-
胃癌是常见的消化道恶性肿瘤，胃癌的发生是一个多步骤、多因素进行发展的过程。癌症的高发因素中，基质金属蛋白酶-7(MMP-7)与血管内皮生长因子(VEGF)已引起广泛重视，国内外的相关文献中有多次报道，但在胃癌的诱发因素中，MMP-7及VEGF与幽门螺杆菌(Hp)的相互关系却鲜有研究; 本实验选取60例胃癌病人，通过用荧光定量PCR法及免疫组织化学检测分别测定其中的MMP-7与VEGF的表达，统计分析其表达水平与各临床病理特征之间有无相关性，从而探求三者与胃癌之间的相互关系，以探求胃癌发生及转移检测的特异、敏感指标，以助于胃癌病人早期诊疗及预后评价。
-
实验所用胃组织来源于2015年1月至2018年11月蚌埠医学院第一附属医院普外科手术室、肿瘤外科手术室，并由病理医生根据组织切片独立作出病理诊断。手术切除组织后，立即取组织置入RNAlater(Ambion, Austin, TX，USA)的EP管内，并放入-80 ℃冰箱中，隔日转入液氮中保存备用。均为经过影像学及病理学检查确诊的胃癌病人60例，其中男43例，女27例，年龄42~83岁。所有病人在术前均未接受化疗、放疗等其他针对肿瘤的特殊治疗以及针对Hp的治疗。
-
60例胃癌病人术前经快速尿素酶实验及C呼气实验检测来判定Hp的感染状态，即快速尿素酶实验及C呼气实验检测均阳性入组Hp阳性组，快速尿素酶实验及C呼气实验检测均阴性入组Hp阴性组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)方法，对2组胃组织标本中MMP-7及VEGF的mRNA表达水平进行检测，结果依据2-△△Ct计算相对定量结果；应用免疫组织化学染色技术检测各组胃组织标本中MMP-7及VEGF的蛋白表达水平。
-
采用t(或t′)检验、Pearson相关性分析和Spearman秩相关分析。
-
Hp阳性组MMP-7、VEGF mRNA表达均高于Hp阴性组(P < 0.01)(见表 1)。
分组 n MMP-7 VEGF Hp阴性组 30 1.000±0.092 1.000±0.094 Hp阳性组 30 1.422±0.088 1.465±0.093 t — 18.16 19.26 P — < 0.01 < 0.01 表 1 Hp阳性组与Hp阴性组中MMP-7、VEGFmRNA表达结果比较(x±s)
-
有浆膜层浸润、有淋巴结转移的胃癌病人MMP-7和VEGF mRNA表达量均高于无浆膜层浸润、无淋巴结转移的病人(P < 0.01)(见表 2)。
分组 n MMP-7 VEGF 无浆膜层浸润 19 1.000±0.112 1.000±0.082 有浆膜层浸润 41 1.315±0.083 1.422±0.098 t — 12.21 16.29 P — < 0.01 < 0.01 无淋巴结转移组 19 1.000±0.124 1.000±0.121 有淋巴结转移组 41 1.342±0.080 1.391±0.087 t — 11.01* 14.26 P — < 0.01 < 0.01 *示t′值 表 2 浆膜侵犯、淋巴转移不同的胃癌病人MMP-7和VEGF mRNA表达结果比较(x±s)
-
60例标本中MMP-7与VEGF mRNA表达值之间呈正相关(r=0.498，P < 0.01)。
-
MMP-7、VEGF在癌旁正常胃黏膜组织中几乎不表达或弱表达，表达则呈浅黄色。均定位于细胞质，呈棕黄色(见图 1~4)。MMP-7、VEGF蛋白在胃癌组织中的阳性率高于癌旁正常胃组织(61.6%vs 5.3% 56.6% vs 11.3%)，Spearman相关性分析结果显示，Hp与MMP-7及VEGF表达呈正相关，MMP-7和VEGF的表达呈正相关(P < 0.05~P < 0.01)(见表 3~4)。
图 1 MMP-7在癌旁组织中阴性表达
图 2 MMP-7在胃癌组织中阳性表达
图 3 VEGF在癌旁组织中阴性表达
图 4 VEGF在胃癌组织中阳性表达(均为EliVision)
Hp MMP-7 VEGF － + － + － 17 13 17 13 + 6 24 9 21 rs 0.377 0.269 P < 0.01 < 0.05 表 3 Hp与MMP-7、VEGF在胃癌中蛋白表达的相关性
VEGF MMP-7 － + － 19 7 + 4 30 rs 0.625 P < 0.01 表 4 VEGF与MMP-7在胃癌中蛋白表达的相关性
-
胃癌是全球癌症相关死亡的主要原因之一，排在全部恶性肿瘤的第5位[1]。在中国，随着人口老龄化的加剧总发病数还将随而增加[2]。国际癌症机构(IARC)已于1994提出Hp是胃癌第Ⅰ类致癌原[3]，Hp感染与胃癌密切相关已得到全世界的认可[4-5]；SUGIMOTO等[6]研究认为MMPs于胃黏膜炎症反应和Hp相关疾病的发生有关，MMP-7与Hp之间有着相互促进的关系[7-9]。VEGF在新生血管和淋巴管的生成中发挥重要作用，因此许多学者认为VEGF与肿瘤细胞新生血管的生成亦密切相关；VEGF与MMP-7与肿瘤的发生、转移等关系在肺癌、结肠癌等肿瘤中已有报道，但在胃癌中鲜有报道[10]；胃癌高发因素中，MMP-7与VEGF已引起广泛的重视[11-14]，但三者之间相互关系研究报道较少。
本研究结果显示，胃癌组织中的MMP-7与VEGF均高表达，明显高于同标本来源的正常组织，说明上述因子可能参与了胃癌的发生、发展。其中Hp阳性组MMP-7及VEGF表达值与Hp阴性组比较，差异均有统计学意义，提示在胃癌的发生、发展过程中Hp与MMP-7及VEGF可能起到了相互协同的作用，从而促进了胃癌的进程发展。实验中发现，MMP-7与VEGF表达值两者之间呈正相关性，提示两者存在胃癌的发生、发展中可能也起到了相互协同的作用。免疫组织化学结果中MMP-7、VEGF蛋白在胃癌组织中的阳性率显著高于癌旁正常胃组织，亦可说明上述因子参与了胃癌的发生、发展。经Spearman等级相关分析亦显示，Hp与MMP-7和VEGF之间呈正相关性，推测Hp导致胃癌发生、发展可能与MMP-7、VEGF过表达相关。且MMP-7与VEGF表达具有高度一致性，MMP-7可水解包括Ⅳ型胶原蛋白、层黏连蛋白、纤维连接蛋白、酪蛋白等在内的多种组织蛋白，VEGF在新生血管和淋巴管的生成中发挥重要作用，结合两者表达的高度一致性提示两者在胃癌的转移、侵袭等过程中可能存在相互作用，共同促进了肿瘤的转移与浸润。本研究MMP-7和VEGF在淋巴结转移组及浆膜浸润组表达值较高，亦表明两指标与肿瘤转移可能相关。
综上，MMP-7、VEGF在胃癌组织中均有较高的表达，均与Hp感染密切相关，两者在肿瘤的发展过程中起着非常重要的作用，且两者具有相关性，同时检测可以从不同角度更好地监测肿瘤的发生、发展。
幽门螺杆菌感染病人胃癌组织中MMP-7、VEGF的表达及相关性研究
Study on the correlation between the expression levels of MMP-7 and VEGF in gastric cancer tissues of patients with Helicobacter pylori infection
-
摘要:
目的检测幽门螺杆菌（Hp）感染与基质金属蛋白酶-7（MMP-7）、血管内皮生长因子（VEGF）在胃癌组织中的表达及临床意义。 方法胃癌组织来源于2015年1月至2018年11月蚌埠医学院第一附属医院普外科手术室、肿瘤外科手术室，按照幽门螺杆菌是否感染分2组。采用荧光定量PCR法及免疫组织化学检测MMP-7、VEGF的表达。 结果60例胃癌组织中，Hp阳性组、有浆膜层浸润、有淋巴结转移的胃癌病人MMP-7、VEGF mRNA表达高于Hp阴性组、无浆膜层浸润、无淋巴结转移的病人（P < 0.01）；MMP-7与VEGF mRNA表达值之间呈正相关（r=0.498，P < 0.01）；Hp与MMP-7及VEGF表达呈正相关，MMP-7和VEGF的表达呈正相关（P < 0.05~P < 0.01）。 结论MMP-7、VEGF与胃癌的发生、发展可能有关，在胃癌的发生、发展过程中幽门螺杆菌与MMP-7、VEGF可能起到了相互协同的作用。MMP-7与VEGF表达呈正相关。 Abstract:ObjectiveTo detect the expression levels and clinical significance of matrix metalloproteinase-7(MMP-7) and vascular endothelial growth factor(VEGF) in gastric cancer tissues of patients with Helicobacter pylori(Hp) infection. MethodsThe gastric cancer tissues were collected from Department of General Surgery and Tumor Surgery Operating Rooms of the First Affiliated Hospital of Bengbu Medical College from January 2015 to November 2018, and were divided into two groups according to whether with Hp infection.The expression levels of MMP-7 and VEGF were detected using the fluorescence quantitative PCR and immunohistochemistry. ResultsAmong 60 cases of gastric cancer tissues, the mRNA expression levels of MMP-7 and VEGF in Hp-positive group, patients with serous layer infiltration and lymph node metastasis were higher than in Hp-negative group, patients without serous layer infiltration and lymph node metastasis(P < 0.01).There was a positive correlation between MMP-7 and VEGF mRNA expressions(r=0.498, P < 0.01).The Hp was positively correlated with MMP-7 and VEGF expression levels, and the expression level of MMP-7 was positively correlated with VEGF(P < 0.05 to P < 0.01). ConclusionsMMP-7 and VEGF may be related to the occurrence and development of gastric cancer, and Hp, MMP-7 and VEGF may play a synergistic role in the occurrence and development of gastric cancer.The expression level of MMP-7 is positively correlated with VEGF. -
表 1 Hp阳性组与Hp阴性组中MMP-7、VEGFmRNA表达结果比较(x±s)
分组 n MMP-7 VEGF Hp阴性组 30 1.000±0.092 1.000±0.094 Hp阳性组 30 1.422±0.088 1.465±0.093 t — 18.16 19.26 P — < 0.01 < 0.01 
下载: 导出CSV
表 2 浆膜侵犯、淋巴转移不同的胃癌病人MMP-7和VEGF mRNA表达结果比较(x±s)
分组 n MMP-7 VEGF 无浆膜层浸润 19 1.000±0.112 1.000±0.082 有浆膜层浸润 41 1.315±0.083 1.422±0.098 t — 12.21 16.29 P — < 0.01 < 0.01 无淋巴结转移组 19 1.000±0.124 1.000±0.121 有淋巴结转移组 41 1.342±0.080 1.391±0.087 t — 11.01* 14.26 P — < 0.01 < 0.01 *示t′值
下载: 导出CSV
表 3 Hp与MMP-7、VEGF在胃癌中蛋白表达的相关性
Hp MMP-7 VEGF － + － + － 17 13 17 13 + 6 24 9 21 rs 0.377 0.269 P < 0.01 < 0.05
下载: 导出CSV
-
[1] BRAY F, FERLAY J, SOERJOMATARAM I, et al.Global cancerstatistics 2018:GLOBOCAN estimates of incidence andmortality worldwide for 36 cancers in 185 countries[J].CA Cancer J Clin, 2018, 68(6):394. [2] 杨之洵, 郑荣寿, 张思维, 等.中国胃癌发病趋势及预测[J].中国肿瘤, 2019, 28(5):321. [3] IARC.International Agency for Research of Cancer.Schistosomes, liver flukes and Helicobacter pylori.Monographs on the evalution of carcinogenic risks to humans[C].World Health Organization, 1994. [4] GRAHAM DY.Helicobacter pylori update:gastric cancer, reliable therapy, and possible benefits[J].Gastroenterology, 2015, 148(4):719. [5] LEE YC, CHIANG TH, CHOU CK, et al.Association between Helicobacter pylori eradication and gastric cancer incidence:a systematic review and meta-analysis[J].Gastroenterology, 2016, 150(5):1113 [6] SUGIMOTO M, FURUTA T, KODAIRA C, et al.Polymorphisms of matrix metalloproteinase-7 and chymase are associated with susceptibility to and progression of gastric cancer in Japan[J].J Gastroenterol, 2008, 43(10):751. [7] SIREGAR G, HALIM S, SITEPU R.Serum IL-10, MMP-7, MMP-9 levels in Helicobacter pylori infection and correlation with degree of gastritis[J].Open Access Maced J Med Sci, 2016, 4(3):359. [8] YIN YF, GRABOWSKA AM, CLARKE PA, et al.Helicobacter pylori potentiates epithelial:mesenchymaltransition in gastric cancer:links to soluble HB-EGF, gastrin and matrix metalloproteinase-7[J].Gut, 2010, 59(8):1037. [9] SADEGHIANI M, BAGHERI N, SHAHI H, et al.Pathogenicity island-dependent upregulation of matrix metalloproteinase-7 in infected patients with Helicobacter pylori[J].J Immunoassay Immunochem, 2017, 38(6):595. [10] ZHAO WX, LIU ZF, LI XL, et al.Correlations of serum homocysteine, VEGF and gastrin 17 with gastric cancer and precancerous lesions[J].Eur Rev Med Pharmacol Sci, 2019, 23(10):4192. [11] RAKESH N, LIM VIN N, MAK JOONW, et al.Protein expression of STAT3, pSTAT3, MMP-7 and VEGF in colorectal adenocarcinoma:an immunohistochemical study[J].J Cancer Therapy, 2014, 5(13):1175. [12] FU JD, YAO JJ, WANG H, et al.Effects of EGCG on proliferation and apoptosis of gastric cancer SGC7901 cells via down-regulation of HIF-1α and VEGF under a hypoxic state[J].Eur Rev Med Pharmacol Sci, 2019, 23(1):155. [13] 任志, 汪强武, 王启之.胃癌组织中端粒酶活性、基质金属蛋白酶-7表达的检测及临床意义[J].蚌埠医学院学报, 2012, 37(2):160. [14] FENG Y, LI AM, JING DH.The correlation analysis of the expression of VEGF and the DCs'infiltration density of gastric cancer tissues[J].J Hainan Med Univ, 2016, 22(1):1. -
点击查看大图
图(4)表(4)
计量
- 文章访问数: 4387
- HTML全文浏览量: 2301
- PDF下载量: 13
- 被引次数: 0
