大鼠骨髓间充质干细胞对同种异体T淋巴细胞的作用及其机制

王海涛; 王春生

留言板

尊敬的读者、作者、审稿人, 关于本刊的投稿、审稿、编辑和出版的任何问题, 您可以本页添加留言。我们将尽快给您答复。谢谢您的支持!

姓名
邮箱
手机号码
标题
留言内容
验证码

大鼠骨髓间充质干细胞对同种异体T淋巴细胞的作用及其机制

王海涛 , 王春生

文章导航 > 蚌埠医学院学报 > 2010, 35 > 12: (1210-1213)

引用本文:

Citation:

大鼠骨髓间充质干细胞对同种异体T淋巴细胞的作用及其机制

王海涛¹,
王春生²

1. 安徽医科大学第一附属医院心脏血管外科, 安徽合肥 230022;
2. 复旦大学附属中山医院心脏外科, 上海市心血管病研究所, 上海 200032

作者简介: 王海涛(1974-),男,博士.

基金项目:
上海市科委重大项目"多器官移植的临床应用"(024119001)
中图分类号: R329.24

Effect of rat bone mesenchymal stem cells on allogeneic T cell

1. Department of Cardiovascular Surgery, The First Affiliated Hospital of Anhui Medical University, Hefei Anhui 230022;
2. Department of Cardiovascular Surgery, Zhongshan Hospital, Fudan University, Shanghai Institute of Cardiovascular Disease, Shanghai 200032, China
CLC number: R329.24

摘要: 目的:探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)在混合淋巴细胞反应(MLR)中对同种异体T淋巴细胞免疫应答反应的影响,并探讨其作用机制。方法:建立MSCs和同种异体T淋巴细胞共培养体系,反应体系总量250μl。以SD大鼠的脾T淋巴细胞为刺激细胞,以W istar大鼠的脾T淋巴细胞为反应细胞,分为6组。组Ⅰ:对照组,1×10⁵刺激细胞和1×10⁵反应细胞共同培养;组Ⅱ:1×10⁵反应细胞与1×10⁴SD大鼠的MSCs共同培养;组Ⅲ:1×10⁵刺激细胞和1×10⁵反应细胞并加入1×10⁴SD大鼠的MSCs共同培养;组Ⅳ:细胞种类及数量同组Ⅲ,另加1-甲基色氨酸(1-MT)(终浓度1 mol/L);组Ⅴ:细胞种类及数量同组Ⅲ,另加植物刺激素(终浓度2μg/m l);组Ⅵ:每孔加入反应细胞和刺激细胞各1×10⁵及MSC 1×10³。混合培养120 h,结束培养前13 h,每孔加入³H-TdR 20μl,以液闪测定仪测定各组的每分钟脉冲数。反相高效液相色谱法检测MSCs和MLR共培养体系中色氨酸含量。结果:MSCs可以抑制混合淋巴细胞培养体系中T淋巴细胞增殖,并呈现出剂量依赖关系;同时MSCs和MLR共培养体系中色氨酸含量明显降低。1-MT可以阻断这一作用。结论:MSCs在体外可抑制同种异体T淋巴细胞的免疫应答,吲哚胺2,3双加氧酶参与了这种免疫抑制作用。
- 干细胞,间充质 /
- 免疫应答 /
- 吲哚胺2,3双加氧酶 /
- 大鼠
Abstract: Objective: To investigate the immunogenity and immune regular ability of mesenchymal stem cells (MSCs) derived from rat bone marrow in mixed lymphocyte culture.Methods: MSCs and mixed lymphocyte reaction (MLR) cultures were set up.Splenic lymphocytes from SD rats were used as stimulator cells,and splenic lymphocytes from Wistar rat as responder cells.The study was composed of 6 groups.Group Ⅰ,the control group,was co-cultured with 1×10⁵ stimulator cells and 1×10⁵ responder cells,group Ⅱwith 1×10⁴ MSCs from SD rats with the same amount of stimulator cells as group Ⅰ,group Ⅲ with 1×10⁴ MSCs from SD rats and the same amount of stimulator and responder cells as group Ⅰ,group Ⅳ with 1×10⁴ MSCs from SD rats and the same amount of stimulator and responder cells as group Ⅰ plus 1-methyltryptophan (1-MT),group V with 1×10⁴ EPC from SD rats and the same amount of stimulator and responder cells as group Ⅰ plus phytohemagglutinin (PHA) as a mitogen,and group VI with 1×10³ MSCs and the same amount of stimulator and responder cells as group Ⅰ.The culture time was 120 hours for each group.The number of lymphocyte in each group was calculated with a liquid scintillation counter.The MSCs and the content of tryptophane were determined by TRP-HPLC.Results: MSCs inhibited T-lymphocytes proliferation of MLR culture in a dose-dependent manner.The content of tryptophan decreased greatly in MSCs and MLR cultures.1-MT reversed the effect of MSCs.Conclusions: MSCs could suppress T lymphocyte responses via IDO enzyme activity.
- stem cells,mesenchymal /
- immune response /
- indoleamine 2,3 dioxygenase /
- rats

[1]	刘晓斌 , 刘永仙 , 葛繁梅 , 符兆英 . 不同类型HBV感染者T细胞对HBV抗原蛋白的免疫应答研究. 蚌埠医学院学报, 2015, 40(12): 1621-1623. doi: 10.13898/j.cnki.issn.1000-2200.2015.12.002
[2]	孔评石 , 夏惠 . 树突状细胞在疟疾红内期免疫应答中功能的研究进展. 蚌埠医学院学报, 2011, 36(3): 318-323.
[3]	谢扬虎 , 李玉云 . 人脐带间充质干细胞分离培养建立及其生物学特性观察. 蚌埠医学院学报, 2010, 35(10): 982-985.
[4]	许克庆 , 肖玉周 . 生长因子相关的骨髓间充质干细胞成骨诱导研究进展. 蚌埠医学院学报, 2011, 36(4): 426-429.
[5]	项平 , 黄锦桃 , 撒亚莲 , 刘爱军 , 李海标 . 大鼠骨髓间充质干细胞的培养及鉴定. 蚌埠医学院学报, 2005, 30(1): 1-3.
[6]	唐碧 , 高大胜 , 侯秀杰 , 史晓俊 , 王洪巨 , 单锋 . 二十二碳六烯酸下调心房颤动大鼠心房肌细胞双孔内向整流相关性钾通道-1的表达. 蚌埠医学院学报, 2014, 39(8): 1001-1005.
[7]	刘青 , 朱永娜 , 姜丽娜 , 郑银竹 , 薛魁 , 张晓东 , 刘茜 . 白细胞介素-35和叉头样转录因子3在大鼠根尖周炎中的表达. 蚌埠医学院学报, 2023, 48(4): 432-435. doi: 10.13898/j.cnki.issn.1000-2200.2023.04.003
[8]	姚泽忠 , 赵振江 , 赵瑞斌 . 肺炎克雷伯杆菌肺炎大鼠血清白介素-2、12和单核细胞趋化蛋白-1水平及干预研究. 蚌埠医学院学报, 2013, 37(10): 1253-1256,1259.
[9]	陈银玲 , 童旭辉 , 唐媛媛 , 齐佳佳 , 杜家如 , 董淑英 . P2X7受体拮抗剂BBG抗大鼠星形胶质细胞缺氧/复氧损伤的作用. 蚌埠医学院学报, 2017, 42(6): 701-705. doi: 10.13898/j.cnki.issn.1000-2200.2017.06.001
[10]	韦莉 , 金齐力 , 管俊昌 , 孔晓明 . 产单核细胞李斯特菌感染小鼠脾脏树突状细胞亚群和表型的变化. 蚌埠医学院学报, 2013, 37(6): 645-647,651.
[11]	买月琴 , 陶志勇 , 刘丹 , 陈勇 , 方强 , 李柏青 , 夏惠 . 间日疟现症患者外周血树突状细胞亚群的变化. 蚌埠医学院学报, 2012, 36(10): 1144-1146.
[12]	金齐力 , 孙悝 , 吕小艳 , 韦莉 . 结核分枝杆菌感染对小鼠树突状细胞功能的影响. 蚌埠医学院学报, 2015, 40(9): 1145-1147,1151. doi: 10.13898/j.cnki.issn.1000-2200.2015.09.001
[13]	陈信 , 彭万胜 , 周瑞 , 赵茜 , 陈云 , 周艳 , 王越 , 高亚 . 孟鲁司特钠对支气管肺发育不良大鼠Th1Th2细胞平衡及其相关细胞因子水平的调节作用. 蚌埠医学院学报, 2020, 45(1): 5-8. doi: 10.13898/j.cnki.issn.1000-2200.2020.01.002
[14]	杨自金 , 卢思广 , 高长龙 , 郭佳丽 , 苗莉 , 李红梅 . 人脐血间充质干细胞在脑瘫大鼠脑内定植和存活能力的研究. 蚌埠医学院学报, 2016, 41(8): 985-987,991. doi: 10.13898/j.cnki.issn.1000-2200.2016.08.002
[15]	张社红 , 项平 . 大鼠骨髓内皮祖细胞移植到裸鼠体内的分化. 蚌埠医学院学报, 2008, 33(6): 637-639.
[16]	丁海 , 周建生 , 胡汝麒 . 大鼠坐骨神经去细胞基膜管异体移植的比较研究. 蚌埠医学院学报, 2005, 30(6): 479-482.
[17]	黄丽 , 王春 , 赵士弟 . 针刺预处理对大鼠小脑浦肯野细胞缺血性损伤的影响. 蚌埠医学院学报, 2016, 41(1): 7-9,15. doi: 10.13898/j.cnki.issn.1000-2200.2016.01.002
[18]	禹莉 , 章尧 , 陈昌杰 , 高绪锋 , 王惠 . 同型半胱氨酸对A₇r₅细胞增殖及MMP-2表达的影响. 蚌埠医学院学报, 2008, 33(3): 266-269.
[19]	王旋宇 , 朱永娜 , 薛魁 , 武庆华 , 姜丽娜 , 朱晨晨 , 张晓东 . 白细胞介素34对大鼠根尖牙乳头干细胞增殖的影响. 蚌埠医学院学报, 2020, 45(12): 1598-1601. doi: 10.13898/j.cnki.issn.1000-2200.2020.12.002
[20]	陈传好 , 韩卉 , 陈昌杰 . 大鼠失神经支配表情肌NT-3基因转染的实验研究. 蚌埠医学院学报, 2004, 29(2): 104-105.

点击查看大图

计量

文章访问数: 3303
HTML全文浏览量: 266
PDF下载量: 16
被引次数: 0

大鼠骨髓间充质干细胞对同种异体T淋巴细胞的作用及其机制

王海涛¹
王春生²

作者简介: 王海涛(1974-),男,博士.

1. 安徽医科大学第一附属医院心脏血管外科, 安徽合肥 230022;
2. 复旦大学附属中山医院心脏外科, 上海市心血管病研究所, 上海 200032

收稿日期: 2010-06-09

基金项目: 上海市科委重大项目"多器官移植的临床应用"(024119001)

关键词:

摘要: 目的:探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)在混合淋巴细胞反应(MLR)中对同种异体T淋巴细胞免疫应答反应的影响,并探讨其作用机制。方法:建立MSCs和同种异体T淋巴细胞共培养体系,反应体系总量250μl。以SD大鼠的脾T淋巴细胞为刺激细胞,以W istar大鼠的脾T淋巴细胞为反应细胞,分为6组。组Ⅰ:对照组,1×10⁵刺激细胞和1×10⁵反应细胞共同培养;组Ⅱ:1×10⁵反应细胞与1×10⁴SD大鼠的MSCs共同培养;组Ⅲ:1×10⁵刺激细胞和1×10⁵反应细胞并加入1×10⁴SD大鼠的MSCs共同培养;组Ⅳ:细胞种类及数量同组Ⅲ,另加1-甲基色氨酸(1-MT)(终浓度1 mol/L);组Ⅴ:细胞种类及数量同组Ⅲ,另加植物刺激素(终浓度2μg/m l);组Ⅵ:每孔加入反应细胞和刺激细胞各1×10⁵及MSC 1×10³。混合培养120 h,结束培养前13 h,每孔加入³H-TdR 20μl,以液闪测定仪测定各组的每分钟脉冲数。反相高效液相色谱法检测MSCs和MLR共培养体系中色氨酸含量。结果:MSCs可以抑制混合淋巴细胞培养体系中T淋巴细胞增殖,并呈现出剂量依赖关系;同时MSCs和MLR共培养体系中色氨酸含量明显降低。1-MT可以阻断这一作用。结论:MSCs在体外可抑制同种异体T淋巴细胞的免疫应答,吲哚胺2,3双加氧酶参与了这种免疫抑制作用。

English Abstract

Effect of rat bone mesenchymal stem cells on allogeneic T cell

1. Department of Cardiovascular Surgery, The First Affiliated Hospital of Anhui Medical University, Hefei Anhui 230022;
2. Department of Cardiovascular Surgery, Zhongshan Hospital, Fudan University, Shanghai Institute of Cardiovascular Disease, Shanghai 200032, China

Received Date: 2010-06-09

Abstract: Objective: To investigate the immunogenity and immune regular ability of mesenchymal stem cells (MSCs) derived from rat bone marrow in mixed lymphocyte culture.Methods: MSCs and mixed lymphocyte reaction (MLR) cultures were set up.Splenic lymphocytes from SD rats were used as stimulator cells,and splenic lymphocytes from Wistar rat as responder cells.The study was composed of 6 groups.Group Ⅰ,the control group,was co-cultured with 1×10⁵ stimulator cells and 1×10⁵ responder cells,group Ⅱwith 1×10⁴ MSCs from SD rats with the same amount of stimulator cells as group Ⅰ,group Ⅲ with 1×10⁴ MSCs from SD rats and the same amount of stimulator and responder cells as group Ⅰ,group Ⅳ with 1×10⁴ MSCs from SD rats and the same amount of stimulator and responder cells as group Ⅰ plus 1-methyltryptophan (1-MT),group V with 1×10⁴ EPC from SD rats and the same amount of stimulator and responder cells as group Ⅰ plus phytohemagglutinin (PHA) as a mitogen,and group VI with 1×10³ MSCs and the same amount of stimulator and responder cells as group Ⅰ.The culture time was 120 hours for each group.The number of lymphocyte in each group was calculated with a liquid scintillation counter.The MSCs and the content of tryptophane were determined by TRP-HPLC.Results: MSCs inhibited T-lymphocytes proliferation of MLR culture in a dose-dependent manner.The content of tryptophan decreased greatly in MSCs and MLR cultures.1-MT reversed the effect of MSCs.Conclusions: MSCs could suppress T lymphocyte responses via IDO enzyme activity.