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在解剖教学及各类动植物标本保存的过程中,保存液浸泡保存是最经济、便携的处理方式。而目前广泛应用的保存液成分主要是甲醛、乙醇、醋酸等化学试剂[1-2]。但这类保存液易挥发,伴有刺激性气味,长期使用甚至会损伤操作人员的呼吸系统及血液系统[3]。新型环保试剂已经成为业界研究的热点,研发一种兼顾组织保存和无毒无刺激气味的保存液对本学科的发展有着重要的贡献及意义。辛香料在食品保存产业中应用十分广泛,其中不乏一些具有防腐抗菌作用的品种。然而,辛香料作为主要成分的保存液研发及应用仍不多见,本研究选取丁香作为实验辛香料,与传统甲醛保存液相比较,探究其提取液的抑菌和保存时间,为辛香料为主要成分保存液的开发提供实验基础。
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实验组及阳性对照组对革兰氏阳性金黄色葡萄球菌及革兰氏阴性大肠埃希菌均有抑菌作用,其中丁香水提物对2种细菌的抑菌圈直径分别为(8.67±0.58)mm和(10.27 ±0.83)mm(见表 1)。
分组 n 金黄色葡萄球菌 大肠埃希菌 实验组(丁香水提抑菌液) 3 8.67±0.58 10.27 ±0.83 阴性对照组(蒸馏水) 3 - - 阳性对照组(10%甲醛) 3 9.84±0.76 10.93 ±1.15 “-”表示无抑菌圈 表 1 3组保存液的抑菌圈直径(x±s;mm)
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记录2组菌落培养液中细菌生长的最大药物稀释倍数,即最小药物浓度,并计算丁香水提液的最小抑菌浓度,金黄色葡萄球菌及大肠埃希菌的最小抑菌浓度分别125 mg/mL和62.5 mg/mL(见表 2)。
孔号 稀释倍数 金黄色葡萄球菌 大肠埃希菌 1 1∶2 - - 2 1∶4 - - 3 1∶8 - - 4 1∶16 + - 5 1∶32 + + 6 1∶64 + + 7 1∶128 + + ~ ~ ~ ~ 13 + + “+”代表有细菌生长; “-”代表无细菌生长 表 2 丁香水提液的最小抑菌浓度测定
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每周观察并取样一次,阴性对照组于第1周即被检出细菌产生,且兔皮肤组织软化,溃烂,试管内液体出现浑浊,伴有气味。阳性对照组无细菌检出,兔皮肤组织硬化,弹性差,试管内液体呈透明状,无沉淀及霉菌孢子,保存液刺激性强。实验组于第12周开始陆续检出细菌,6组重复试验中最长无细菌检出时间可达15周,最短为12周。该段时间内,兔皮肤组织弹性较阳性实验组佳,无明显刺激性及异味,随着细菌的检出,试管内液体逐渐浑浊,出现腐败气味(见图 1)。
丁香水提物的抑菌效应及对兔标本保存效果的研究
Effect of the antimicrobial activities of water extracts from clove on rabbit specimen preservation
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摘要:
目的探讨丁香水提物的抑菌及组织保存作用。 方法用水提法提取丁香主要成分液体,以10%甲醛及蒸馏水作对照,测定3组液体对金黄色葡萄球菌及大肠杆菌的抑菌圈大小,和对兔皮组织保存效果,并采用二倍稀释法测定丁香水提抑菌液的最小抑菌浓度。 结果丁香水提液无刺激性气味,对金黄色葡萄球菌及大肠杆菌均有抑菌作用,最小抑菌浓度分别为125 mg/mL和62.5 mg/mL。作为保存液在12周内未有细菌检出。 结论丁香水提物具有一定的抑菌作用,在一定时间内有较好的组织保存作用。 Abstract:ObjectiveTo study the effects of water extracts from clove on the antimicrobial activities and the tissue preservation. MethodsThe extraction products of clove were obtained by water extraction, then the bacteriostatic ring size and tissue preservation effect were compared with 10% formalin group and distilled water group.The minimum inhibitory concentration was determined by double dilution method. ResultsWater extracts from clove has no obvious irritating odor which has an inhibitory effect on both E.coli and Staphylococcus aureus.The minimum inhibitory concentrations were 125 mg/mL and 62.5 mg/mL, respectively.No bacteria in the water extracts from clove as preservative solution were detected in 12 weeks. ConclusionsThe water extracts from clove has the certain bacteriostatic effect, which exerts a better preservation influence on the tissue specimen in a certain time. -
Key words:
- specimen preservation /
- spices /
- clove /
- preservation solution
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表 1 3组保存液的抑菌圈直径(x±s;mm)
分组 n 金黄色葡萄球菌 大肠埃希菌 实验组(丁香水提抑菌液) 3 8.67±0.58 10.27 ±0.83 阴性对照组(蒸馏水) 3 - - 阳性对照组(10%甲醛) 3 9.84±0.76 10.93 ±1.15 “-”表示无抑菌圈 表 2 丁香水提液的最小抑菌浓度测定
孔号 稀释倍数 金黄色葡萄球菌 大肠埃希菌 1 1∶2 - - 2 1∶4 - - 3 1∶8 - - 4 1∶16 + - 5 1∶32 + + 6 1∶64 + + 7 1∶128 + + ~ ~ ~ ~ 13 + + “+”代表有细菌生长; “-”代表无细菌生长 -
[1] 祖文轩, 蒋邦红, 杨俊松, 等. 改良保存液对兔标本固定效果的观察[J]. 泰山医学院学报, 2017, 38(8): 856. doi: 10.3969/j.issn.1004-7115.2017.08.006 [2] 祖文轩, 杨俊松, 蒋邦红, 等. 以冰醋酸和丙三醇为主要成分的改良标本保存液[J]. 牡丹江医学院学报, 2017, 38(4): 6. [3] 雒江菡, 于瑞洪, 王巍. 大蒜水提物抑菌作用的研究[J]. 化学工程师, 2017, 31(3): 75. [4] 罗国平, 闫梦茹, 孟会宁, 等. 复方丁香挥发油的提取和包合工艺研究[J]. 中国食品添加剂, 2019, 30(5): 70. [5] 蒋学之, 张瑞稳, 王簃兰, 等. 甲醛接触工人肿瘤死亡流行病学[J]. 中华劳动卫生职业病杂志, 1990, 8(5): 261. [6] 熊艾君. 人体标本保存液的实验观察[J]. 解剖学研究, 2000, 22(1): 76. [7] JING L, ZHENG G, QIANZI Y, et al. Adjuvant argon-based cryoablation for joint-preserving tumor resection in patients with juxta-articular osteosarcoma around the knee[J]. Cryobiology, 2015, 71(2): 236. [8] MAJEWSKI P, PERNAK A, GRZYMISłAWSKI M, et al. Ionic liquids in embalming and tissue preservation[J]. Acta Histochemica, 2003, 105(2): 135. [9] 赵晨, 张浩轩, 房田园, 等. 改良金银花配方标本保存液对兔标本的固定效果[J]. 蚌埠医学院学报, 2019, 44(6): 831. [10] 张雁南, 宁志亮, 陈长武, 等. 丁香、甘草协同抑菌作用研究[J]. 食品科学, 2010, 31(21): 65. [11] 褚夫江, 金小宝, 刘文彬, 等. 不同提取方法对中药罗仙子体外抑菌活性的影响[J]. 时珍国医国药, 2014, 25(8): 1806.