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肺炎克雷伯菌是临床常见的一种革兰阴性菌,CHINET监测数据显示其仅次于大肠埃希菌居于临床分离细菌的第二位,但耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistant K.pneumoniae,CRKP)在耐碳青霉烯肠杆菌科细菌中所占比率最大,且近年来有迅速增加的趋势,给临床治疗和感染控制工作带来了很大的困难[1]。本研究收集2018年1-8月蚌埠市第三人民医院临床分离的14株CRKP,同时将其进行药敏试验、耐药表型筛查、基因检测和同源性分析,旨在为临床科室使用抗菌药物和医院感染防控部门提供实验依据。
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14株CRKP对临床多种抗菌药物均表现耐药,耐药率见表 1。
抗菌药物 耐药株数(n) 耐药率/% 氨苄西林 14 100.00 氨苄西林/舒巴坦 14 100.00 哌拉西林/他唑巴坦 13 92.86 头孢唑林 14 100.00 头孢替坦 11 78.57 头孢曲松 13 92.86 头孢他啶 14 100.00 头孢吡肟 13 92.86 亚胺培南 14 100.00 厄他培南 14 100.00 氨曲南 11 78.57 阿米卡星 8 57.14 庆大霉素 11 78.57 妥布霉素 10 71.43 复方新诺明 3 21.43 左氧氟沙星 7 50.00 环丙沙星 8 57.14 呋喃妥因 8 57.14 表 1 14株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌对常用抗菌药物的耐药率(%)
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14株CRKP中改良Hodge试验11株阳性,阳性率为78.57%。改良Hodge试验的阳性待测菌株见图 1。
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以已知产KPC-2型的肺炎克雷伯菌为阳性对照,双蒸水为阴性对照,PCR扩增产物电泳结果显示有12株CRKP经基因扩增后与阳性对照的电泳条带位置相同,表明检出KPC-2基因,其阳性率为85.71%,扩增产物电泳图见图 2。
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14株CRKP的指纹图谱见图 3,其扩增条带数多为3~7条,根据ERIC-PCR产物电泳指纹图谱将其分为3个亚型,其中A型11株(ICU病房5株,神经外科3株,新生儿病房2株,普外科1株),B型2株(新生儿病房2株),C型1株(呼吸内科1株)。
耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌耐药率及同源性分析
Analysis of drug resistance rate and homology of carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae
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摘要:
目的分析耐碳氢酶烯肺炎克雷伯菌的耐药基因及流行病学特征。 方法收集2018年1-8月临床分离出的14株耐碳氢酶烯类肺炎克雷伯菌,使用VITEK Compact微生物系统进行菌株鉴定和药敏试验,改良Hodge试验检测碳青霉烯酶,PCR试验检测耐药基因,肠杆菌科基因间重复序列聚合酶链反应(ERIC-PCR)分析菌株同源性。 结果14株耐碳氢酶烯类肺炎克雷伯菌对青霉素类、碳青霉烯类、氨曲南和头孢菌素类等抗菌药物表现出较高的耐药性。11株肺炎克雷伯菌的碳青霉烯酶表型阳性,PCR检测发现12株肺炎克雷伯菌KPC-2基因阳性,14株肺炎克雷伯菌根据ERIC-PCR结果分成3型,其中A型为主,集中在ICU病房和神经外科。 结论耐碳氢酶烯类肺炎克雷伯菌表现为严重的多重耐药性,以产生KPC酶和A型为主。 Abstract:ObjectiveTo analyze the drug-resistant genes and epidemiological characteristics of carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae. MethodsFourteen strains of carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae were collected from January to August 2018, and the strain identification and drug susceptibility test were implemented using the VITEK Compact system.The modified Hodge test was used to detect the carbapenems, the PCR test was used to detect the drug-resistant genes, and the homology of the strains was analyzed using intergene repeated sequence polymerase chain reaction(ERIC-PCR). ResultsFourteen strains of carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae were highly resistant to penicillins, carbapenems, aztreonam and cephalosporins.Eleven strains of Klebsiella pneumoniae were positive in the modified Hodge test.The positive KPC-2 gene in 12 strains of Klebsiella pneumoniae were identified by PCR.The 14 strains could be classified into 3 genotypes, the type A was main, which was mainly isolated from ICU and neurosurgery. ConclusionsThe carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae shows the severe multi-drug resistance, mainly producing KPC enzyme and type A. -
Key words:
- Klebsiella pneumoniae /
- carbapenemase /
- modified Hodge test
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表 1 14株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌对常用抗菌药物的耐药率(%)
抗菌药物 耐药株数(n) 耐药率/% 氨苄西林 14 100.00 氨苄西林/舒巴坦 14 100.00 哌拉西林/他唑巴坦 13 92.86 头孢唑林 14 100.00 头孢替坦 11 78.57 头孢曲松 13 92.86 头孢他啶 14 100.00 头孢吡肟 13 92.86 亚胺培南 14 100.00 厄他培南 14 100.00 氨曲南 11 78.57 阿米卡星 8 57.14 庆大霉素 11 78.57 妥布霉素 10 71.43 复方新诺明 3 21.43 左氧氟沙星 7 50.00 环丙沙星 8 57.14 呋喃妥因 8 57.14 -
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