• 中国科技论文统计源期刊
  • 中国科技核心期刊
  • 中国高校优秀期刊
  • 安徽省优秀科技期刊

留言板

尊敬的读者、作者、审稿人, 关于本刊的投稿、审稿、编辑和出版的任何问题, 您可以本页添加留言。我们将尽快给您答复。谢谢您的支持!

姓名
邮箱
手机号码
标题
留言内容
验证码

流式细胞术检测脊髓损伤大鼠局部浸润的巨噬细胞亚群

朱海 胡建国 吕合作

引用本文:
Citation:

流式细胞术检测脊髓损伤大鼠局部浸润的巨噬细胞亚群

    作者简介: 朱海(1986-),男,硕士研究生.
    通讯作者: 吕合作
  • 基金项目:

    国家自然科学基金资助项目(81071268,81171465,81271363)

    教育部科学技术研究重点资助项目(210103)

    安徽省第五批(2010年度)优秀青年科技基金资助项目(10040606Y13)

Detection of infiltrated macrophage subtypes in injured spinal cord of rats by flow cytometry

    Corresponding author: L He-zuo
  • 摘要: 目的:建立检测脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)大鼠局部浸润巨噬细胞亚群的流式细胞术方法。方法:取5只健康雌性SD大鼠,采用纽约大学SCI撞击仪系统制作重物坠落SCI模型为SCI组;另设5只假手术大鼠为假手术组。SCI术后7 d收集损伤的脊髓,制备单细胞悬液,采用Percoll原液密度梯度离心法浓缩浸润的巨噬细胞。分别以CD68与CD86或CD163的不同荧光标记抗体组合作为鉴定M1和M2型巨噬细胞的标志,用流式细胞术检测损伤局部巨噬细胞亚群的变化。结果:假手术组大鼠脊髓单细胞悬液中,CD68+细胞占细胞总数的(0. 070. 02)%,CD86+细胞和CD163+细胞分别占CD68+细胞的(9. 903. 28)%和(4. 950. 17)%;而SCI组大鼠脊髓单细胞悬液中,CD68+细胞的百分比为(0. 210. 09)%,CD86+细胞和CD163+细胞分别占CD68+细胞的(18. 710. 49)%和(27. 073. 74)%,差异均有统计学意义(P0. 05~P0. 01)。结论:以小鼠抗大鼠CD68、小鼠抗大鼠CD86、小鼠抗大鼠CD163为标志,采用流式细胞术可以成功检测SCI局部浸润的M1和M2型巨噬细胞亚群。
  • [1] Mcdonald JW,Sadowsky C. Spinal-cord injury[J]. Lancet,2002,359(9304) : 417 - 425.
    [2] Bracken MB,Freeman DJ,Hellenbrand K. Incidence of acute traumatic hospitalized spinal cord injury in the United States,1970 - 1977[J]. Am J Epidemiol,1981,113(6) : 615 - 622.
    [3] Garfin SR,Shackford SR,Marshall LF,et al. Care of the multiply injured patient with cervical spine injury[J]. Clin Orthop Relat Res,1989(239) : 19 - 29.
    [4] Woodruff BA,Baron RC. A description of nonfatal spinal cord injury using a hospital-based registry[J]. Am J Prev Med,1994,10(1) : 10 - 14.
    [5] Dobkin BH,Havton LA. Basic advances and new avenues in therapy of spinal cord injury[J]. Annu Rev Med,2004,55:255 - 282.
    [6] Bomstein Y,Marder JB,Vitner K,et al. Features of skin coincubated macrophages that promote recovery from spinal cord injury[J]. J Neuroimmunol,2003,142(1 /2) : 10 - 16.
    [7] Saxena V,Lienesch DW,Zhou M,et al. Dual roles of immunoregulatoryb cytokine TGF- in the pathogenesis of autoimmunity-mediated organ damage[J]. J Immunol,2008,1 80(3) : 1903 - 1912.
    [8] Xu L,Xu Z,Xu M. Glucocorticoid treatment restores the impaired suppressive function of regulatory T cells in patients with relapsing-remitting multiple sclerosis[J]. Clin Exp Immunol,2009,158(1) : 26 - 30.
    [9] Gordon S,Taylor PR. Monocyte and macrophage heterogeneity[J]. Nat Rev Immunol,2005,1 2(5) : 953 - 964.
    [10] Reece JJ,Siracusa MC,Scott AL. Innate immune responses to lung-stage helminth infection induce alternatively activated alveolar macrophages[J]. Infect Hnmun,2006,74 (9) : 4970 -4981.
    [11] Dong L,Wang S,Chen M,et al. The activation of macrophage and upregulation of CD40 eostinmlatory molecule in lipopolysac eharide induced acute lung injury[J]. J Biomed Biotechnol,2008: 852571.
    [12] Basso DM,Beattie MS,Bresnahan JC. Graded histological and locomotor outcomes after spinal cord contusion using the NYU weight drop device versus transaction[J]. Exp Neurol,1996,1 39(2) : 244 - 256.
  • [1] 骆二红胡建国吕合作 . SD大鼠脊髓损伤前后外周血T淋巴细胞亚群的变化. 蚌埠医学院学报, 2012, 36(6): 621-623,626.
    [2] 江政松胡建国吕合作 . 大鼠脊髓损伤前后外周血CD3+CD8+CD28-和CD3+CD8+CD28+细胞亚群的变化. 蚌埠医学院学报, 2015, 40(5): 561-563,568. doi: 10.13898/j.cnki.issn.1000-2200.2015.05.001
    [3] 赵修春姚春艳李柏青徐凤珍 . 流式细胞术检测小鼠中性粒细胞吞噬功能的方法学探讨. 蚌埠医学院学报, 2004, 29(5): 388-390.
    [4] 蔡辉姜丽娜李柏青 . 流式细胞术检测中性粒细胞产生活性氧方法学探讨. 蚌埠医学院学报, 2010, 35(6): 541-544,547.
    [5] 黄丽王春赵士弟 . 针刺预处理对大鼠小脑浦肯野细胞缺血性损伤的影响. 蚌埠医学院学报, 2016, 41(1): 7-9,15. doi: 10.13898/j.cnki.issn.1000-2200.2016.01.002
    [6] 吕合作李柏青 . 胞内磷酸化蛋白酪氨酸激酶的流式细胞术检测. 蚌埠医学院学报, 2005, 30(2): 95-97.
    [7] 汪洪涛唐洁姚春艳宋传旺马华郭术俊李柏青钱中清 . 《流式细胞术》课程分层次教学探索与实践. 蚌埠医学院学报, 2018, 43(7): 970-972. doi: 10.13898/j.cnki.issn.1000-2200.2018.07.039
    [8] 杨雯雯查艳芳毛菊胡世莲程民 . 流式细胞术和病理骨髓活检在非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯的诊断价值比较. 蚌埠医学院学报, 2022, 47(2): 227-230. doi: 10.13898/j.cnki.issn.1000-2200.2022.02.023
    [9] 金齐力姜丽娜姚春艳闵宏林李柏青 . 流式细胞术检测单核巨噬细胞吞噬荧光素标记结核分枝杆菌的方法学探讨. 蚌埠医学院学报, 2008, 33(5): 505-508.
    [10] 陈银玲童旭辉唐媛媛齐佳佳杜家如董淑英 . P2X7受体拮抗剂BBG抗大鼠星形胶质细胞缺氧/复氧损伤的作用. 蚌埠医学院学报, 2017, 42(6): 701-705. doi: 10.13898/j.cnki.issn.1000-2200.2017.06.001
    [11] 路黎娟徐梅佳董焱 . 重组人粒细胞集落刺激因子对缺血缺氧性脑损伤新生大鼠凋亡诱导因子表达的影响. 蚌埠医学院学报, 2016, 41(12): 1545-1549. doi: 10.13898/j.cnki.issn.1000-2200.2016.12.002
    [12] 方典梁欢王佳慧汪敬业李正红高琴 . 线粒体细胞色素c释放抑制剂对大鼠全脑缺血再灌注损伤炎症反应的作用. 蚌埠医学院学报, 2022, 47(1): 7-12. doi: 10.13898/j.cnki.issn.1000-2200.2022.01.002
    [13] 刘小林周彦孙林 . 流式细胞仪检测网织红细胞百分比性能评价. 蚌埠医学院学报, 2010, 35(8): 828-830.
    [14] 丁海周建生胡汝麒 . 大鼠坐骨神经去细胞基膜管异体移植的比较研究. 蚌埠医学院学报, 2005, 30(6): 479-482.
    [15] 张社红项平 . 大鼠骨髓内皮祖细胞移植到裸鼠体内的分化. 蚌埠医学院学报, 2008, 33(6): 637-639.
    [16] 刘继松方勇姚敏俞为荣杜娟 . 重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子对烫伤大鼠创面愈合及新生血管化的影响. 蚌埠医学院学报, 2012, 36(1): 17-19.
    [17] 何金根潘家华楼皖玲刘辉 . 维生素A和布地奈德对哮喘大鼠外周血T细胞亚群和调节性T细胞的影响. 蚌埠医学院学报, 2011, 36(5): 452-455.
    [18] 胡建国王凤超钟政荣陆佩华 . 大鼠GAP-43基因的克隆及其在COS-7细胞的表达. 蚌埠医学院学报, 2007, 32(3): 253-255.
    [19] 张社红项平 . 大鼠骨髓内皮祖细胞的分离培养及其生物学特性. 蚌埠医学院学报, 2008, 33(5): 509-511,631.
    [20] 赵士弟黄丽陈前芬 . 缺血对大鼠小脑浦肯野细胞动作电位编码的影响. 蚌埠医学院学报, 2009, 34(6): 461-463.
  • 加载中
计量
  • 文章访问数:  4343
  • HTML全文浏览量:  579
  • PDF下载量:  548
  • 被引次数: 0
出版历程
  • 收稿日期:  2012-12-26
  • 刊出日期:  2013-08-15

流式细胞术检测脊髓损伤大鼠局部浸润的巨噬细胞亚群

    通讯作者: 吕合作
    作者简介: 朱海(1986-),男,硕士研究生.
  • 1. 1. 蚌埠医学院感染与免疫安徽省重点实验室, 安徽蚌埠 233030;
  • 2.  2. 蚌埠医学院第一附属医院检验科, 安徽蚌埠 233004;
  • 3.  3. 蚌埠医学院组织移植安徽省重点实验室, 安徽蚌埠 233030
基金项目:  国家自然科学基金资助项目(81071268,81171465,81271363)教育部科学技术研究重点资助项目(210103)安徽省第五批(2010年度)优秀青年科技基金资助项目(10040606Y13)

摘要: 目的:建立检测脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)大鼠局部浸润巨噬细胞亚群的流式细胞术方法。方法:取5只健康雌性SD大鼠,采用纽约大学SCI撞击仪系统制作重物坠落SCI模型为SCI组;另设5只假手术大鼠为假手术组。SCI术后7 d收集损伤的脊髓,制备单细胞悬液,采用Percoll原液密度梯度离心法浓缩浸润的巨噬细胞。分别以CD68与CD86或CD163的不同荧光标记抗体组合作为鉴定M1和M2型巨噬细胞的标志,用流式细胞术检测损伤局部巨噬细胞亚群的变化。结果:假手术组大鼠脊髓单细胞悬液中,CD68+细胞占细胞总数的(0. 070. 02)%,CD86+细胞和CD163+细胞分别占CD68+细胞的(9. 903. 28)%和(4. 950. 17)%;而SCI组大鼠脊髓单细胞悬液中,CD68+细胞的百分比为(0. 210. 09)%,CD86+细胞和CD163+细胞分别占CD68+细胞的(18. 710. 49)%和(27. 073. 74)%,差异均有统计学意义(P0. 05~P0. 01)。结论:以小鼠抗大鼠CD68、小鼠抗大鼠CD86、小鼠抗大鼠CD163为标志,采用流式细胞术可以成功检测SCI局部浸润的M1和M2型巨噬细胞亚群。

English Abstract

参考文献 (12)

目录

    /

    返回文章
    返回