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三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer, TNBC)是指雌激素受体(estrogen receptors, ER)、孕激素受体(progesterone receptors, PR)和人类表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2, Her-2)均为阴性的乳腺癌。TNBC恶性程度高、侵袭性强、易远处转移、预后差、对内分泌及靶向治疗反应不敏感,目前尚缺乏有效的治疗方案。因此,寻找有效的靶向治疗分子,对TNBC的早期诊断及治疗至关重要。p53是与肿瘤高度相关的抑癌基因,在乳腺癌的发生发展过程中起着重要的作用。转录共激活因子PDZ结合基序(transcriptional co-activator with PDZ binding motif, TAZ)是Hippo信号通路下游主要的效应分子之一,具有调控细胞增殖、分化、侵袭转移的作用。TAZ作为重要的致癌基因在多种人类肿瘤中存在高表达。本文以此为出发点,通过免疫组织化学方法检测p53和TAZ在TNBC组织中的表达,探讨p53、TAZ与TNBC病人的临床病理特征的关系,为TNBC的靶向治疗提供依据。现作报道。
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收集2013年11月至2014年12月我科收治的TNBC病人30例,取同期非三阴性乳腺癌(non-triplenegative breast cancer, non-TNBC)病人30例作对照组。所有病人均为女性,年龄28~72岁;肿瘤大小≤2 cm 30例,>2~5 cm 26例,>5 cm 4例;无淋巴结转移28例,有淋巴结转移32例;TNM分期:Ⅰ期15例,Ⅱ期29例,Ⅲ期16例;组织学分级:Ⅰ~Ⅱ级38例,Ⅲ级22例。所有病人术前均未接受过放疗、化疗、靶向及内分泌治疗,入院后经我院病理科确诊为浸润性乳腺癌后行乳腺癌改良根治术。TNBC组和non-TNBC组比较,年龄、TNM分期和组织学分级差异无统计学意义(P>0.05),TNBC组肿瘤大小>2 cm、淋巴结转移率均大于non-TNBC组(P<0.05和P<0.01)(见表 1)。
分组 n 年龄/岁 肿瘤大小/cm TNM分期 淋巴结转移 组织学分级 ≤45 >45 ≤2 >2 Ⅰ Ⅱ Ⅲ 无 有 Ⅰ~Ⅱ Ⅲ TNBC组 30 15 15 11 19 10 13 7 20 10 17 13 non-TNBC组 30 11 19 19 11 5 16 9 8 22 21 9 χ2 — 1.09 4.27 2.23 9.64 1.15 P — >0.05 < 0.05 >0.05 < 0.01 >0.05 表 1 TNBC和non-TNBC组临床资料比较
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p53抗体购自福州迈新生物技术开发有限公司,兔抗人TAZ抗体购自美国Abcam公司(ab110239)。所有标本均经10%甲醛溶液固定,采用免疫组织化学标记(S-P法)进行检测。石蜡标本常规切片后脱蜡、水化,蒸馏水冲洗,用PBS(pH=7.4)冲洗3次,每次3 min。高温高压对组织抗原进行修复,冷却至室温,PBS缓冲液浸泡5 min,重复3次。3%过氧化氢室温下孵育10 min,阻断内源性过氧化物酶,PBS冲洗3次,每次3 min。甩去PBS,滴加第一抗体(p53抗体/TAZ抗体),4 ℃过夜。PBS冲洗3次,每次3 min,甩去PBS,滴加二抗(根据福州迈新生物技术开发有限公司和Abcam公司二抗试剂盒说明书进行操作),PBS冲洗3次,每次3 min。甩去PBS,滴加DAB显色液,蒸馏水冲洗,进行复染,脱水,透明,自然干燥后封片。
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本实验中的病理检测结果的判断由我院病理科2名高年资副主任医师担任。p53的阳性染色结果为细胞核中出现棕黄色颗粒;TAZ蛋白表达在细胞核和/或细胞质中,并呈棕黄色颗粒为阳性。随机选取5个高倍镜(200倍)视野,根据细胞着色比例和染色强度进行评价。细胞着色比例: < 10%记为0分,10%~25%记为1分,>25%~50%记为2分,>50%~75%记为3分,>75%记为4分;染色强度:无着色记为0分,淡黄色记为1分,黄色记为2分,棕黄色记为3分。上述两项结果相乘,得分 < 3为阴性,≥3为阳性。
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采用χ2检验和Spearman秩相关分析。
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p53在TNBC和non-TNBC组织中均有表达(见图 1~4)。2组阳性率差异无统计学意义(P>0.05)(见表 2)。
分组 p53 χ2 P 阳性 阴性 TNBC组
non-TNBC组20
2210
80.32 >0.05 表 2 p53在TNBC和non-TNBC组织中的表达
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TAZ蛋白在TNBC和non-TNBC组织中均有表达(见图 5~8)。TNBC组织中TAZ阳性率高于non-TNBC(P<0.01)(见表 3)。
分组 TAZ χ2 P 阳性 阴性 TNBC组
non-TNBC组17
513
2510.34 < 0.01 表 3 TAZ在TNBC和non-TNBC组织中的表达
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p53的阳性表达与年龄和肿瘤大小有关,年龄≤45岁、肿瘤>2 cm的p53的阳性表达率较高(P<0.05),而与临床病理分期、组织学分级、淋巴及转移情况无关(P>0.05)。TAZ的阳性表达与肿瘤大小和组织学分级有关,肿瘤>2 cm、组织学分级Ⅰ~Ⅱ的阳性表达率较高(P<0.01和P<0.05),而与发病年龄、临床病理分期、淋巴及转移情况无关(P>0.05)(见表 4)。
临床病理参数 n p53 TAZ 阳性 阴性 阳性 阴性 年龄/岁 ≤45 15 13 2 9 6 >45 15 7 8 8 7 χ2 — 5.40 0.14 P — < 0.05 >0.05 肿瘤大小/cm ≤2 11 4 7 2 9 >2 19 16 3 15 4 χ2 — 5.19 8.17 P — < 0.05 < 0.01 TNM分期 Ⅰ~Ⅱ 23 15 8 15 8 Ⅲ 7 5 2 2 5 χ2 — 0.00 1.63 P — >0.05 >0.05 淋巴结转移 无 20 15 5 12 8 有 10 5 5 5 5 χ2 — 0.92 0.02 P — >0.05 >0.05 组织学分级 Ⅰ~Ⅱ 17 11 6 13 4 Ⅲ 13 9 4 4 9 χ2 — 0.00 6.27 P — >0.05 < 0.05 表 4 TNBC中TAZ和YAP的表达与临床病理参数的关系
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在TNBC中,p53和TAZ共同阳性表达的有14例,共同阴性表达的有7例。根据Spearman相关分析结果显示,p53和TAZ蛋白在TNBC中的表达呈正相关(rs=0.381, P<0.05)。
p53和TAZ在三阴性乳腺癌中的表达和意义
Expression and significance of p53 and TAZ in triple negative breast cancer
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摘要:
目的研究三阴性乳腺癌(TNBC)组织中p53与TAZ的表达和意义,并探讨其与TNBC病人临床病理特征的关系。 方法收集病理确诊的浸润性乳腺癌60例[TNBC组30例,非三阴性乳腺癌(non-TNBC)组30例],应用免疫组织化学方法检测60例乳腺癌组织中p53和TAZ的表达情况,并分析它们与TNBC病人的年龄、肿瘤大小、淋巴结转移、TNM分期及组织学分级等的关系。 结果TAZ在TNBC组织中的表达高于non-TNBC组(P < 0.01);年龄≤45岁、肿瘤>2 cm的p53的阳性表达率较高(P < 0.05),肿瘤>2 cm、组织学分级Ⅰ~Ⅱ TAZ的阳性表达率较高(P < 0.01和P < 0.05);在TNBC中,p53与TAZ的表达呈正相关(rs=0.381,P < 0.05)。 结论TAZ可能与TNBC的发生发展有关。 -
关键词:
- 三阴性乳腺癌 /
- p53 /
- 转录共激活因子PDZ结合基序
Abstract:ObjectiveTo study the expression and significance of p53 and transcriptional co-activator with PDZ binding motif(TAZ) in triple negative breast cancer(TNBC), and explore their relationship with the clinicopathological characteristics in TNBC patients. MethodsSixty patients with invasive breast cancer diagnosed by pathology were divided into the TNBC group(30 cases) and non-TNBC group(30 cases).The expression levels of p53 and TAZ in cancer tissue were detected using immunohistochemistry.The relationship between the expression levels of p53 and TAZ, and age, tumor size, lymph node metastasis, TNM stage and histological grade of TNBC patients were analyzed. ResultsThe expression level of TAZ in TNBC group was higher than that in non-TNBC group(P < 0.01).The positive expression rates of p53 in patient age ≤ 45 years old and tumor >2 cm were higher, while the positive expression rates of TAZ in tumor >2 cm and histological grade Ⅰ-Ⅱ were higher(P < 0.01 and P < 0.05).In TNBC group, the expression level of p53 was positively correlated with TAZ expression(rs=0.381, P < 0.05). ConclusionsTAZ may be involved in the development of TNBC. -
表 1 TNBC和non-TNBC组临床资料比较
分组 n 年龄/岁 肿瘤大小/cm TNM分期 淋巴结转移 组织学分级 ≤45 >45 ≤2 >2 Ⅰ Ⅱ Ⅲ 无 有 Ⅰ~Ⅱ Ⅲ TNBC组 30 15 15 11 19 10 13 7 20 10 17 13 non-TNBC组 30 11 19 19 11 5 16 9 8 22 21 9 χ2 — 1.09 4.27 2.23 9.64 1.15 P — >0.05 < 0.05 >0.05 < 0.01 >0.05 表 2 p53在TNBC和non-TNBC组织中的表达
分组 p53 χ2 P 阳性 阴性 TNBC组
non-TNBC组20
2210
80.32 >0.05 表 3 TAZ在TNBC和non-TNBC组织中的表达
分组 TAZ χ2 P 阳性 阴性 TNBC组
non-TNBC组17
513
2510.34 < 0.01 表 4 TNBC中TAZ和YAP的表达与临床病理参数的关系
临床病理参数 n p53 TAZ 阳性 阴性 阳性 阴性 年龄/岁 ≤45 15 13 2 9 6 >45 15 7 8 8 7 χ2 — 5.40 0.14 P — < 0.05 >0.05 肿瘤大小/cm ≤2 11 4 7 2 9 >2 19 16 3 15 4 χ2 — 5.19 8.17 P — < 0.05 < 0.01 TNM分期 Ⅰ~Ⅱ 23 15 8 15 8 Ⅲ 7 5 2 2 5 χ2 — 0.00 1.63 P — >0.05 >0.05 淋巴结转移 无 20 15 5 12 8 有 10 5 5 5 5 χ2 — 0.92 0.02 P — >0.05 >0.05 组织学分级 Ⅰ~Ⅱ 17 11 6 13 4 Ⅲ 13 9 4 4 9 χ2 — 0.00 6.27 P — >0.05 < 0.05 -
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