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血清淀粉样蛋白A(serum amyloid A protein，SAA)是一种急性时相蛋白质，是组织淀粉样蛋白A的前体物质。SAA主要有4个基因型，分别表达SAA 1型至4型。人类和小鼠的SAA均由4个外显子和3个内含子组成，分型依据其空间构型和N末端蛋白序列等[1-2]。SAA在感染性疾病[3-4]、肿瘤检测[5]、脑卒中预后[6]、慢阻肺[7]、细胞凋亡[8]等方面均有一定的临床价值，目前SAA检测平台或检测方法有多种，本文着重比较免疫散射比浊法和免疫荧光层析2种测定法之间的异同点，现作报道。
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选择2016年4月至2019年4月安徽省合肥市第三人民医院健康体检者100名(对照组)和住院病人100例(观察组)为研究对象。纳入标准：所选研究对象血清无明显脂血、溶血。排除标准：健康体检者近期无感染等症状。本研究经医院伦理委员会批准同意。
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Astep全自动SAA特定蛋白分析仪采用免疫速率散射比浊法，ABPOCT干式荧光AFS2000A型免疫定量分析仪采用免疫荧光层析法，试剂购自深圳国赛和广州微米生物有限公司。
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将所有研究对象血清均分别在Astep全自动SAA特定蛋白分析仪和ABPOCT干式荧光AFS2000A型免疫定量分析仪进行检测，记录SAA数据。数值分析时，免疫速率散射比浊法小于下限2.5以2.5计，大于上限500的以500计，有数值的以数值计；免疫荧光层析测定法小于下限5以5计，大于上限200的以200计，有数值的以数值计。
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采用t检验和χ2检验。
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观察组血清用2种方法检测的SAA水平均高于对照组(P < 0.01)；观察组免疫速率散射比浊法所测SAA值高于免疫荧光层析测定法(P < 0.01)，而对照组采用两种方法所测SAA值差异无统计学意义(P>0.05)(见表 1)。按厂家说明书所示:免疫速率散射比浊法SAA < 10 mg/L判读正常，≥10 mg/L判读阳性；免疫荧光层析 < 8 mg/L判读正常，≥8 mg/L判读阳性。对所有研究对象的SAA水平进行检测，结果显示，2种方法的敏感度和特异性差异均无统计学意义(P>0.05)(见表 2)。
分组 n 免疫速率散射比浊法 免疫荧光层析测定法 t P 观察组 100 95.31±16.99 63.37±7.85 19.89 < 0.01 对照组 100 5.80±0.87 8.25±1.27 0.62 > 0.05 t — 52.62 69.31 — — P — < 0.01 < 0.01 — — 表 1 两种方法所测SAA水平的比较(x±s；mg/L)
分组 n 敏感度/% 特异度/% 免疫速率散射比浊法 200 53.00 92.00 免疫荧光层析测定法 200 57.00 93.00 χ2 — 0.32 0.07 P — > 0.05 > 0.05 表 2 两种方法检测SAA敏感度及特异度的比较
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免疫荧光层析测定法对健康体检者所测SAA的下限概率为83.00%(83/100)，高于免疫速率散射比浊法的42.00%(42/100)(χ2=35.86，P < 0.01)，免疫荧光层析测定法检测低值时候更稳定。
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SAA主要是炎症发生时白细胞介素-6刺激肝细胞分泌产生，在肝星状细胞纤维化中起到调节作用[9]。研究[10]显示，NF-κB可抑制SAA的活化，与减少早期动脉粥样硬化的形成相关。而SAA能够诱导人羊膜细胞凋亡，同时伴有Caspase-3的活化[11]。在病毒性疾病的检测中，SAA优于C反应蛋白(CRP)，主要因为CRP在病毒感染时不能与暴露的磷脂蛋白质结合，而SAA是一种急性的多肽蛋白，对病毒感染早期较为敏感[12]。在炎症早期SAA指标检测优于CRP和白细胞介素-6指标。研究[13]显示，SAA指标与CD64、降钙素原和CRP均能对疾病诊断有所帮助。SAA蛋白在病毒或细菌感染时均表现灵敏。有研究[14]报道，SAA/CRP对感染性疾病的诊断意义更大。
用于检测临床血清SAA的方法有多种，如放射性免疫测定法、免疫速率散射比浊法、免疫荧光层析法、酶联免疫吸附试验和微球捕获酶免疫法。酶联免疫吸附试验同时可以检测人体中抗SAA和SAA1α抗体[15]。而目前临床上常用的检测方法为免疫速率散射比浊法、免疫荧光层析和免疫速率透射比浊法。每个方法都有自身的参考范围、敏感性和特异性。根据试剂说明书，免疫速率散射比浊法线性范围为2.5~500 mg/L，免疫荧光层析法的线性范围为10~200 mg/L。本研究结果现实，因对照组SAA值总体偏低，2种方法的检测结果无统计学差异；但是对于观察者数值分布范围广时，2种方法的检测结果有明显的统计学差异，免疫速率散射比浊法所测SAA值明显高于免疫荧光层析法。本研究采用免疫速率散射比浊法和免疫荧光层析测定法分别对所有研究对象的SAA水平进行检测，结果显示，免疫速率散射比浊法和免疫荧光层析测定法的敏感性分别为53.00%，57.00%，特异性分别为为92.00%和93.00%。免疫速率散射比浊法敏感性和特异性虽均低于免疫荧光层析，但差异均无统计学意义。在低于下限的检测分析中发现，免疫荧光层析法在检测下限时更稳定，而免疫速率散射比浊法在低于下限值检测中波动较多。可能与免疫速率散射比浊法易受标本的状态、类风湿因子、副蛋白或免疫循环复合物影响有关。
两种检测系统检测血清淀粉样蛋白A的结果比较
Effect comparison of two methods in the detection of serum amyloid A protein
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摘要:
目的比较免疫速率散射比浊法和免疫荧光层析法检测血清淀粉样蛋白A（serum amyloid A protein，SAA）的结果。 方法收集住院病人（观察组）和健康体检者（对照组）血清，均分别采用全自动特定蛋白检测仪（采用免疫速率散射比浊法）和荧光免疫定量分析仪（免疫荧光层析法）检测SAA水平，比较2种检测系统上的分析结果。 结果观察组血清用2种方法检测的SAA水平均高于对照组（P < 0.01）；观察组免疫速率散射比浊法所测SAA值高于免疫荧光层析法（P < 0.01），而对照组采用2种方法所测SAA值差异无统计学意义（P>0.05）。免疫速率散射比浊法和免疫荧光层析法检测的敏感度分别为53.00%和57.00%，特异度分别为92.00%和93.00%，差异均无统计学意义（P>0.05）。荧光免疫层析法对健康体检者所测SAA的下限概率为83.00%（83/100），高于免疫速率散射比浊法的42.00%（42/100）（χ2=35.86，P < 0.01），荧光免疫层析法检测低值时候更稳定。 结论免疫速率散射比浊法和免疫荧光层析均能用于临床检测，后者的稳定性更好。 Abstract:ObjectiveTo compare the effects between immunovelocity nephelometry and immunofluorescence chromatography in the detection of serum amyloid protein A(SAA). MethodsThe serum levels of SAA of inhospital patients(observation group) and healthy physical examinees(control group) were detected using the full-automatic specific protein detector(immunovelocity nephelometry) and fluorescence immunoquantitative analyzer (immunofluorescence chromatography), and the detection results were compared between two methods. ResultsThe serum levels of SAA deetcted by two methods in observation grop were higher than those in control group(P < 0.01).The serum level of SAA in observation group detected by immunovelocity nephelometry was higher than that of immunofluorescence chromatography(P < 0.01), while the difference of the serum level of SAA in control group was not statistically significant between two detection methods(P>0.05).The sensitivities and specificities of immunovelocity nephelometry and immunofluorescence chromatography were 53.00% & 57.00% and 92.00% & 93.00%, respectively, and the differences of those were not statistically significant between two methods(P>0.05).The lower limit probability of SAA detected by fluorescence immunochromatography in control group(83.00%, 83/100) was higher that of immunovelocity nephelometry(42.00%, 42/100) (χ2=35.86, P < 0.01).The fluorescence immunochromatography in the detection of low value was more stable. ConclusionsThe immunovelocity nephelometry and immunofluorescence chromatography can be used for clinical detection, the latter has better stability. -
表 1 两种方法所测SAA水平的比较(x±s；mg/L)
分组 n 免疫速率散射比浊法 免疫荧光层析测定法 t P 观察组 100 95.31±16.99 63.37±7.85 19.89 < 0.01 对照组 100 5.80±0.87 8.25±1.27 0.62 > 0.05 t — 52.62 69.31 — — P — < 0.01 < 0.01 — — 
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表 2 两种方法检测SAA敏感度及特异度的比较
分组 n 敏感度/% 特异度/% 免疫速率散射比浊法 200 53.00 92.00 免疫荧光层析测定法 200 57.00 93.00 χ2 — 0.32 0.07 P — > 0.05 > 0.05
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