目的:通过比较几种肝脏淋巴细胞分离方法得到的总淋巴细胞、T细胞、自然杀伤T细胞(NKT cells)及自然杀伤细胞(NK细胞)的比例和细胞绝对数,明确各种方法的适用范围。方法:按照析因设计,将不放血(A法)、摘眼球放血(B法)、体循环灌流(C法)、摘眼球结合体循环灌流(B法+C法)4种肝脏预处理方法和单浓度离心法(Ⅰ法)、非连续密度梯度离心法(Ⅱ法)2种Percoll分离方法进行全面组合,共获得8种组合条件,分离小鼠肝脏淋巴细胞,用流式细胞术检测各类型细胞比例。结果:肝脏预处理方法中B法+C法获得淋巴细胞比例最高,A法获得淋巴细胞绝对数最高,B法获得的NKT细胞和NK细胞比例和细胞绝对数均最高;Ⅱ法获得的淋巴细胞、T细胞、NKT细胞和NK细胞比例和细胞绝对数均高于Ⅰ法。对于NKT细胞比例和NK细胞绝对数,肝脏预处理方法和Percoll浓度之间有交互作用(P0. 01和P0. 05),其他均无交互作用(0. 05)。结论:采用摘眼球放血结合体循环灌流法,结合Percoll非连续密度梯度法(33%+70%),可获得较高数量和比例的固有免疫细胞,有助于对肝脏固有免疫细胞如NKT细胞、NK细胞等的研究。

目的:建立流式细胞术检测单核巨噬细胞吞噬荧光素标记结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)的方法。方法:用不同浓度荧光素(FITC)标记Mtb,流式细胞术检测FITC对Mtb的标记率。健康人外周全血与FITC标记Mtb(FITC-Mtb)于37℃共孵育10~120 min,溶解红细胞,洗涤后加台盼蓝淬灭未吞噬的FITC-Mtb的荧光,流式细胞术检测FITC阳性单核细胞的数值,计算单核细胞对Mtb的吞噬率。FITC-Mtb与佛波醇酯(PMA)激活分化的THP-1细胞以10:1的比例共孵育1~6 h,或以1:1~100:1的比例孵育1 h和2 h,用同样的方法检测吞噬率。结果:FITC(50μg/ml)与Mtb作用2 h的标记率达92%。人单核细胞对FITC-Mtb的吞噬率从10 min的34.68%增加至120 min的79.90%。THP-1细胞对FITC-Mtb的吞噬率从1 h的30%增加至6 h的81%。FITC-Mtb与THP-1细胞以100:1比例孵育1 h,吞噬率达平台(81%);以50:1的比例孵育2 h,吞噬率达平台(82%)。未加台盼蓝淬灭时,单核细胞在10 min和120 min对FITC-Mtb的吞噬率与加台盼蓝淬灭相比,分别增加29%和6%;而未加台盼蓝淬灭时,THP-1细胞在1 h和6 h对FITC-Mtb的吞噬率与加台盼蓝淬灭相比分别增加1%和7%。结论:流式细胞术检测人单核巨噬细胞吞噬FITC标记Mtb是测定单核巨噬细胞对Mtb吞噬活性的简便、快速和重复性好的方法。

目的：利用产单核细胞李斯特菌(LM)感染BALB/c小鼠模型，研究LM感染对小鼠脾脏树突状细胞(DC)亚群及表型变化的影响。方法：LM尾静脉感染BALB/c小鼠，感染后第3、5、7天取小鼠脾脏，平板稀释法进行脾脏细菌载量分析；流式细胞术检测脾脏DC亚群及DC相关表面分子CD80、CD86的表达情况。结果：感染小鼠脾脏细菌载量感染后第3天有高水平的菌落形成单位计数，随着时间的推移细菌的数量迅速降低，直到第7天基本被清除；CD11c+DC的数量在感染第5天高于对照组(P0.05)，CD4+DC的数量在感染后第5天和第7天均高于对照组(P0.05)，CD8+DC的数量在感染后第3、5和7天及CD4-CD8-DC的数量在感染后的第3和第5天亦均高于对照组(P0.05～P0.01)；LM感染后，DC表面CD80和CD86的表达增加，均于感染后第3天和第5天显著高于对照组(P0.01)。结论：LM感染早期，小鼠脾脏DC亚群出现的增殖和成熟表型特征性分子表达上调，决定了其在细胞免疫应答活化中的作用地位。

目的:探讨结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)感染对小鼠骨髓来源的树突状细胞(DC)功能的影响。方法:将DC分为4组,即脂多糖(LPS)感染组、Mtb感染组、灭活Mtb感染组和正常细胞对照组。以LPS、Mtb及灭活的Mtb与小鼠骨髓来源的DC建立小鼠体外感染模型,用酶联免疫吸附法测定白细胞介素(IL)-6、IL-12及肿瘤坏死因子-α的表达;流式细胞术检测DC表面主要组织相容性复合体Ⅱ类分子、CD40、CD80和CD86的表达。结果:每只小鼠的股骨骨髓可扩增获得5×10⁶～1×10⁷个具有典型细胞形态的DC,纯度达85%以上;与对照组比较,流式细胞术结果显示LPS、Mtb和灭活Mtb感染组均能促进DC表面分子的表达(P<0.01)。Mtb感染组DC表面分子上调显著低于LPS感染组与灭活Mtb感染组(P<0.01);LPS、Mtb或灭活Mtb作用后,DC的IL-6、IL-12和肿瘤坏死因子-α分泌量显著增加(P<0.01),Mtb感染组DC的细胞因子分泌量显著低于LPS感染组与灭活Mtb感染组(P<0.01)。结论:Mtb活菌可干扰DC的细胞因子分泌,抑制DC成熟,从而削弱其抗原递呈的功能,影响抗原特异性细胞的免疫活化。

目的:探讨空腹血糖(FPG)和糖化血红蛋白(HbA1c)水平联合检测在健康体检中的应用价值。方法:选择263名健康体检者作为研究对象, 分别检测其FPG和HbA1c水平, 对两者进行相关性分析。结果:263例中HbA1c<5.5%者139例, 5.5%~6.5%者88例, >6.5%者36例。HbA1c>6.5%体检者FPG均明显高于HbA1c<5.5%和5.5%~6.5者(P<0.01)。相关分析显示, 263名研究对象的HbA1c水平与FPG之间呈正相关关系(P<0.01)。结论:FPG和HbA1c联合检测在健康体检中对糖尿病的筛查有重要价值, 适宜在实际工作中推广应用。

目的探讨幽门螺杆菌（Helicobacter pylori，HP）感染对2型糖尿病（T2DM）病人代谢水平的影响。方法共纳入175例T2DM病人，按HP感染情况分为HP感染组和HP未感染组。收集或检测每位病人的年龄、性别、血清总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、脂蛋白-a（LP-a）、空腹血糖（Glu）、糖化血红蛋白（HbA1c）等。通过比较2组间的检测结果分析HP感染对T2DM病人代谢水平的影响。结果175例T2DM病人中，HP感染91例（52%），HP未感染84例（48%），T2DM合并HP感染组血清LP-a和HbA1c（%）水平均高于HP未感染组（P < 0.01）；T2DM病人HbA1c（%）>8的比例，HP感染者高于HP未感染者，差异有统计学意义（P < 0.01）；2组间其他指标差异均无统计学意义（P>0.05）。结论HP感染影响T2DM病人的血糖血脂代谢，可能参与代谢异常相关性疾病的发生和发展。

目的探讨丙型肝炎病毒核心抗原（hepatitis C virus core antigen，HCV-cAg）与丙型肝炎病毒RNA（hepatitis C virus RNA，HCV-RNA）关系以及丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、谷氨酰转肽酶（GGT）水平与HCV-RNA病毒载量之间的相关性。方法选取78例HCV抗体检测阳性的丙型肝炎或疑似丙型肝炎病人作为观察组，另选取同期健康体检者20名作为对照组。采用ELISA法和荧光定量PCR法等对2组血清样本进行HCV-cAg、HCV-RNA和ALT、AST、GGT水平测定，并比较各参数之间的关系。结果观察组HCV-cAg阳性检出率为41.0%（32/78），HCV-RNA阳性检出率为53.8%（42/78），差异有统计学意义（P < 0.01），且二者之间具有较好一致性（κ=0.747）。观察组ALT、AST和GGT水平均明显高于对照组（P < 0.01），但与HCV-RNA病毒载量均无明显相关性（P>0.05）。结论HCV-cAg和HCV-RNA在检测丙型肝炎方面有较好一致性和相关性，可为丙型肝炎的临床诊断提供有价值的依据。

目的：探讨结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis，Mtb)感染THP-1细胞后对细胞表面白细胞分化抗原14(CD14)表达的影响。方法：Mtb以10∶1感染佛波醇酯(PMA)分化的THP-1细胞，建立Mtb感染THP-1细胞的模型。采用流式细胞术检测THP-1细胞、PMA分化的THP-1细胞及Mtb感染THP-1细胞CD14的表达。结果：THP-1细胞和PMA分化的THP-1细胞表面表达CD14的阳性率分别为5.5%和21.6%，对Mtb的吞噬率分别为7.7%和93.0%；Mtb感染的THP-1细胞表面表达CD14的阳性率为27.5%。结论：PMA分化后的THP-1细胞表面CD14的表达增加，Mtb感染后CD14的表达进一步增加，对Mtb的吞噬率增加。

目的:检测结核病患者外周血中性粒细胞(PMN)体外感染结核分枝杆菌(M.tb)前后表面Toll样受体2(TLR2)和Toll样受体4(TLR4)的表达,并探讨其意义。方法:采用流式细胞仪检测结核病患者PMN表面TLR2和TLR4的表达,同时检测正常人PMN表面TLR2和TLR4的表达率;再用M.tb感染结核病患者和正常人外周血,检测PMN表面TLR2和TLR4表达情况。结果:结核病患者外周血感染M.tb前PMN表面TLR2和TLR4表达率明显高于正常人(P0.01);结核病患者和正常人外周血在感染M.tb后PMN表面TLR2和TLR4表达率均较感染前明显降低(P0.01)。结论:结核病患者PMN表面TLR2和TLR4的表达和活化有助于机体抵御结核感染,TLR2和TLR4共同参与了宿主对M.tb的免疫应答。