选择2019年3月至2019年12月于我院进行ANA检测的331名受试者为研究对象。其中男181名，女150名；年龄1~92岁；疾病类型：强直性脊柱炎(AS)75例，RA 63例，SLE 12例，干燥综合征(SS)7例，感染126例，健康人群48名。排除标准：恶性肿瘤及血液系统疾病病人；目前正在接受已知能改变ANA滴度的药物病人，药物包括普鲁卡因胺、氯丙嗪、异烟肼、奎宁和磺胺类等药物。依据年龄将病人分为4组： < 20岁组、 < 40岁组、 < 60岁组和≥60岁组。

用不含抗凝剂的真空负压采血管采集血液样本，自然凝固15~20 min后，4 000 r/m离心10 min，以HEp-2细胞为底物，采用间接免疫荧光法检测ANA，仪器为EUROBlotMasterⅡ全自动免疫印迹仪、LEICA DM500荧光显微镜及欧蒙原装试剂盒。其中ANA滴度分为1∶ 100、1∶ 320、1∶ 1 000、1∶ 3 200；核型分为核颗粒型、核均质型、核仁型、胞浆颗粒型、着丝点型、核膜型和其他型；ANA谱分为抗核糖核蛋白/抗史密斯(nRNP/Sm)、抗史密斯(Sm)、抗SS A(SS-A)、抗SS B(SS-B)、抗硬皮病70(Scl-70)、抗PM-Scl(PM-Scl)、抗Jo-1(Jo-1)、抗着丝粒蛋白B(CENP B)、抗增殖蛋白(PCNA)、抗双链DNA抗体(dsDNA)、抗核小体(AnnA)和抗组蛋白(AHA)。根据试剂盒的操作说明，按照临床标准程序检测，结果判读要求为两名经验丰富的专职工作人员共同完成。细胞核显示特异性荧光模型为阳性，细胞核不显示特异性荧光为阴性。抗体滴度样本稀释度方法：将10.1 μL样本加入1 000 μL PBS吐温缓冲液中并充分混匀(即起始稀释度为1∶ 100)，在每100 μL的PBS吐温缓冲液中加入11.1 μL前一步的浓缩液，并充分混匀，依次稀释。

331份标本中检出ANA阳性者共127份，检出率为38.4%，其中男性阳性检出率27.6%，女性51.3%。随着滴度的增加，女性ANA阳性检出率下降；男性以低滴度为主，高滴度ANA阳性检出率变化较小；女性各滴度ANA检出率高于男性。不同年龄组阳性检出率高峰出现在 < 60岁组，为51.0%； < 40岁组和 < 60岁组滴度增加阳性检出率下降，≥60岁组滴度(1∶ 1 000)阳性检出率高于滴度(1∶ 320)和滴度(1∶ 3 200)(见表 1)。

不同核型阳性检出率女性均高于男性。男性核型阳性检出率前三位为核颗粒型、胞浆颗粒型和核仁型；女性核型阳性检出率前三位为核颗粒型、胞浆颗粒型和着丝点型。不同年龄组均以核颗粒型和胞浆颗粒型为主，略有差异的是第三位， < 40岁组为核仁型， < 60岁组为核均质型和核仁型，≥60岁组为着丝点型(见表 2)。

男性除Scl-70和Sm阳性检出率略高于女性外，女性其他ANA谱阳性检出率均高于男性。女性ANA谱阳性检出率前三位为SS-A、CENP B和dsDNA/SS-B。 < 40岁组ANA谱阳性检出率前三位为SS-A、nRNP/Sm及dsDNA、AnnA； < 60岁组ANA谱阳性检出率前三位为SS-A、nRNP/Sm和SS-B；≥60岁组ANA谱阳性检出率前三位为Sm、CENP B和SS-A(见表 3)。

AS、RA、SLE、SS、感染和健康人群ANA阳性检出率分别为：36.0%、60.3%、91.7%、100.0%、29.4%和14.6%。AS与感染以低滴度为主，RA、SLE和SS在各滴度均有较高阳性检出率，健康人群在低、中、高滴度中阳性检出率相似。AS、RA、SS和健康人群以核颗粒型ANA核型为主，SLE以核颗粒型和着丝粒型为主。ANA谱方面，AS、RA、感染和健康人群未见特异性抗体，SS-A、dsDNA和AnnA在SLE中有较高阳性检出率，nRNP/Sm、SS-A、SS-B和PM-Scl在SS中有较高阳性检出率，其中SS-A和SS-B为100.0%阳性检出(见表 4)。另外，在阳性标本中，单一阳性核型为100例(78.7%)，两种核型同时阳性为27例(21.3%)。ANA谱单一抗体阳性为25例(19.7%)，两阳12例(9.4%)，三阳6例(4.7%)，四阳3例(2.4%)，五阳1例(0.8%)。

细胞内抗原自身抗体水平异常是全身性结缔组织疾病的标志，间接免疫荧光法是检测ANA最常用的常规方法，ANA现已成为诊断和评价自身免疫性病人预后的可靠生物标志物。早期诊断自身免疫性疾病，在器官损伤发生前进行治疗^[4]，可显著改善疾病临床症状及延缓疾病进展。实验室检测的不断改进，特别是检测灵敏度和特异性的提高，以及公众和临床医生对ANA和自身免疫结果的认识的提高，人们越来越重视对ANA筛查。对ANA检查结果的分析，以了解ANA分布特征，滴度、核型和抗体谱的表现与疾病的关系，有利于临床医生对疾病进行诊断、分型及分期等。研究^[5]发现ANA阳性率呈递增趋势，这可能是由于现在的生活方式改变，特别是在城市地区，也可能是由于检测灵敏度的提高。现在较为统一的认识，自身免疫性疾病在女性群体中较为高发，本研究结果显示，女性ANA阳性检出率高达51.3%，明显高于男性，与王健等^[6]研究结果相似。女性ANA阳性检出率高于男性的原因，可能是由于性激素水平的改变，部分由以前怀孕引起的免疫状态的改变，或者是由于代谢和环境因素。本研究结果显示，ANA检出率高峰出现在40~60岁人群，可能与这一年龄段人群女性性激素水平明显变化有关。王泽筠等^[7]研究结果显示，自身免疫性疾病病人检出ANA阳性率高峰人群为20~50岁，高达82.27%，与本研究结果差异较大，可能与年龄组划分和研究对象不同有关。

ANA滴度和核型可以反映自身免疫性疾病的严重程度^[8]，病人进入自发或免疫抑制剂诱导的缓解期，滴度往往逐渐下降。颗粒型核型与疾病活动性和免疫抑制剂治疗的变化没有密切的关系，颗粒型核型更趋向于症状缓解，然而从诊断的角度来看，颗粒型抗核抗体的滴度通常不是关键的，疾病活动性与非颗粒核型的滴度密切相关。因此在评估ANA滴度的意义时，需要区分ANA核型是颗粒型还是非颗粒型^[9]。本研究结果显示，颗粒型核型为主要的检出核型，但在SLE病人中可以检出25.0%的着丝粒核型。ANA在AS中有36%的阳性检出率，与陈水绵等^[10]结果基本相符。

ANA阳性也可见于非自身免疫性炎症疾病，包括急性和慢性感染。当ANA试验用于非特异性临床症状(如发烧、关节疼痛、肌痛、疲劳、皮疹或贫血)病人的初始筛查时，感染导致阳性结果的可能性将增加^[11]。本研究结果显示，感染病人ANA阳性检出率为29.4%，大部分为低滴度核颗粒型。周燕娟等^[12]研究显示，慢性阻塞性肺疾病病人ANA阳性率高达33.9%，但与疾病严重程度关联性不高。另外一项研究^[13]也表明，白血病化疗感染病人比非感染病人ANA检出率要高，对其可能的解释为：自身免疫是由多种机制介导，包括分子拟态、多克隆T和B细胞反应、交叉反应抗原、新抗原的形成和隔离/隐蔽抗原的释放。自身抗体的形成是分子模拟的结果，所有这些机制都可能有感染直接或间接参与。例如，人类氨基酸序列与细菌或病毒中发现的序列相似，研究^[14]表明DNA具有免疫原性，可以引起过敏病人的超敏反应。抗DNA自身抗体作为外来DNA抗原的异常反应而产生，异常的B细胞导致产生交叉反应的自身抗体。感染可以作为环境引物，诱导或促进遗传性易感个体的自身免疫性疾病发病，或者刺激机体产生一过性的物质，被ANA试剂盒的抗体所识别。当病人患有感染时，ANA阳性通常是短暂的，这解释了为什么一些ANA阳性病人重复检测后可能显示正常结果。

当前诊断自身免疫的建议包括检测ANA阳性、实验室检查、详细分析病人的个人和家庭史以及环境/获得性危险因素，因此要考虑感染所致的短暂ANA阳性，建议有必要进行此类病人的ANA结果复查。综上，ANA在特定人群不同性别、不同年龄段有不同的阳性检出率，此外，感染和健康人群阳性结果也应给予一定的重视。