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8-isoprostane、SOD、AOA、NF-κB及iNOS在复发性流产病人中的表达研究

汪莉 石慧芬 江海英 刘金霞 陈茵

引用本文:
Citation:

8-isoprostane、SOD、AOA、NF-κB及iNOS在复发性流产病人中的表达研究

    作者简介: 汪莉(1982-), 女, 主治医师.
  • 基金项目:

    广东省佛山市科技创新项目 2017AB000102

  • 中图分类号: R714.21

Study on the expression levels of 8-isoprostane, SOD, AOA, NF-κB and iNOS in patients with recurrent spontaneous abortion

  • CLC number: R714.21

  • 摘要: 目的分析8-异构前列腺素(8-isoprostane)、超氧化物歧化酶(SOD)、血浆总抗氧化能力(AOA)、转录因子-κB(NF-κB)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在复发性流产病人中的表达及影响,以探讨不明原因复发性流产发病机制。方法选取2018年1月至2019年10月119例产妇作为研究对象,分为不明原因复发性流产病人60例作为研究对象(病例组),进行正常妊娠分娩妇女作为参照对象59例(对照组),比较2组病人血液和绒毛蜕膜组织中的8-isoprostane、SOD、AOA等氧化应激指标及NF-κB、iNOS水平。结果2组病人血液中AOA水平差异无统计学意义(P>0.05),病例组病人血液中8-isoprostane、NF-κB和iNOS水平均高于对照组(P < 0.01),SOD水平明显低于对照组(P < 0.01);2组病人绒毛蜕膜组织中AOA水平差异无统计学意义(P>0.05),病例组绒毛蜕膜组织中8-isoprostane、NF-κB和iNOS水平均高于对照组(P < 0.01),SOD水平明显低于对照组(P < 0.01)。结论不明原因复发性流产病人血液和绒毛蜕膜组织中的8-isoprostane、SOD、NF-κB和iNOS表达与正常妊娠妇女具有明显差异,因此,其可作为预测不明原因复发性流产发生的重要因子。
  • 表 1  2组病人一般资料比较(x±s)

    分组 n 年龄/岁 体质量指数/(kg/m2)
    对照组 59 28.6±2.1 29.6±2.7
    病例组 60 28.4±2.3 29.8±2.4
    t 0.50 0.43
    P >0.05 >0.05
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    表 2  2组血液中8-isoprostane、SOD、AOA、NF-kB和iNOS水平比较(x±s)

    分组 n 8-isoprostane/(ng/L) SOD/(μU/L) AOA/mmHg NF-κB/(μU/L) iNOS/(U/mL)
    对照组 59 62.4±6.2 24.6±3.5 21.4±3.3 5.6±1.2 6.2±1.0
    病例组 60 83.2±8.1 18.5±3.3 20.9±3.4 8.8±1.6 9.5±1.3
    t 15.75* 9.78 0.81 12.36* 15.54*
    P < 0.01 < 0.01 >0.05 < 0.01 < 0.01
      *示t′值
    下载: 导出CSV

    表 3  2组绒毛蜕膜组织中8-isoprostane、SOD、AOA、NF-κB和iNOS水平比较(x±s)

    分组 n 8-isoprostane/(ng/L) SOD/(μU/L) AOA/mmHg NF-κB/(μU/L) iNOS/(U/mL)
    对照组 59 60.6±6.1 23.5±3.6 20.8±3.3 5.7±1.3 6.2±1.1
    病例组 60 82.7±8.2 19.0±3.2 21.0±3.2 8.9±1.4 9.6±1.2
    t 16.70* 7.21 0.34 12.92 16.10
    P <0.01 < 0.01 >0.05 <0.01 <0.01
      *示t′值
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出版历程
  • 收稿日期:  2019-12-30
  • 录用日期:  2020-10-30
  • 刊出日期:  2020-11-15

8-isoprostane、SOD、AOA、NF-κB及iNOS在复发性流产病人中的表达研究

    作者简介: 汪莉(1982-), 女, 主治医师
  • 广东省人民医院南海医院(佛山市南海区第二人民医院)妇科, 528251
基金项目:  广东省佛山市科技创新项目 2017AB000102

摘要: 目的分析8-异构前列腺素(8-isoprostane)、超氧化物歧化酶(SOD)、血浆总抗氧化能力(AOA)、转录因子-κB(NF-κB)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在复发性流产病人中的表达及影响,以探讨不明原因复发性流产发病机制。方法选取2018年1月至2019年10月119例产妇作为研究对象,分为不明原因复发性流产病人60例作为研究对象(病例组),进行正常妊娠分娩妇女作为参照对象59例(对照组),比较2组病人血液和绒毛蜕膜组织中的8-isoprostane、SOD、AOA等氧化应激指标及NF-κB、iNOS水平。结果2组病人血液中AOA水平差异无统计学意义(P>0.05),病例组病人血液中8-isoprostane、NF-κB和iNOS水平均高于对照组(P < 0.01),SOD水平明显低于对照组(P < 0.01);2组病人绒毛蜕膜组织中AOA水平差异无统计学意义(P>0.05),病例组绒毛蜕膜组织中8-isoprostane、NF-κB和iNOS水平均高于对照组(P < 0.01),SOD水平明显低于对照组(P < 0.01)。结论不明原因复发性流产病人血液和绒毛蜕膜组织中的8-isoprostane、SOD、NF-κB和iNOS表达与正常妊娠妇女具有明显差异,因此,其可作为预测不明原因复发性流产发生的重要因子。

English Abstract

  • 复发性流产(recurrent spontaneous abortion, RSA)指的是连续发生2次或2次以上的自然流产, 其也是临床最常见的病理妊娠疾病,可对病人身心和生育健康造成巨大的危害[1]。关于该疾病的发病机制临床尚无明确定论,但有研究[2-4]表明,RSA中能够识别病人病因的仅占1/2,主要包含母体生殖道异常、免疫功能异常、内分泌异常、染色体异常、生殖道感染及子宫解剖因素等。但仍有1/2病人发病原因不明。因此,本研究分析8-异构前列腺素(8-isoprostane)、超氧化物歧化酶(SOD)、血浆总抗氧化能力(AOA)、转录因子-κB(NF-κB)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在RSA中表达及影响,以探究不明原因RSA发病的相关机制, 以期能为该疾病预防和治疗提供有效的参考。现作报道。

    • 选择我院2018年6月至2019年10月收治的119例不明原因RSA病人作为研究对象,分为不明原因RSA病人60例作为研究对象(病例组),进行正常妊娠分娩妇女59例作为参照对象(对照组),病例组纳入标准:(1)连续发生早期自然流产3~10次者;(2)女方生殖道未出现器质性改变者;(3)生殖道内分泌正常者;(4)无生殖道感染者;(5)抗子宫内膜抗体、抗心磷脂抗体等呈阴性者;(6)夫妻双方染色体正常者;(7)病人及家属对该项研究均知情同意,且签署知情同意书。排除标准:(1)合并存在心、肝、肾功能障碍者;(2)合并存在其他可能影响本研究结果的疾病者。对照组纳入标准:(1)正常早孕孕妇;(2)病人及家属对该项研究均知情同意,且签署知情同意书。排除标准:(1)合并存在心、肝、肾功能障碍者;(2)合并存在其他可能影响本研究结果的疾病者。2组病人的年龄与体质量指数差异均无统计学意义(P>0.05)(见表 1),具有可比性。

      分组 n 年龄/岁 体质量指数/(kg/m2)
      对照组 59 28.6±2.1 29.6±2.7
      病例组 60 28.4±2.3 29.8±2.4
      t 0.50 0.43
      P >0.05 >0.05

      表 1  2组病人一般资料比较(x±s)

    • 血液指标检测:对照组在分娩20 min内,病例组在流产后20 min内抽取病人10mL静脉血,采用3 000 r/min离心10 min后,留取血清保存于-60 ℃冰箱中待检,采用双抗体夹心法检测8-isoprostane水平,采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测SOD、AOA水平和NF-κB、iNOS含量。

      绒毛蜕膜组织相关指标检测:收集对照组分娩后和病例组流产后的蜕膜组织,采用0.9%氯化钠溶液反复冲洗,漂洗干净后,在4 ℃环境中采用10%甲醛将绒毛蜕膜组织固定24 h,使其使其脱水干净,再采用石蜡将其制成包块,并制备厚度为4μm左右的石蜡切片,然后对切片标本采用免疫组织化学SP法进行染色,最后,采用ELISA法对各组绒毛蜕膜组织中的8-isoprostane、SOD、AOA水平和NF-κB、iNOS含量进行检测[5]

    • 比较2组病人血液和绒毛蜕膜组织中的8-isoprostane、SOD、AOA等氧化应激指标及NF-κB、iNOS水平。

    • 采用t(或t′)检验。

    • 2组病人血液中AOA水平差异无统计学意义(P>0.05),不明原因RSA病人血液中8-isoprostane、NF-κB和iNOS水平均高于正常妊娠妇女(P < 0.01),血液中SOD水平低于正常妊娠妇女(P < 0.01)(见表 2)。

      分组 n 8-isoprostane/(ng/L) SOD/(μU/L) AOA/mmHg NF-κB/(μU/L) iNOS/(U/mL)
      对照组 59 62.4±6.2 24.6±3.5 21.4±3.3 5.6±1.2 6.2±1.0
      病例组 60 83.2±8.1 18.5±3.3 20.9±3.4 8.8±1.6 9.5±1.3
      t 15.75* 9.78 0.81 12.36* 15.54*
      P < 0.01 < 0.01 >0.05 < 0.01 < 0.01
        *示t′值

      表 2  2组血液中8-isoprostane、SOD、AOA、NF-kB和iNOS水平比较(x±s)

    • 2组病人绒毛蜕膜组织中AOA水平差异无统计学意义(P>0.05),不明原因RSA病人绒毛蜕膜组织中8-isoprostane、NF-κB和iNOS水平均明显高于正常妊娠妇女(P < 0.01),SOD水平明显低于正常妊娠妇女(P < 0.01)(见表 3)。

      分组 n 8-isoprostane/(ng/L) SOD/(μU/L) AOA/mmHg NF-κB/(μU/L) iNOS/(U/mL)
      对照组 59 60.6±6.1 23.5±3.6 20.8±3.3 5.7±1.3 6.2±1.1
      病例组 60 82.7±8.2 19.0±3.2 21.0±3.2 8.9±1.4 9.6±1.2
      t 16.70* 7.21 0.34 12.92 16.10
      P <0.01 < 0.01 >0.05 <0.01 <0.01
        *示t′值

      表 3  2组绒毛蜕膜组织中8-isoprostane、SOD、AOA、NF-κB和iNOS水平比较(x±s)

    • 近年来,我国RSA发病率呈明显的上升趋势,该疾病不仅会引发孕妇病人出现连续自然流产现象,同时还会引发其停经后出现阴道出血、腹痛等症状,从而对病人身心和生育健康造成严重的影响[6]。要预防RSA的发生和采取有效的方案对病人进行治疗,就需对其致病原因进行明确[7]。然而,临床研究表明,导致RSA的致病因素十分复杂,RSA中能够识别病人病因的仅占1/2,主要包含母体生殖道异常(如母体子宫畸形、子宫肌瘤、宫颈机能不全或存在Asherman综合征等)、免疫功能异常(主要包含自身免疫和同种免疫)、内分泌异常(包含黄体功能不全、高泌乳素血症、多囊卵巢综合征、糖尿病、甲状腺疾病等)、染色体异常(包含胚胎染色体异常和罗伯逊易位、平衡易位等夫妻染色体异常)、生殖道感染(多指由解脲支原体、沙眼衣原体感染引起的宫颈炎或子宫内膜炎)等,但仍有1/2病人发病原因不明[8-9]

      文献研究[10]表明,不明原因自然流产发生和孕妇机体内的氧化应激反应密切相关。氧化应激指的是体内氧化和抗氧化作用失衡,倾向于氧化作用,并产生大量氧化中间物[11]。并且,我国已有不少研究[12-13]证实,氧化应激参与了血管内皮损伤,而血管形成是决定胚胎着床与否、良好供血与否以及孕妇病人妊娠成功与否的关键。若孕妇病人早期发生了氧化应激,可引发其血管内皮细胞受损和引发其机体出现炎性反应,这样便会增加其机体炎性反应介质释放和激活中性粒细胞,产生大量氧化自由基,从而易导致氧自由基聚集和细胞壁浸润,最终促进动脉粥样硬化斑块的形成,而大量中性粒细胞被激活又可导致氧化自由基剧增,从而进一步加重孕妇病人机体的氧化应激反应,进而会降低孕妇妊娠过程中抗氧化系统功能,使其发生自然流产[14-15]。人体氧化应激反应包含8-isoprostane、SOD、AOA等多项氧化应激指标。本研究中,分别对60例不明原因RSA病人及59例正常妊娠妇女行血液和绒毛蜕膜组织中8-isoprostane、SOD、AOA等氧化应激指标及NF-κB、iNOS水平检测,结果显示,2组病人血液和绒毛蜕膜组织中AOA水平对比无显著差异,不明原因RSA病人血液中8-isoprostane、NF-κB和iNOS水平显著高于正常妊娠妇女,不明原因RSA病人血液中SOD水平显著低于正常妊娠妇女,不明原因RSA病人绒毛蜕膜组织中8-isoprostane、NF-κB和iNOS水平显著高于正常妊娠妇女,不明原因RSA病人血液中SOD水平显著低于正常妊娠妇女,说明不明原因RSA病人与正常妊娠妇女血液和绒毛蜕膜组织中的8-isoprostane、SOD、NF-κB和iNOS表达存在显著差异,提示这些指标可能是引发不明原因RSA发生的危险因素。

      在上述影响指标中,8-isoprostane过度表达可抑制Th2细胞分泌和促进T淋巴细胞增殖,并促使Th细胞转化为Th1细胞,从而会导致母胎界面细胞因子网络失衡,引发胚胎植入失败,进而会引发孕妇病人出现非正常流产[16-18]。另外,临床研究[19-20]表明,孕妇妊娠时,其机体SOD水平升高能维持氧化和抗氧化平衡,若SOD水平降低则会导致氧化和抗氧化失衡,从而易导致孕妇难以维持正常妊娠而发生自然流产。NF-κB可参与胚胎早期发育和调节胚胎着床过程,若母胎界面NF-κB表达过度,则易诱发其下游的IFN-γ及TNF-α过度表达,从而易诱发病人发生自然流产。iNOS与孕妇病人机体免疫调节具有直接影响关系,一般情况下,iNOS基因不表达,只在多种细胞因子和内毒素刺激下,才可发生翻译、转录和表达。若其正常表达可发挥有效的免疫功能调节作用,而在妊娠免疫耐受中免疫调节作用能促进孕妇机体Th1/Th动态平衡得到有效维持,从而能维持其正常妊娠,若iNOS基因表达不正常,则会导致Th1/Th失衡,从而难以维持母胎微环境稳定,进而易引发其发生自然流产。

      综上所述,不明原因RSA病人血液和绒毛蜕膜组织中的8-isoprostane、SOD、NF-κB和iNOS表达与正常妊娠妇女具有明显差异,因此,其可作为预测不明原因RSA发生的重要因子。

参考文献 (20)

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