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随着我国妇女孕期保健规范化，越来越多的卵巢肿瘤在产科检查中被发现，由于妊娠期的特殊性，妊娠合并卵巢癌的诊疗需要综合考虑孕周、母体、胎儿、肿瘤类型、分期等多方面情况，诊断及治疗难度明显提高[1-2]。目前，血清肿瘤标志物在恶性肿瘤诊断中展现出良好前景[3-4]。糖类抗原724(carbohydrate antigen 724，CA724)是一种广谱肿瘤标志物，被证实在卵巢癌、结直肠癌等病人血清中呈高表达状态，对肿瘤的诊断具有较高敏感性[5-6]。人附睾分泌蛋白4(human epididymis protein 4，HE4)同样在卵巢癌病人体内呈现较高表达，有研究[7-8]证实其诊断卵巢癌的特异性高达95%。基于此，本研究探讨血清CA724、HE4检测对妊娠合并卵巢癌病人诊断价值，并分析其与超声造影参数的相关性，旨在为临床诊断、治疗妊娠合并卵巢癌提供依据。现作报道。
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选取2018年1月至2020年5月唐山市人民医院妊娠合并卵巢癌病人68例作为观察组，年龄25~38岁，体质量指数(BMI)20.5~26.3 kg/m2；同期选取正常妊娠孕妇200名作为对照组，年龄22~37岁，BMI 20.7~26.8 kg/m2。2组年龄、经产情况、BMI、孕期、户籍地差异均无统计学意义(P > 0.05)(见表 1)，具有可比性。
分组 n 年龄/岁 经产情况 BMI/(kg/m2) 孕期 户籍地 初产妇 经产妇 早期 中期 晚期 城镇 农村 观察组 68 33.49±3.24 21(30.88) 47(69.12) 23.61±1.34 19(27.94) 15(22.06) 34(50.00) 40(58.82) 28(41.18) 对照组 200 32.66±3.16 66(33.00) 134(67.00) 23.84±1.45 54(27.00) 51(25.50) 95(47.50) 104(52.00) 96(48.00) χ2 — 1.86* 0.10 1.15* 0.16 0.95 P — > 0.05 > 0.05 > 0.05 > 0.05 > 0.05 *示t值 表 1 2组一般资料比较[n；百分率(%)]
(1) 观察组纳入标准：①自然受孕；②妊娠期首次检出卵巢癌，符合卵巢癌诊断标准[9]；③认知功能良好，无沟通交流障碍；④病人及家属知晓本研究，已签署同意书。(2)对照组纳入标准：①自然受孕；②无妊娠期合并症；③认知功能良好，无沟通交流障碍；④孕妇及家属知晓本研究，已签署同意书。
排除标准：(1)合并其他恶性肿瘤者；(2)人工受孕者；(3)血液系统疾病病人；(4)心脑血管疾病病人；(5)肺肝肾等脏器功能不全者；(6)传染性疾病病人；(7)严重感染性疾病病人；(8)自身免疫性疾病病人。
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血清指标检测：入组当天，采集所有研究对象空腹静脉血5 mL，以3 000 r/min转速、8 cm半径离心处理10 min，取血清置于-80 ℃冷藏室保存。选用罗氏Cobase 602型电化学发光分析仪(德国)及配套罗氏诊断公司试剂盒、校准品、质控品，采用电化学发光法检测血清CA724、HE4水平，采用抗体夹心法检测。操作严格按照试剂盒说明书完成。
超声检查：观察组病人均于妊娠终止后1周内行超声造影检查，采用美国GELOGIQ E9型彩色多普勒超声诊断系统，探头频率6.0~7.5 MHz，嘱咐病人适度充盈膀胱，检查时病人取截石位，探头常规套安全套、涂抹耦合剂，置入病人阴道内，紧贴阴道穹隆扫描，首先采用二维超声进行常规检查，探测卵巢位置、大小、形态、回声等情况，完成后切换至CDFI模式，将Sono Vue超声造影剂经肘正中静脉快速团注至受检者体内，实时动态观察卵巢肿瘤内造影剂的灌注情况，储存动态图像，获取时间-强度曲线，计算达峰时间(time to peak，TTP)、增强强度(enhanced intensity，EI)。
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比较2组CA724、HE4水平；比较观察组不同临床病理特征病人血清CA724、HE4及妊娠终止后超声造影参数，临床病理特征包括年龄、孕期、病理类型、FIGO分期、分化程度、浸润深度，其中病理类型、FIGO分期、分化程度、浸润深度均参照相关指南[10]进行判定。
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采用χ2检验、t检验、Ridit检验、方差分析、q检验、Spearman相关分析、受试者工作特征(ROC)曲线分析和De Long检验。
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观察组血清CA724、HE4水平均明显高于对照组(P < 0.01)(见表 2)。
分组 n CA724/(U/mL) HE4/(pmol/L) 观察组 68 35.74±10.37 282.59±92.06 对照组 200 7.26±2.05 43.08±14.22 t — 36.90 35.69 P — < 0.01 < 0.01 表 2 2组血清CA724、HE4水平比较(x±s)
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绘制血清CA724、HE4诊断妊娠合并卵巢癌的ROC曲线，结果显示，二者联合诊断的AUC最大，为0.940，最佳诊断敏感度、特异度分别为88.24%、92.00%(P < 0.01)(见图 1、表 3)。
图 1 血清CA724、HE4诊断妊娠合并卵巢癌的ROC曲线
指标 AUC 95%CI Z P 截断值 敏感度/% 特异度/% CA724 0.838 0.777~0.899 10.90 < 0.01 > 20.96 U/mL 69.12 84.00 HE4 0.876 0.820~0.932 13.13 < 0.01 > 175.20 pmol/L 77.94 88.00 联合 0.940 0.897~0.983 20.04 < 0.01 - 88.24 92.00 表 3 血清CA724、HE4对妊娠合并卵巢癌诊断价值
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不同年龄、孕期、病理类型观察组病人的CA724、HE4、EI、TTP差异均无统计学意义(P > 0.05)，不同FIGO分期、分化程度、浸润深度病人CA724、HE4、EI、TTP差异均有统计学意义(P < 0.05~P < 0.01)(见表 4)。
特征 n CA724/(U/mL) HE4/(pmol/L) EI/dB TTP/s 年龄/岁 ≥35 26 34.92±6.22 278.71±78.40 28.54±5.10 26.32±6.41 < 35 42 36.25±7.10 284.99±90.23 28.82±5.27 25.98±6.08 t — 0.79 0.29 0.22 0.22 P — > 0.05 > 0.05 > 0.05 > 0.05 孕期 早期 19 34.96±6.81 276.53±72.59 28.28±6.02 26.11±5.92 中期 15 35.49±7.43 283.21±83.64 28.64±5.49 26.47±6.37 晚期 34 36.29±8.06 285.70±92.41 28.98±5.83 26.02±5.74 F — 0.20 0.07 0.09 0.03 P — > 0.05 > 0.05 > 0.05 > 0.05 MS组内 — 57.714 7 301.442 33.783 35.172 病理类型 交界性肿瘤 33 35.61±7.04 283.45±90.06 28.65±5.81 26.08±5.96 上皮性细胞瘤 20 36.10±6.88 280.73±85.27 28.84±6.14 26.34±6.49 无性细胞瘤 15 35.55±7.31 283.18±91.90 28.67±5.52 25.87±6.11 F — 0.04 0.01 0.01 0.03 P — > 0.05 > 0.05 > 0.05 > 0.05 MS组内 — 49.745 7 937.427 34.201 37.840 FIGO分期 Ⅰ~Ⅱ期 55 30.41±8.56 220.69±71.36 25.71±6.13 28.72±5.74 Ⅲ~Ⅳ期 13 58.29±14.20 544.47±124.59 41.40±10.07 15.07±3.62 t — 9.20 12.56 7.26 8.17 P — < 0.01 < 0.01 < 0.01 < 0.01 分化程度 高分化 27 18.27±5.12 128.46±41.15 24.14±4.35 32.17±7.59 中分化 25 35.79±9.22 296.53±98.22 28.79±6.07 25.53±7.15 低分化 16 65.14±15.74 520.90±103.47 36.30±8.11 16.79±6.61 F — 111.41 115.87 3.86 22.98 P — < 0.01 < 0.01 < 0.05 < 0.01 MS组内 — 99.046 6 709.985 36.351 52.002 浸润深度 < 1/2肌层 44 31.42±9.38 196.52±57.40 23.17±4.29 30.02±8.24 ≥1/2肌层 24 43.66±11.47 440.39±95.58 38.87±8.55 18.94±5.73 t — 4.75 13.16 10.11 5.85 P — < 0.01 < 0.01 < 0.01 < 0.01 表 4 观察组不同临床特征病人血清CA724、HE4及妊娠终止后超声造影参数比较(x±s)
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观察组病人血清CA724、HE4水平与EI均呈正相关关系(r=0.938、0.883，P < 0.05)，与TTP均呈负相关关系(r=-0.849、-0.816，P < 0.05)(见图 2)。
图 2 血清CA724、HE4与超声造影参数的相关性
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观察组病人CA724、HE4、EI与FIGO分期、浸润深度均呈明显正相关关系(P < 0.01)，与分化程度均呈明显负相关关系(P < 0.01)；TTP与FIGO分期、浸润深度均呈明显负相关关系(P < 0.01)，与分化程度呈明显正相关关系(P < 0.01)(见表 5)。
项目 CA724 HE4 EI TTP FIGO分期 0.702** 0.726** 0.673** -0.805** 浸润深度 0.625** 0.667** 0.606** -0.741** 分化程度 -0.753** -0.711** -0.698** 0.673** **P < 0.01 表 5 血清CA724、HE4、超声造影参数与妊娠合并卵巢癌临床病理特征关联性(r)
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卵巢肿瘤为妇科常见疾病之一，资料显示，妊娠期卵巢肿瘤的发生率为0.3%~5.4%，其中绝大多数病人为卵巢良性肿瘤，但也有少数病人为卵巢癌，其发病率为0.075%~0.110%[11-13]。近年，随着女性生育年龄的推迟和肿瘤发病的年轻化，妊娠合并卵巢癌的发病率逐年升高[14-15]。妊娠合并卵巢癌病人早期多无明显症状，同时妊娠期特有的生理变化，可掩盖卵巢癌部分特征，导致诊断延误，多数病人确诊时间多为孕中、晚期或产后[16]。积极探寻妊娠合并卵巢癌早期诊断的敏感性、特异性指标，对疾病的早期检出和治疗具有重要意义。
本研究发现，妊娠合并卵巢癌病人的血清CA724、HE4水平均明显高于正常妊娠孕妇，提示血清CA724、HE4可能参与卵巢癌的发生。CA724是一种糖蛋白抗原，目前多用于卵巢癌及胃癌诊断和预后监测[17-18]。国外研究[19]发现，64%的进展期卵巢癌病人伴有CA724高表达。胡薇等[20]研究发现，CA724诊断卵巢癌AUC为0.845，诊断敏感度、特异度均达到70%以上，具有较高诊断效能。HE4是一种Whey酸性蛋白家族分泌蛋白，在正常人血清中无明显变化，但在卵巢子宫内膜样癌、浆液性卵巢癌及子宫内膜癌病人血清中明显升高，被认为是卵巢癌的肿瘤标志物[21]。高全霞等[22]研究证实，HE4在卵巢癌诊断方面具有较高的敏感度和特异度，是早期筛查卵巢癌最具潜力的标志物。但目前血清CA724、HE4在妊娠合并卵巢癌诊断方面的价值尚无研究报道。本研究中，ROC曲线分析发现血清CA724、HE4及二者联合检测诊断妊娠合并卵巢癌的AUC均在0.83以上，具有良好诊断效能，尤其是二者联合诊断的AUC高达0.940，诊断敏感度为88.24%，特异度提高至92.00%，可为妊娠合并卵巢癌的早期诊断提供更准确的数据支持。
超声造影是评价卵巢癌恶性程度的重要方法，该技术将超声与造影技术相结合，利用造影微泡在血流中强散射作用，可清晰显示肿瘤内较深部位肿瘤内血流的特征，且能良好显示微小血管和低速血流，能更准确地评价肿瘤的血流灌注情况[23-24]。新近研究[25]指出，超声造影可量化评价肿瘤内血管的丰富程度及灌注模式，准确辨别病灶与周围组织间的细微差别，同时能减少主观因素对诊断结果的影响，在恶性肿瘤诊断方面具有较高应用价值。本研究结果显示，观察组病人血清CA724、HE4与EI呈正相关关系，与TTP呈负相关关系。EI、TTP是超声造影检查的主要参数，卵巢癌病灶组织内新生血管数量较多，且分布密集，导致肿瘤组织内血流阻力降低、流速进一步增大，超声造影特征为EI升高、TTP降低[26-27]。由此可见，血清CA724、HE4水平与妊娠合并卵巢癌病人超声造影参数存在密切关系，可在一定程度上反映肿瘤组织内血流灌注情况。且本研究结果显示，观察组病人血清CA724、HE4、EI、TTP与FIGO分期、浸润深度、分化程度均存在相关性。提示早期行超声造影检查和检测血清CA724、HE4水平可辅助临床评估妊娠合并卵巢癌恶性生物学行为。
综上，CA724、HE4在妊娠合并卵巢癌病人血清中呈明显高表达状态，早期明确二者表达水平可辅助临床诊断妊娠合并卵巢癌，且各指标水平可在一定程度上反映肿瘤组织内血流灌注情况，与卵巢癌分期、浸润深度及分化程度密切相关，具有较高应用价值。本研究仍存在一定不足，如未探究终止妊娠前后各指标的变化对肿瘤生物学行为的影响，有待后续研究中进一步探讨。
CA724、HE4检测对妊娠合并卵巢癌病人诊断价值及其与超声造影参数相关性
Diagnostic value of the serum detection of CA724 and HE4 in pregnant patients with ovarian cancer and its correlation with ultrasound contrast parameters
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摘要:
目的探讨血清糖类抗原724(CA724)、人附睾分泌蛋白4(HE4)检测对妊娠合并卵巢癌病人诊断价值及与超声造影参数相关性。 方法选取妊娠合并卵巢癌病人68例作为观察组，正常妊娠孕妇200名作为对照组。比较2组血清CA724、HE4水平，分析CA724、HE4对妊娠合并卵巢癌的诊断价值，并分析观察组不同病理特征病人CA724、HE4与妊娠终止后超声造影参数[达峰时间(TTP)、增强强度(EI)]相关性。 结果观察组血清CA724、HE4均明显高于对照组(P < 0.01)。CA724、HE4联合诊断妊娠合并卵巢癌的ROC曲线下面积为0.940，敏感度、特异度分别为88.24%、92.00%。观察组不同FIGO分期、分化程度、浸润深度病人的CA724、HE4、EI、TTP差异均有统计学意义(P < 0.05~P < 0.01)。观察组病人血清CA724、HE4水平与EI、FIGO分期、浸润深度均呈正相关关系(P < 0.05~P < 0.01)，与TTP、分化程度均呈负相关关系(P < 0.05)。 结论妊娠合并卵巢癌病人的血清CA724、HE4水平明显升高，可辅助临床诊断妊娠合并卵巢癌，且与妊娠终止后超声造影参数、卵巢癌分期、浸润深度及分化程度均密切相关。 Abstract:ObjectiveTo explore the value of serum carbohydrate antigen 724(CA724) and human epididymis protein 4(HE4) in the diagnosis of pregnant women with ovarian cancer, and their correlation with ultrasound contrast parameters. MethodsSixty-eight pregnant women with ovarian cancer and 200 normal pregnant women were divided into the observation group and control group, respectively.The serum levels of CA724 and HE4 in two groups were detected, and the relationship between the above indicators and ovarian cancer in pregnant patients were analyzed. The correlation between CA724, HE4 and contrast-enhanced ultrasound parameters[time to peak(TTP) and enhanced intensity(EI)] after termination of pregnancy in the observation group with different pathological characteristics were analyzed. ResultsThe serum levels of CA724 and HE4 in observation were higher than those in control group(P < 0.01). The serum CA724 and HE4 were positively correlated with ovarian cancer in pregnancy(P < 0.05). The area under the curve(AUC) of the combined diagnosis of serum CA724 and HE4 in pregnancy with ovarian cancer was 0.940, and the diagnostic sensitivity and specificity of the combined detection of CA724 and HE4 were 88.24% and 92.00%, respectively. The differences of the levels of CA724, HE4, EI and TTP among the observation group with different FIGO stages, degree of differentiation and depth of invasion were statistically significant(P < 0.05 to P < 0.01). The serum CA724 and HE4 levels in observation group were positively correlated with EI, FIGO stage and invasion depth(P < 0.05 to P < 0.01), and negatively correlated with TTP and differentiation degree(P < 0.05 to P < 0.01). ConclusionsThe serum CA724 and HE4 levels increase significantly in pregnant patients with ovarian cancer, which can help the clinical diagnosis of pregnancy with ovarian cancer, and is closely related to the parameters of ultrasound contrast after pregnancy termination, ovarian cancer stage, depth of invasion and differentiation degree. -
Key words:
- ovarian neoplasms /
- pregnancy /
- carbohydrate antigen 724 /
- human epididymis protein 4 /
- ultrasound
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表 1 2组一般资料比较[n；百分率(%)]
分组 n 年龄/岁 经产情况 BMI/(kg/m2) 孕期 户籍地 初产妇 经产妇 早期 中期 晚期 城镇 农村 观察组 68 33.49±3.24 21(30.88) 47(69.12) 23.61±1.34 19(27.94) 15(22.06) 34(50.00) 40(58.82) 28(41.18) 对照组 200 32.66±3.16 66(33.00) 134(67.00) 23.84±1.45 54(27.00) 51(25.50) 95(47.50) 104(52.00) 96(48.00) χ2 — 1.86* 0.10 1.15* 0.16 0.95 P — > 0.05 > 0.05 > 0.05 > 0.05 > 0.05 *示t值 
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表 2 2组血清CA724、HE4水平比较(x±s)
分组 n CA724/(U/mL) HE4/(pmol/L) 观察组 68 35.74±10.37 282.59±92.06 对照组 200 7.26±2.05 43.08±14.22 t — 36.90 35.69 P — < 0.01 < 0.01
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表 3 血清CA724、HE4对妊娠合并卵巢癌诊断价值
指标 AUC 95%CI Z P 截断值 敏感度/% 特异度/% CA724 0.838 0.777~0.899 10.90 < 0.01 > 20.96 U/mL 69.12 84.00 HE4 0.876 0.820~0.932 13.13 < 0.01 > 175.20 pmol/L 77.94 88.00 联合 0.940 0.897~0.983 20.04 < 0.01 - 88.24 92.00
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表 4 观察组不同临床特征病人血清CA724、HE4及妊娠终止后超声造影参数比较(x±s)
特征 n CA724/(U/mL) HE4/(pmol/L) EI/dB TTP/s 年龄/岁 ≥35 26 34.92±6.22 278.71±78.40 28.54±5.10 26.32±6.41 < 35 42 36.25±7.10 284.99±90.23 28.82±5.27 25.98±6.08 t — 0.79 0.29 0.22 0.22 P — > 0.05 > 0.05 > 0.05 > 0.05 孕期 早期 19 34.96±6.81 276.53±72.59 28.28±6.02 26.11±5.92 中期 15 35.49±7.43 283.21±83.64 28.64±5.49 26.47±6.37 晚期 34 36.29±8.06 285.70±92.41 28.98±5.83 26.02±5.74 F — 0.20 0.07 0.09 0.03 P — > 0.05 > 0.05 > 0.05 > 0.05 MS组内 — 57.714 7 301.442 33.783 35.172 病理类型 交界性肿瘤 33 35.61±7.04 283.45±90.06 28.65±5.81 26.08±5.96 上皮性细胞瘤 20 36.10±6.88 280.73±85.27 28.84±6.14 26.34±6.49 无性细胞瘤 15 35.55±7.31 283.18±91.90 28.67±5.52 25.87±6.11 F — 0.04 0.01 0.01 0.03 P — > 0.05 > 0.05 > 0.05 > 0.05 MS组内 — 49.745 7 937.427 34.201 37.840 FIGO分期 Ⅰ~Ⅱ期 55 30.41±8.56 220.69±71.36 25.71±6.13 28.72±5.74 Ⅲ~Ⅳ期 13 58.29±14.20 544.47±124.59 41.40±10.07 15.07±3.62 t — 9.20 12.56 7.26 8.17 P — < 0.01 < 0.01 < 0.01 < 0.01 分化程度 高分化 27 18.27±5.12 128.46±41.15 24.14±4.35 32.17±7.59 中分化 25 35.79±9.22 296.53±98.22 28.79±6.07 25.53±7.15 低分化 16 65.14±15.74 520.90±103.47 36.30±8.11 16.79±6.61 F — 111.41 115.87 3.86 22.98 P — < 0.01 < 0.01 < 0.05 < 0.01 MS组内 — 99.046 6 709.985 36.351 52.002 浸润深度 < 1/2肌层 44 31.42±9.38 196.52±57.40 23.17±4.29 30.02±8.24 ≥1/2肌层 24 43.66±11.47 440.39±95.58 38.87±8.55 18.94±5.73 t — 4.75 13.16 10.11 5.85 P — < 0.01 < 0.01 < 0.01 < 0.01
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表 5 血清CA724、HE4、超声造影参数与妊娠合并卵巢癌临床病理特征关联性(r)
项目 CA724 HE4 EI TTP FIGO分期 0.702** 0.726** 0.673** -0.805** 浸润深度 0.625** 0.667** 0.606** -0.741** 分化程度 -0.753** -0.711** -0.698** 0.673** **P < 0.01
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