辅助放化疗结束后4~6周进行直肠癌根治性手术。
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(1) 观察组取行新辅助放化疗前后手术切除标本进行MVD、PCNA及VEGF表达检测;(2)对照组取手术前病检标本及手术切除标本进行MVD、PCNA及VEGF表达检测;(3)记录3年随访统计复发率。
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所取病理标本采用免疫组织化学SP法进行染色,切片脱蜡,加入3%过氧化氢封闭阻断内源性过氧化物酶,50 μL非免疫动物血清封闭,加50 μL PCNA及VEGF单克隆抗体分别进行PCNA及VEGF标记,一抗过夜,50 μL生物素标记第二抗体,辣根过氧化物酶孵育,DBA显色,苏木精复染,中性树胶固封。MVD采用CD34单克隆抗体标记后计数(抗体均购于Abcam公司)。
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PCNA及VEGF染色阳性分别以细胞核或血管内皮细胞中出现棕黄色颗粒为标准,并均以阳性细胞数量进行分级,阴性(-):无阳性细胞;低度表达(+):阳性细胞数<25%;中度表达(2+):阳性细胞数25%~50%;高度表达(3+):阳性细胞数>50%。-及+视为阴性,2+及3+视为阳性。光镜下选择5个血管密度最高区域进行MVD测定,分别对每个区域中被染成棕黄色的血管数目进行计数,5个区域血管数目平均值为MVD最终数值。
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采用t检验和χ2检验。
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2组病人手术前MVD、PCNA及VEGF差异均无统计学意义(P>0.05);手术后观察组病人MVD和PCN阳性表达率显著降低(P<0.01),与对照组差异有统计学意义(P<0.01);2组病人VEGF差异无统计学意义(P>0.05)(见表 2)。
分组 n MVD PCNA
阳性表达VEGF
阳性表达手术前 观察组 96 56.8±13.7 74 (77.1) 47(49.0) 对照组 86 55.9±14.1 75 (87.2) 48(55.8) χ2 — 0.44△ 3.13 0.85 P — >0.05 >0.05 >0.05 手术后 观察组 96 -17.5±-8.5▲** 56(58.3)** 50 (52.1) 对照组 86 -1.1±-6.2▲ 74(86.0) 51(59.3) χ2 — 14.97△ 17.07 0.96 P — <0.01 <0.01 >0.05 ▲为(d ±sd)值;△示t值;与手术前比较**P<0.01 表 2 2组病人手术前后MVD(x±s)、PCNA及VEGF变化[n;百分率(%)]
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术后随访3年,对照组86例病人中,8例复发,复发率为9.3%;观察组96例病人中,2例复发,复发率为2.1%,2组复发率差异无统计学意义(χ2=3.27,P>0.05)。
新辅助放化疗对直肠癌病人术后临床效果及预后研究
Effect of neoadjuvant chemoradiotherapy on clinical effects and prognosis in postoperative patients with rectal cancer
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摘要:
目的探讨新辅助放化疗前后直肠癌病人肿瘤微血管密度(MVD)、增殖细胞核抗原(PCNA)及血管内皮生长因子(VEGF)的变化及其临床效果和对预后的影响。 方法选择行新辅助放化疗+手术切除的直肠癌病人96例为观察组,同期仅行手术切除的直肠癌病人86例为对照组,观察组病人采用术前新辅助放化疗:术前采用6 MV X线直线加速器进行常规分割放疗、化疗;新辅助放化疗结束后4~6周进行直肠癌根治性手术。观察组取未行新辅助放化疗前及行新辅助放化疗后手术切除标本进行MVD、PCNA及VEGF表达检测;对照组取手术前病检标本及手术切除标本进行MVD、PCNA及VEGF表达检测。比较2组病人手术前后MVD、PCNA及VEGF表达及临床效果与预后情况。记录3年随访统计复发率。 结果手术后,观察组病人MVD、PCNA表达显著降低,与对照组差异均有统计学意义(P<0.01);2组病人VEGF表达差异无统计学意义(P>0.05)。术后随访3年,对照组复发率为9.3%,观察组复发率为2.1%,2组差异无统计学意义(P>0.05)。 结论新辅助放化疗可以降低直肠癌病人MVD及PCNA表达。 Abstract:ObjectiveTo investigate the effects of neoadjuvant chemoradiotherapy on the levels of microvessel density(MVD), proliferating cell nuclear antigen(PCNA) and vascular endothelial growth factor(VEGF) and prognosis in postoperative patients with rectal cancer. MethodsNinety-six rectal cancer patients treated with neoadjuvant chemoradiotherapy combined with resection and 86 rectal cancer patients treated with surgical resection were divided into the observation group and control group, respectively.The observation group was treated with rectal cancer radical surgery after routine segmental radiotherapy using 6 MV X-ray linear accelerator combined with neoadjuvant chemoradiotherapy for 4 to 6 weeks.The levels of MVD, PCNA and VEGF in surgical specimens in observation group before and after neoadjuvant chemoradiotherapy were detected.The expression levels of MVD, PCNA and VEGF in control group before and after operation were detected.The expression levels of MVD, PCNA and VEGF, and prognosis between two groups were compared before and after operation.The recurrence rates in two groups during 3-year following up were recorded. ResultsAfter operation, the expression levels of MVD and PCNA in observation group were significantly lower than those in control group(P < 0.01).There was not statistical significance in VEGF expression between two groups(P>0.05).The recurrence rates in control group and observation group during 3-year following up were 9.3% and 2.1%, respectively, the difference of which was not statistically significant(P>0.05). ConclusionsNeoadjuvant chemoradiotherapy can decrease the expression levels of MVD and PCNA in rectal cancer patients. -
表 1 2组病人一般资料比较(x ±s)
分组 n 男 女 年龄/岁 病理分型 UICC临床分期 手术方式 黏液腺癌 低分化癌 ⅡB Ⅲ 直肠前切除 腹会阴联合切除 观察组 96 54 42 42.3±9.3 18 78 46 50 78 18 对照组 86 46 40 42.9±10.4 14 72 38 48 64 22 合计 182 100 82 — 32 150 84 98 142 40 χ2 — 0.14 0.41* 0.19 0.25 1.23 P — >0.05 >0.05 >0.05 >0.05 >0.05 *示t值 表 2 2组病人手术前后MVD(x±s)、PCNA及VEGF变化[n;百分率(%)]
分组 n MVD PCNA
阳性表达VEGF
阳性表达手术前 观察组 96 56.8±13.7 74 (77.1) 47(49.0) 对照组 86 55.9±14.1 75 (87.2) 48(55.8) χ2 — 0.44△ 3.13 0.85 P — >0.05 >0.05 >0.05 手术后 观察组 96 -17.5±-8.5▲** 56(58.3)** 50 (52.1) 对照组 86 -1.1±-6.2▲ 74(86.0) 51(59.3) χ2 — 14.97△ 17.07 0.96 P — <0.01 <0.01 >0.05 ▲为(d ±sd)值;△示t值;与手术前比较**P<0.01 -
[1] SCHRAG D, WEISER MR, GOODMAN KA, et al.Neoadjuvant chemotherapy without routine use of radiation therapy for patients with locally advanced rectal cancer:a pilot trial[J].J Clin Oncol, 2014, 32(6):513. doi: 10.1200/JCO.2013.51.7904 [2] SHUENG PW, SHEN BJ, WU LJ, et al.Concurrent image-guided intensity modulated radiotherapy and chemotherapy following neoadjuvant chemotherapy for locally advanced nasopharyngeal carcinoma[J].Radiat Oncol, 2011, 6(1):95. [3] 弥海宁, 何科基, 杨言苹, 等.结直肠癌动脉灌注新辅助化疗后PCNA和MVD表达临床意义的观察[J].中华肿瘤防治杂志, 2011, 18(5):351. [4] KIM SH, LEE JY, LEE JM, et al.Apparent diffusion coefficient for evaluating tumour response to neoadjuvant chemoradiation therapy for locally advanced rectal cancer[J].Eur Radiol, 2011, 21(5):987. doi: 10.1007/s00330-010-1989-y [5] SHIA J, MCMANUS M, GUILLEM JG, et al.Significance of acellular mucin pools in rectal carcinoma after neoadjuvant chemoradiotherapy[J].Am J Surg Pathol, 2011, 35(1):127. doi: 10.1097/PAS.0b013e318200cf78 [6] VAN CUTSEM E, DICATO M, GEVA R, et al.The diagnosis and management of gastric cancer:expert discussion and recommendations from the 12th ESMO/World Congress on Gastrointestinal Cancer, Barcelona, 2010[J].Ann Oncol, 2011, 22(5):1. [7] 梁桂玲, 梁宁安, 杨钦灵.新辅助化疗对晚期宫颈癌血管VEGF mRNA表达的影响[J].中华实用诊断与治疗杂志, 2011, 25(8):737. [8] 孙晋瑞, 梁东霞, 何洁华, 等.新辅助化疗对宫颈癌微血管和微淋巴管的影响及疗效分析[J].肿瘤, 2011, 12(1):9. [9] 胡俊杰, 张兴茂, 周志祥, 等.新辅助同步放化疗对腹腔镜直肠癌手术近期效果的影响[J].中国肿瘤临床与康复, 2013, 5(4):289. [10] CATHCART MC, GATELY K, CUMMINS R, et al.Thromboxane synthase expression and correlation with VEGF and angiogenesis in non-small cell lung cancer[J].Biochim Biophys Acta, 2014, 1842(5):747. doi: 10.1016/j.bbadis.2014.01.011 [11] 蒋代华, 杨欣, 邓蔚, 等.环氧化酶2在鼻咽癌中的表达及其与血管生成和细胞增殖的关系[J].中国眼耳鼻喉科杂志, 2011, 11(5):289. doi: 10.3969/j.issn.1671-2420.2011.05.006 [12] 张雷, 傅仲学.结直肠癌新辅助治疗进展[J].重庆医学, 2013, 42(5):581. doi: 10.3969/j.issn.1671-8348.2013.05.040