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人脐带血内皮祖细胞的分离、培养与鉴定

赵梦蝶 查从亮 江浩 项平

引用本文:
Citation:

人脐带血内皮祖细胞的分离、培养与鉴定

    作者简介: 赵梦蝶(1990-),女,硕士研究生.
    通讯作者: 项平, 教授.byxiangping@163.com
  • 基金项目:

    安徽省自然科学基金项目(1308085MH164);蚌埠医学院科研创新计划(Byycx1544)

  • 中图分类号: R329.28

Study on the separation,culturation and identification of human umbilical cord blood progenitor cells

    Corresponding author: XIANG Ping, 教授.byxiangping@163.com
  • CLC number: R329.28

  • 摘要: 目的:分离、培养、鉴定人脐带血内皮祖细胞(EPCs),为获取大量血管内皮祖细胞提供方法。方法:脐带血采集后,采用6%羟乙基淀粉沉降法和密度梯度离心法获取脐带血单核细胞,再将单核细胞接种于铺设有纤维连接蛋白的培养瓶中,经过体外诱导、培养、分化,完成传代扩增;通过免疫组织化学、免疫荧光染色、流式细胞术对细胞进行鉴定。结果:细胞培养第5天呈现集落样生长,单个细胞呈圆形或梭形,2周后细胞长满瓶底,呈鹅卵石样外观。免疫组织化学检测显示,CD31兔抗人单克隆抗体阳性率91.5%,Anti-Von Willebrand factor antibody(vWF)相关抗原兔抗人单克隆抗体的阳性表达率为72.4%;细胞免疫荧光染色检测显示,吞噬Dil标记的乙酰低密度脂蛋白(+),发出红色荧光;结合FITC标记的荆豆凝集素Ⅰ(+),发出绿色荧光;双染(+),呈黄色荧光。流式细胞术检测CD34阳性率93%,血管内皮细胞生长因子受体2阳性率88.5%,CD133阳性率84.8%。结论:从脐带血中可获取大量CD34+、VEGFR-2+及CD133+血管内皮祖细胞。
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出版历程
  • 收稿日期:  2015-12-16

人脐带血内皮祖细胞的分离、培养与鉴定

    通讯作者: 项平, 教授.byxiangping@163.com
    作者简介: 赵梦蝶(1990-),女,硕士研究生.
  • 1. 蚌埠医学院第一附属医院 肿瘤放疗科, 233004;
  • 2. 蚌埠医学院第一附属医院 中心实验室, 233004
基金项目:  安徽省自然科学基金项目(1308085MH164);蚌埠医学院科研创新计划(Byycx1544)

摘要: 目的:分离、培养、鉴定人脐带血内皮祖细胞(EPCs),为获取大量血管内皮祖细胞提供方法。方法:脐带血采集后,采用6%羟乙基淀粉沉降法和密度梯度离心法获取脐带血单核细胞,再将单核细胞接种于铺设有纤维连接蛋白的培养瓶中,经过体外诱导、培养、分化,完成传代扩增;通过免疫组织化学、免疫荧光染色、流式细胞术对细胞进行鉴定。结果:细胞培养第5天呈现集落样生长,单个细胞呈圆形或梭形,2周后细胞长满瓶底,呈鹅卵石样外观。免疫组织化学检测显示,CD31兔抗人单克隆抗体阳性率91.5%,Anti-Von Willebrand factor antibody(vWF)相关抗原兔抗人单克隆抗体的阳性表达率为72.4%;细胞免疫荧光染色检测显示,吞噬Dil标记的乙酰低密度脂蛋白(+),发出红色荧光;结合FITC标记的荆豆凝集素Ⅰ(+),发出绿色荧光;双染(+),呈黄色荧光。流式细胞术检测CD34阳性率93%,血管内皮细胞生长因子受体2阳性率88.5%,CD133阳性率84.8%。结论:从脐带血中可获取大量CD34+、VEGFR-2+及CD133+血管内皮祖细胞。

English Abstract

参考文献 (25)

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