3-溴丙酮酸对肝癌Bel7402细胞凋亡及相关蛋白表达的影响

潘琼; 任凯; 崇殿龙; 张智瑞; 周灿; 刘浩; 赵素容

doi:10.13898/j.cnki.issn.1000-2200.2016.09.003

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3-溴丙酮酸对肝癌Bel7402细胞凋亡及相关蛋白表达的影响

潘琼 , 任凯 , 崇殿龙 , 张智瑞 , 周灿 , 刘浩 , 赵素容

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3-溴丙酮酸对肝癌Bel7402细胞凋亡及相关蛋白表达的影响

蚌埠医学院药学系, 安徽省生化药物工程技术研究中心, 安徽蚌埠 233030

作者简介: 潘琼(1991-),女,2010级本科生,2015级硕士研究生.

基金项目:
国家自然科学基金项目（81372899）；安徽省高校自然科学研究重大项目（KJ2016A486）；安徽省大学生创新创业训练项目（201510367035）；蚌埠医学院科研基金项目（BYKY1408ZD）
中图分类号: R735.7

Effects of 3-bromopyruvate on apoptosis and the expression of apoptosis-related proteins in liver carcinoma Bel7402 cells

Faculty of Pharmacy, Bengbu Medical College, Anhui Engineering Technology Research Center of Biochemical Pharmaceuticals, Bengbu Anhui 233030, China
CLC number: R735.7

摘要: 目的：观察糖酵解抑制剂3-溴丙酮酸对肝癌Bel7402细胞凋亡的影响，并探讨其作用机制。方法：采用MTT法检测3-溴丙酮酸对Bel7402细胞的增殖抑制效应，PI单染流式细胞术检测不同浓度3-溴丙酮酸（0、50、100、200 μmol/L）对Bel7402细胞凋亡的影响，ATP检测试剂盒分析细胞内ATP水平，Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达。结果：3-溴丙酮酸可浓度和时间依赖性地抑制Bel7402细胞的增殖（P<0.01），作用24、48、72 h的IC₅₀值分别为422.9、143.9、85.0 μmol/L。3-溴丙酮酸可诱导Bel7402细胞发生明显的细胞凋亡，50、100、200 μmol/L 3-溴丙酮酸作用24 h的细胞凋亡率均明显高于对照组（P<0.01）。ATP水平检测结果表明，3-溴丙酮酸可明显降低Bel7402细胞内的ATP水平（P<0.01）。Western blot结果显示，3-溴丙酮酸可下调凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达，并上调凋亡诱导蛋白Bax的表达。结论：3-溴丙酮酸具有诱导肝癌Bel7402细胞凋亡的作用，其机制可能是通过引起细胞内ATP降低、调节细胞凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达。
- 肝脏肿瘤 /
- 3-溴丙酮酸 /
- 细胞凋亡
Abstract: Objective: To investigate the effect of 3-bromopyruvate on the apoptosis of liver carcinoma cells,and its underlying mechanisms.Methods: The proliferative inhibition of Bel7402 cells treated with 3-bromopyruvate was measured by MTT assay.The cells were treated with different concentrations of 3-bromopyruvate(0,50,100,200 μmol/L),and apoptosis was analyzed by flow cytometry with PI staining.The intracellular ATP level was detected by commercial kit.The expression of Bcl-2 and Bax protein was analyzed by Western blot.Results: 3-bromopyruvate inhibited the proliferation of Bel7402 cells in a time and concentration dependent manner,with an IC₅₀ value of 422.9,143.9,85.0 μmol/L at 24,48 and 72 h,respectively.3-Bromopyruvate also induced obvious apoptosis in Bel7402 cells.The apoptotic rate of 50,100,200 μmol/L of 3-bromopyruvate treatment for 24 h was significantly different from that of the control group(P<0.01).At the same time,3-bromopyruvate significantly decreased the intracellular ATP level(P<0.01).The result of Western blot showed that 3-bromopyruvate down-regulated the expression of antiapoptotic protein Bcl-2,and up-regulated the expression of proapoptotic protein Bax in Bel7402 cells.Conclusions: 3-bromopyruvate can induce apoptosis in Bel7402 cells,which may be correlated to the inadequate ATP supply,down-regulation of Bcl-2,and up-regulation of Bax.
- liver neoplasms /
- 3-bromopyruvate /
- apoptosis

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3-溴丙酮酸对肝癌Bel7402细胞凋亡及相关蛋白表达的影响

作者简介: 潘琼(1991-),女,2010级本科生,2015级硕士研究生.

蚌埠医学院药学系, 安徽省生化药物工程技术研究中心, 安徽蚌埠 233030

收稿日期: 2015-08-20

基金项目: 国家自然科学基金项目（81372899）；安徽省高校自然科学研究重大项目（KJ2016A486）；安徽省大学生创新创业训练项目（201510367035）；蚌埠医学院科研基金项目（BYKY1408ZD）

关键词:

摘要: 目的：观察糖酵解抑制剂3-溴丙酮酸对肝癌Bel7402细胞凋亡的影响，并探讨其作用机制。方法：采用MTT法检测3-溴丙酮酸对Bel7402细胞的增殖抑制效应，PI单染流式细胞术检测不同浓度3-溴丙酮酸（0、50、100、200 μmol/L）对Bel7402细胞凋亡的影响，ATP检测试剂盒分析细胞内ATP水平，Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达。结果：3-溴丙酮酸可浓度和时间依赖性地抑制Bel7402细胞的增殖（P<0.01），作用24、48、72 h的IC₅₀值分别为422.9、143.9、85.0 μmol/L。3-溴丙酮酸可诱导Bel7402细胞发生明显的细胞凋亡，50、100、200 μmol/L 3-溴丙酮酸作用24 h的细胞凋亡率均明显高于对照组（P<0.01）。ATP水平检测结果表明，3-溴丙酮酸可明显降低Bel7402细胞内的ATP水平（P<0.01）。Western blot结果显示，3-溴丙酮酸可下调凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达，并上调凋亡诱导蛋白Bax的表达。结论：3-溴丙酮酸具有诱导肝癌Bel7402细胞凋亡的作用，其机制可能是通过引起细胞内ATP降低、调节细胞凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达。