选择2016年1月至2018年6月到我院妇科就诊及体检的女性7 709例为研究对象，年龄16~92岁。

HPV基因分型检测试剂盒(流式荧光杂交法)由上海透景生命科技股份有限公司提供，本试剂盒可检测27种HPV亚型，其中高危型包括HPV16、18、26、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68和82，低危型包括HPV6、11、40、42、43、44、55、61、81和83。Bioer Lift Express基因扩增仪由杭州博日科技有限公司提供。Luminex 200型基因分析仪由美国路明克斯贸易有限公司提供。

先用窥阴器暴露宫颈，再用配套宫颈刷轻轻转动4~5圈，采集足量的上皮细胞样本，然后放入专用细胞保存液中，贴好标签，送至检验科检测。

将样品保存管在漩涡振荡器上振荡30 s，确保脱落细胞均匀悬浮，取200 μL样品于1.5 mL离心管中，14 000 rpm离心3 min，小心吸弃上清。每管加入200 μL核酸提取试剂，振荡混匀。瞬时离心后置于100 ℃金属恒温浴中15 min。然后14 000 rpm离心6 min，留取上清液备用。

按每个样本引物混合液5 μL，PCR预混液10 μL和Taq酶0.8 μL将试剂分装于PCR反应管内，然后加入5 μL核酸模板。将PCR反应管置于基因扩增仪中扩增。扩增条件为95 ℃ 5 min；95 ℃ 30 s，58 ℃ 30 s，72 ℃ 30 s，5个循环；95 ℃ 30 s，55 ℃ 30 s，72 ℃ 30 s，35个循环；72 ℃ 3 min。

先将22 μL微球杂交液加入微孔杂交板，然后加入3 μL PCR扩增产物，并抽吸几次加以混匀，封膜后，在PCR仪中95 ℃变性5 min，48 ℃ 30 min杂交，使探针-扩增产物结合。每孔加入75 μL链霉亲和素标记的藻红蛋白，吹打混匀，再次封膜，48 ℃孵育15 min。将微孔杂交板置Luminex 200多功能流式分析仪上进行检测。感染率=阳性数/总调查例数×100%，检出率=阳性数/调查数×100%。

采用χ²检验。

7 709例送检样本中检出阳性1 237例，总阳性率为16.05%，以高危型感染为主(见表 1)。

感染率大于1%的亚型依次为HPV52、16、53、58、39、61，其中高危型主要是HPV52、16、53、58、39，前5位低危型主要是HPV61、43、55、81、6(见表 2、3)。

HPV感染人群主要分布在41~50岁和31~40岁年龄组，各年龄组感染率差异有统计学意义(χ²=24.24，P < 0.01)(见表 4)。

在1 237例HPV阳性标本中，以单基因型感染为主，双重感染次之，少数人群存在多重感染(见表 5)。

宫颈癌是一种由感染引起的恶性疾病，其发病与HPV感染的型别有关，持续性高危型HPV感染是主要危险因素，也是引起宫颈癌前病变和宫颈癌的主要诱因^[1]。因此，对女性群体进行HPV筛查具有重要意义。

HPV基因型分布存在地区差异。在我国，北京地区主要以HPV52、58、16亚型为主^[2]，天津地区主要以HPV16、56、58亚型为主^[3]，武汉地区主要以HPV16、52、58亚型为主^[4]，浙江地区则以HPV16、11、58和6亚型为主^[5]，上海奉贤地区主HPV16、52、58亚型为主^[6]。本研究结果显示，受检7 709例样本中，感染率居前5位的是HPV52、16、53、58、39亚型，与国内报道的大部分区域基本相同^[7-8]，同时也基本符合东亚地区HPV感染型别^[9]。近年研究^[10]发现，HPV基因型别分布也在随时间而改变，HPV18从感染优势基因逐渐下降，可能与疫苗的接种有关，也可能与HPV18的较强致死性相关。有研究^[11]表明，HPV18主要感染鳞柱交界处的柱状上皮，因此较少发展为CINⅡ、Ⅲ，但具有发展为子宫颈腺癌和鳞状细胞癌的双向潜能。HPV18虽不常见，但致瘤性强，且HPV18感染疾病进展快，转移早，预后差^[12]。有研究^[13]表明，HPV18阳性的子宫颈癌病人较HPV16阳性者预后差。这就提示HPV疫苗的研发也要根据感染优势基因分布情况同步推进。

本研究发现，在1 237例阳性标本中，HPV多为单基因型感染，占感染人数的77.44%，且以单一高危型为主，常见高危型依次为HPV52、16、53、58、39亚型；双重感染者占感染人数的16.01%，多重感染者占感染人数的6.55%，最多检测到6重感染。在二重及多重感染中，最常见HPV52型合并的感染，其次为HPV16或HPV53型。施启丰等^[14]研究发现，深圳地区二重及多重感染中，最常见HPV16型合并的感染，其次为HPV58和HPV52型，说明HPV混合基因型也存在地区差异。研究^[15]表明，多重感染尤其是多重高危型感染会大大增加宫颈癌变风险，提示临床上应重视多重感染者，建议积极治疗并严密追踪随访，降低宫颈癌的发生。

各年龄段的HPV感染率有明显差异，提示HPV的感染率与年龄有关。本研究中，HPV感染的高峰年龄段为41~50岁，这与钟伟明^[16]和方莉等^[17]的研究结果一致，而李小欢等^[18]则认为21~25岁为HPV感染高峰期，可能由于选取的调查对象和区域不同等原因造成。另外，HPV感染受多种因素影响，过早性生活、多个性伴侣、多产、密产、早年分娩、流产等可增加病毒感染机会；生殖道其他微生物的感染(如单纯疱疹病毒、淋菌等)导致生殖道黏膜受损，也会增加病毒感染机会；长期口服激素类避孕药、吸烟、饮酒等也会增加病毒侵袭机会。41~50岁年龄段正处于围绝经期，此时由于机体内分泌紊乱而引起各器官尤其是卵巢功能失调、雌激素水平开始下降，机体对外界有害因素的抵抗力减低，从而易感染HPV。而21~25岁可能由于这一年龄段女性性生活比较活跃，在生理卫生方面未给予充分重视等因素也会造成HPV感染率增高。提示我们应加强围绝经期和年轻妇女的HPV筛查力度。

接种HPV疫苗是预防宫颈癌的有效手段，目前已经上市的HPV预防性疫苗有2价、4价和9价疫苗，2价疫苗主要针对HPV16、18亚型，4价疫苗主要针对HPV16、18、6、11亚型，9价疫苗在4价疫苗基础上增加了HPV31、33、45、52、58五种亚型。本研究发现，上海市宝山区感染率居前5位的高危型是HPV52、16、53、58、39，前5位低危型是HPV61、43、55、81、6，后期还需多地区大样本研究来验证HPV感染的高危型别，为HPV疫苗的研发提供有力依据，以达到更好的预防效果。